真皮组织微观化重建的探索性研究

目的从微观角度探讨真皮基质三维结构对Fb生物学行为的影响。方法借鉴平面几何、三角函数分析真皮组织三维结构，按照真皮组织由黏附成分和非黏附成分组成的原理，通过计算机辅助设计不同参数具有细胞黏着作用的点状结构阵列；运用微图案印刷和分子自组装法，建立4种（8μm×3μm、间距6μm，16μm×3μm、间距6μm，16μ×5μm、间距8μm，20μm×3μ间距2μm）具有细胞黏附点的桥墩样结构阵列细胞培养基质（MPGCC）培养人Fh，以无MPGCC培养的Fb为对照。利用免疫组织化学、荧光免疫组织化学、噻唑蓝法、羟脯氨酸含量测定法，检测培养Fh中骨架蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）表达、细胞活力和细胞分泌情况。结果数学推导结果提示，真皮组织三维结构可用MPGCC进行模拟。用上述4种规格MPGCC培养的Fb其α—SMA表达百分率依次为（49±3）％、（61±3）％、（47±4）％、（51±3）％，与对照组（12±3）％比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；Fb活力依次为0．12±0．03、0．13±0．04、0．14±0．03、0．19±0．03，与对照组0．35±0．04比较显著下降（P〈0．05）；羟脯氨酸含量依次为（0．95±0．04）、（0．87±0．03）、（0．81±0．03）、（0．77±0．03）μg／mg，与对照组（0．53±0．03）μg／mg比较显著上升（P〈0．05）。通过调整桥墩角度和桥墩间阵列参数，4组阵列相互对比，α—SMA表达、细胞活力和羟脯氨酸含量差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论MPGCC可能是真皮模板的基本功能单位或称为真皮模板单元，不同的真皮组织三维环境可产生不同的模板效应和创面愈合结局。