桑黄菌丝多糖的提取及氧化还原性分析

通过对桑黄多糖提取方法进行选取并测定其含量,选出提取率高的多糖提取方法以及最优条件,结果表明超声波辅助酶法较水浴辅助溶剂浸提法和微波辅助提取法得率更高,最佳提取条件为料液比1∶20(g:mL)、超声波提取时间40 min、超声波功率300 W、加酶量0.15%,在此条件下,桑黄菌丝多糖得率为(6.58±0.01)%;通过HPLC外标法对桑黄菌丝多糖进行成分分析,得出桑黄菌丝体多糖主要单糖成分有甘露糖、氨基葡萄糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、氨基半乳糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖;通过对桑黄菌丝多糖进行氧化还原分析,得出桑黄菌丝多糖均有一定的抗氧化能力,但相较VC,桑黄菌丝多糖的抗氧化能力效果略弱。

桑黄菌丝体多糖的分离纯化及抗氧化、抗肿瘤活性分析

采用水提醇沉法制备桑黄菌丝体粗多糖,分别用终浓度为30%、45%和60%的硫酸铵溶液对桑黄菌丝体中粗多糖进行粗分离,并比较所得各多糖组分的抗氧化、抗肿瘤活性。对其中活性强的组分采用离子交换树脂柱色谱纯化,采用高效排阻色谱-折光示差检测器-多角度光散射仪对纯化多糖进行均一性分析和分子量测定。结果显示,45%硫酸铵分离多糖IPS45显示最强的抗肿瘤活性及较好的清除超氧阴离子活性,IPS45经DEAE-52纤维素离子交换柱纯化得到四个级分,经高效排阻色谱分析,其中蒸馏水洗脱级分(IPS45-W)为均一多糖,重均分子量为79.1 kDa;气相色谱分析其单糖组成为甘露糖:葡萄糖:半乳糖:未知单糖,摩尔比为1.57:8.38:1.09:1.00。IPS45-W可抑制HepG2细胞生长,当浓度为50μg/mL时,对HepG2细胞的抑制率为56.74%,高于前期研究的乙醇沉淀分离所得桑黄菌丝体均一多糖同浓度下11%~35%的抑制率。该结果为不同组成的桑黄多糖的分离和应用提供依据。

桑黄菌丝体多糖的提取及其免疫活性研究

采用超声波-微波协同法提取桑黄菌丝体多糖。通过单因素和L_9(3~4)正交试验研究物料粒度、料液比、微波功率、微波处理时间对桑黄菌丝体多糖提取率的影响。试验结果表明,微波功率、物料粒度和微波处理时间对桑黄菌丝体多糖提取率均有显著的影响。确定最佳的提取参数为:料液比1∶25(g/mL),物料粒度0.150 mm,超声波功率为250 W,微波功率500 W,微波处理时间6 min。在最佳条件下,桑黄菌丝体多糖提取率可达5.316%;在一定的剂量范围内,提取到的桑黄菌丝体多糖能明显增强小鼠的免疫功能。

碱提桑黄菌丝体多糖的抗氧化活性

为了研究碱提桑黄菌丝体多糖PL-N的抗氧化活性。利用物理、化学方法分析了PL-N的化学组成及基本理化性质,在此基础上,通过体外抗氧化模型、细胞试验和D-半乳糖所致的小鼠亚急性衰老模型综合评价了PL-N对DPPH和羟自由基的清除作用、过氧化氢诱导SH-SY5Y神经细胞的保护作用及体内抗氧化活性。结果表明:PL-N的总糖和糖醛酸含量分别为84.92%和16.92%,不含蛋白质,主要由D-阿拉伯糖、D-木糖、D-葡萄糖和D-半乳糖组成,其分子摩尔比为5.5∶7.8∶1.8∶1。PL-N具有明显的清除自由基能力,且呈剂量依赖关系,在2.0 mg/m L时,PL-N的DPPH和羟自由基清除率分别为72.1%和83.3%。同时,在80μg/m L时,PL-N预处理对氧化损伤细胞的存活率达到88.7%,揭示其突出的体外抗氧化活性。与模型组相比,灌胃高剂量PL-N的小鼠脏器指数、血清和肝脏中的抗氧化酶活性和总抗氧化能力均极显著增加(P<0.01),丙二醛含量极显著降低(P<0.01)。由此可见,PL-N具有突出的抗氧化活性,可作为功能性食品应用于膳食、理疗中。

桑黄菌丝体多糖的提取及其抗氧化活性研究

研究了桑黄(Phellinus igniarius)菌丝体多糖热水提取的最佳工艺条件及其体外抗氧化活性。通过单因素实验和正交实验对提取工艺进行优化,考察提取时间、温度和料液比及提取次数对桑黄菌丝体多糖得率的影响。最佳提取工艺条件为温度100℃,时间2 h,料液比1∶15 g/m L,提取2次。在该条件下,桑黄菌丝体多糖得率为6.64%。该粗多糖含量为69.29%,蛋白含量为3.20%。浓度为0.2 mg/m L的桑黄菌丝体多糖对超氧负离子清除率为49.4%,对羟基自由基的清除率为28.7%,还原力为0.072,低于V_C相对应的抗氧化能力。

