重组Dsg3EC_(1-2)及其嵌合毒素蛋白的原核表达及纯化

目的:在大肠杆菌中高效表达并纯化重组天疱疮抗原桥粒芯糖蛋白3(Dsg3)的胞外结构域EC1-2片段及其与假单胞菌外毒素PE40的嵌合毒素Dsg3EC1-2PE40。方法:在大肠杆菌中对目的蛋白进行诱导表达,并用金属鏊合亲和层析法进行分离纯化,经WesternBlot试验鉴定。结果:所得重组蛋白可以和寻常型天疱疮抗体IgG发生特异性结合,而与正常人IgG不发生反应,其纯化后纯度分别达85%及80%。结论:Dsg3EC1-2片段及其嵌合毒素Dsg3EC1-2PE40在原核细胞中得到成功表达,为天疱疮的治疗研究奠定了基础。

噬菌体展示技术构建寻常型天疱疮患者桥粒芯糖蛋白3抗体文库

目的用噬菌体展示技术构建寻常型天疱疮患者桥粒芯糖蛋白 3抗体文库。方法收集寻常型天疱疮患者外周血，分离淋巴细胞抽提 RNA，采用 RT-PCR反应以人的抗体特异性 HuVHBACK、 HuJHFOR和 HuVkBACK、 HuJkFOR引物扩增抗体重链可变区（ VH）和轻链可变区（ VL）基因片段，并将其与接头拼接成 ScFv片段克隆于大肠杆菌。结果抗体基因 ScFv片段与噬菌体基因Ⅲ的产物以融合蛋白的形式在噬菌体表面表达，构建了天疱疮患者的重组噬菌体抗体库， ELISA检测证明 ScFv基因产物具有抗体活性。结论天疱疮噬菌体抗体库的构建为天疱疮发病机理、诊断和治疗研究打下了基础。

天疱疮相关自身抗体的检测及其临床意义

目的评价抗细胞间抗体、抗桥粒芯糖蛋白1(Dsg1)抗体和抗桥粒芯糖蛋白3(Dsg3)抗体联合检测对于天疱疮诊断的临床意义,以及各项检测指标之间的相关性。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测30例天疱疮患者、14例类天疱疮患者血清中的抗Dsg1抗体和抗Dsg3抗体,采用间接免疫荧光法检测抗细胞间抗体。结果抗细胞间抗体、抗Dsg1抗体和抗Dsg3抗体在天疱疮患者中的阳性率分别为53.33%(16/30)、46.67%(14/30)、53.33%(16/30)。3项检测指标在天疱疮患者和类天疱疮患者中的阳性率差异有统计学意义。抗细胞间抗体与抗Dsg1抗体在天疱疮患者中的阳性率差异无统计学意义,2种检测结果显著相关。抗细胞间抗体与抗Dsg3抗体在天疱疮患者中的阳性率差异无统计学意义,2种检测结果显著相关。他们之间有交叉重叠现象。结论3种检测指标的联合应用可以提高临床上诊断天疱疮的敏感性。

沙利度胺治疗天疱疮口腔黏膜损害的疗效及安全性

目的:探讨沙利度胺治疗天疱疮口腔黏膜损害的有效性及安全性。方法:回顾性分析北京大学第一医院皮肤科2014年12月—2018年6月使用沙利度胺治疗仅有口腔黏膜症状的寻常型天疱疮及副肿瘤性天疱疮患者共19例。结果:沙利度胺治疗寻常型天疱疮及副肿瘤性天疱疮患者口腔黏膜症状的有效率分别为84.6%及66.6%。寻常型天疱疮患者在沙利度胺治疗前后的自身免疫性疱病严重程度评分(autoimmune bullous skin disorder intensity score,ABSIS)中口腔黏膜损害严重程度评分中位数分别为2分及0分(P<0.05),副肿瘤性天疱疮患者在沙利度胺治疗前后的ABSIS中口腔黏膜损害严重程度评分中位数分别为3分及1.5分(P>0.05);沙利度胺治疗前后5例天疱疮患者桥粒核心糖蛋白3抗体滴度的中位数分别为100.64 kU/L及81.88kU/L。19例患者中有7例(36.8%)出现不同程度的不良反应,其中面部或四肢麻木的外周神经炎发生率最高(21.1%),停药后症状完全消失。结论:沙利度胺治疗寻常型天疱疮患者的黏膜损害有效,是目前有效性及安全性较高的天疱疮口腔黏膜损害辅助治疗药物。