桑黄菌丝体多糖对胶原诱导性关节炎大鼠的治疗作用

[目的]研究桑黄菌丝体多糖对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗效果,并探讨其作用机制。[方法]采用水提醇沉法提取桑黄菌丝体多糖。将60只大鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、桑黄菌丝体多糖低(100 mg·kg-1)、中(200 mg·kg-1)、高(400 mg·kg-1)剂量组,每组10只。给药期间采用足趾肿胀容积法测定大鼠非致炎足关节肿胀程度。30 d后麻醉大鼠,截取非致炎足做关节组织病理切片,显微镜下观察。ELISA法检测血清中白介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-10(IL-10)的表达水平。[结果]与模型组比较,阳性对照组和桑黄菌丝体多糖各剂量组均能显著抑制非致炎足足趾肿胀(P<0.05),改善关节组织病理情况,降低IL-17、TNF-α、IL-1β的表达(P<0.05),升高IL-10的含量(P<0.05)。[结论]桑黄菌丝体多糖通过抑制炎症细胞因子IL-17、TNF-α、IL-1β的表达,促进抑炎因子IL-10的表达对CIA大鼠起到治疗作用。

桑黄菌丝体对小鼠肉瘤S_(180)的抑制作用

建立荷瘤(S180)小鼠模型,用桑黄(Phellinus igniarius)菌丝体灌胃(低、中和高剂量组分别为0.25、0.5和1.0g/kg/d)至模型组肿瘤直径达1cm停止给药,测定抑瘤率和各脏器指数。结果表明:阳性对照组(顺铂3mg/kg/d)显著抑制小鼠体重的增加,而桑黄菌丝体3个剂量组对小鼠体重的增加没有显著的抑制作用;低、中和高3个剂量组抑瘤率分别为18.3%、29.5%和40.7%。桑黄菌丝体对脾脏指数与胸腺指数的影响小于阳性对照药物顺铂。

桑黄菌丝体研究进展

本文对珍稀药用真菌桑黄近年来国内外液体发酵研究的进展进行了综述，概述了桑黄液体发酵工艺的优化及其代谢产物的成分、化学结构和生物活性，产品研发等方面的研究进展，为桑黄的进一步开发利用提供参考。

超声波辅助提取桑黄菌丝体多糖工艺研究

通过正交试验研究超声功率、超声温度、超声时间对桑黄菌丝体多糖提取率的影响。结果表明,超声功率、超声时间对桑黄菌丝体多糖的提取率均有显著影响。确定最佳提取条件为超声时间15 min,超声功率350 W,超声温度65℃。在最佳条件下,桑黄菌丝体多糖的提取率为4.61%。

培养条件对桑黄菌丝体生物量的影响

在前期筛选出适宜液体发酵培养基配方的基础上,通过发酵条件的筛选优化桑黄发酵工艺。结果最适桑黄菌丝体生长的液体发酵条件为培养温度27℃,装液量30 mL/50 mL,种龄5 d,接种量10%,培养时间7 d。在最适条件下,桑黄菌丝体的产量高达26.52 g.L-1。

不同培养条件对桑黄菌丝体生长的影响

目的为了探究不同培养条件对桑黄菌丝体生长的影响,在短期内培养出质优、含多糖量高的菌丝体。方法通过观察、对比接种于不同的氮源、碳源培养基中桑黄菌丝体的生长曲线、生长形态、生物量、生理生化等指标,筛选出最适的桑黄菌丝体生长培养基。结果桑黄生长的最佳液体、固体培养基均为黄豆+玉米的综合培养基:黄豆50 g/L,玉米粒50 g/L,葡萄糖30 g/L,KH_2PO_4 3 g/L,MgSO_4 0.75g/L,维生素B_1 1 mg/L。结论最佳单因子结合对桑黄的生物量、多糖积累有协同效应,组合后的发酵体系中生物量达到32 g/L,多糖量达到5.661 mg/ml。

液态发酵桑黄菌丝体抗A型流感(H1N1)病毒之效用评估

本研究旨在利用细胞试验评估液态发酵桑黄(Sanghuangporus sanghuang)菌丝体萃取物之抗A型流感病毒(H1N1)的能力,并进而分析活性所在之分层。实验使用MTS法评估桑黄菌丝体萃取物分别在预防、共培养以及治疗三种试验中减轻病毒对于宿主细胞的毒杀性的效果。结果显示酒萃物优于水萃物,再将酒萃物进行层析分离,共获得四种分层,分别为水层(PlH2O)、1-丁醇层(PlBtOH)、二氯甲烷层(PlDCM)以及己烷层(PlHex)。其中,以PlBtOH、PlDCM两组在预防试验、共培养试验以及治疗试验中,皆可见显著提升细胞存活率之效果(p 【0.05)。对比四分层的UPLC图谱后发现,PlBtOH及PlDCM内皆含有较高的hispidin,PlBtOH另含有hypholomine B (HB),抗病毒试验中则以PlBtOH最强,PlDCM次之,因此推估液态发酵桑黄菌丝体之抗H1N1流感病毒功效可能来自于hispidin以及HB。

桑黄菌丝体多糖的分离纯化及其结构表征

目的分离纯化得到桑黄菌丝体多糖(P1B)并测定其相对分子质量与单糖组成成分。方法采用离子交换法和凝胶层析分离纯化得到桑黄菌丝体多糖,并通过紫外全扫描、HPLC、红外光谱、GC-MS等方法对P1B进行结构测定。结果P1B为单一组分,其分子量为27365;红外光谱图分析可知P1B为不含酸性残基的单糖组成的聚合糖,进一步由GC-MS鉴定表明,P1B是由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖三种已知单糖和甲基-α-D-吡喃甘露糖苷一种推测成分组成的杂多糖;GC-MS分析其甲基化衍生物对应有四种连接方式。结论对桑黄菌丝体多糖进行分离和结构鉴定,可为进一步研究桑黄菌丝体多糖的构效关系奠定理论基础。

桑黄菌丝精酿啤酒的发酵工艺

以桑黄菌丝液、大麦芽、酒花等为原料,选用上面发酵的WB06型酵母进行发酵,开发桑黄精酿啤酒。通过单因素试验及正交试验并结合模糊数学法对制得的桑黄精酿啤酒进行感官综合评价。结果表明,优化后的发酵工艺为:桑黄菌丝液添加量11%,原麦汁浓度控制在13°P,酒花添加量0.20%。此工艺制得精酿啤酒的感官综合得分为87.3分。此方法制得的精酿啤酒在保留了桑黄功效成分,其酒体清亮淡褐色,泡沫细腻,挂杯持久,口感协调,酒体饱满,具有较好的市场开发前景。

响应面法优化桑黄菌丝体多糖的热水提取工艺

目的:采用超声波辅助热水浸提法提取桑黄菌丝体多糖,考察超声时间、超声功率及液固比对多糖提取量的影响。方法:在单因素试验的基础上,利用响应曲面(RSM)分析法对工艺参数进行优化研究。结果:超声时间46 min、超声功率492.4 W及液固比20.8 mL/g是较适宜工艺条件,多糖提取量为0.71 g/100 g。结论:响应面分析方法优化桑黄菌丝体多糖提取工艺是可行的。

桑黄发酵培养不同时期菌丝体胞内单糖组成比较

为进一步研究桑黄菌丝体胞内单糖组成,以发酵时间为依据将桑黄菌丝分为1/2发酵期Y1 (7 d)和完全发酵期Y2 (14 d)两个时期。利用HPLC-ELSD (高效液相色谱仪-蒸发光检测器)对Y1期和Y2期的菌丝单糖组成进行了深入研究,发现桑黄(ST)菌丝体2个时期都含有鼠李糖、木糖、果糖以及葡萄糖,并且每个时期葡萄糖含量占比较大。将Y1期和Y2期进行对比,二者间葡萄糖含量差异最大,其次为果糖含量,Y1期总糖含量为22.501 2 mg·g^(-1),Y2期总糖含量为26.817 8 mg·g^(-1),Y2期多糖含量显著高于Y1期,此结果将为今后研究桑黄多糖代谢途径以及大量产生提供参考。

药用植物桑黄抑制高血糖症的研究

目的了解桑黄抑制高血糖的作用。方法以桑黄菌丝体多糖为实验材料,设计浓度梯度(100、200、400 mg/(kg.d)处理链脲佐霉素所导致的糖尿病小鼠7 d,结果表明:桑黄菌丝体多糖能降低链脲佐霉素所导致的糖尿病小鼠的血糖浓度。结果桑黄菌丝体多糖高、中、低剂量组对糖尿病小鼠的降糖率分别是0.93%0、.90%和1.99%。结论数据显示桑黄菌丝体多糖高剂量组降糖效果要优于中、低剂量组。

鲍姆纤孔菌(桑黄)不同方式发酵的菌丝体生物活性比较

利用液体发酵、木屑固体发酵和米饭固体发酵3种方式培养鲍姆纤孔菌(桑黄)菌丝体,对菌丝体醇提物的体外抗氧化、抗肿瘤和抗衰老生物活性进行了研究。结果表明,木屑固体发酵、液体发酵和米饭固体发酵的菌丝体醇提物清除H2O2自由基的IC50值分别为78.28±0.32、27.73±0.57和7.84±0.37;米饭培养的桑黄菌丝体醇提物在低浓度500μg/mL下对超氧阴离子自由基清除作用到达80%,在相同的浓度下对DPPH自由基清除率也明显高于其他两种方法,表现出较高的抗氧化活性。木屑以及米饭培养方法得到的菌丝体对PC12神经细胞损伤修复均有较好的效果,液体培养的桑黄菌丝体表现的修复作用较低;液体发酵培养的菌丝体醇提物浓度在100μg/mL时,对肿瘤细胞HepG2的抑制率达70%,高于其他两种培养方法的抑制作用。