天疱疮患者临床特征和Dsg1及Dsg3抗体结果分析

目的研究天疱疮患者的临床特征,分析桥粒芯糖蛋白1抗体(desmoglein 1,Dsg1)和桥粒芯糖蛋白3抗体(desmoglein 3,Dsg3)ELISA检测结果与天疱疮分型及严重程度之间的关联。方法选取2021年1—12月安徽医科大学第一附属医院收治的50例天疱疮患者,根据临床表现、实验室指标对天疱疮进行分型和分级,对诱发因素、伴发疾病、皮肤感染情况、Dsg1及Dsg3抗体指数等进行回顾性分析。结果50例天疱疮患者中寻常型天疱疮39例、红斑型天疱疮8例、落叶型天疱疮2例和副肿瘤性天疱疮1例;轻度28例,中度11例,重度11例;常见诱发因素和糖皮质激素不规范使用有关,占比20%(10/50);最常见皮肤感染菌为金黄色葡萄球菌,检出率为18%(9/50)。不同类型天疱疮患者Dsg3抗体指数差异有统计学意义(Z=-3.481,P<0.001);不同严重程度天疱疮患者Dsg1及Dsg3抗体差异有统计学意义(P值分别为0.002、0.024)。结论天疱疮患者治疗中要注重糖皮质激素的正确使用,皮肤感染在天疱疮患者中较为常见,Dsg1及Dsg3抗体检测在天疱疮患者中具有较高的阳性率,Dsg1及Dsg3抗体指数可作为天疱疮病情评估的指标。

巴瑞替尼联合糖皮质激素治疗天疱疮的疗效及安全性评价

目的探讨巴瑞替尼联合糖皮质激素治疗天疱疮的疗效及安全性。方法回顾性分析海南省人民医院皮肤科2021年1月—2022年6月使用巴瑞替尼联合糖皮质激素治疗天疱疮患者共23例,比较治疗前后皮肤ABSIS评分、口腔黏膜ABSIS评分、抗桥粒芯糖蛋白1(抗Dsg1)和抗桥粒芯糖蛋白3(抗Dsg3)抗体值变化。结果经过系统治疗后在23例患者中,痊愈11例(47.83%),显效9例(39.13%),好转2例(8.69%),无效1例(4.35%)。巴瑞替尼治疗后皮肤ABSIS评分平均(21.04±5.18)分,明显低于治疗前(57.20±12.78)分(P<0.01)。治疗前口腔ABSIS评分(受累部位)的中位数4分,明显高于治疗后口腔ABSIS评分(受累部位)的中位数2分(P<0.01)。治疗前口腔ABSIS评分(症状严重程度)的中位数15分,明显高于治疗后口腔ABSIS评分(症状严重程度)的中位数8.5分(P<0.01)。治疗后抗Dsg1抗体值平均为(70.76±12.57)U/mL,明显低于治疗前的(132.50±11.46)U/mL(P<0.01)。治疗前抗Dsg3抗体值的中位数124.120 U/mL明显高于治疗后抗Dsg3抗体值的中位数63.420 U/mL(P<0.01)。结论巴瑞替尼是一个有效且安全的治疗天疱疮的药物,对于使用免疫抑制剂及生物制剂有禁忌的患者可考虑联合本药治疗。