梁氏异蝎毒素促进KYSE-510细胞凋亡的作用机制研究

为了研究蝎毒抑制肿瘤细胞生长的机理,提取梁氏异蝎Heterometrus liangi蝎毒干预人食管癌细胞(KYSE-510细胞),运用流式细胞术、电镜技术、逆转录PCR和Western blot方法分别检测蝎毒对KYSE-510细胞凋亡的影响以及对caspase-3基因表达。结果表明:经蝎毒处理的实验组KYSE-510活细胞数量显著减少,其原因是蝎毒引起细胞大量凋亡和坏死。经不同浓度(50μg·m L^(-1),100μg·m L^(-1),200μg·m L^(-1))蝎毒处理的KYSE-510细胞与对照组的caspase-3基因在mRNA水平表达相近,而在蛋白表达水平上,实验组细胞与对照组细胞相比,蝎毒促进了caspase-3的剪切活化,且以200μg·m L^(-1)蝎毒处理的KYSE-510细胞caspase-3的剪切活化最强,由此证明蝎毒导致KYSE-510细胞凋亡的机理之一可能是其促进了caspase-3的剪切活化。

粱氏异蝎毒素抑制HeLa细胞增殖的形态学研究

采用倒置相差显微镜观察法、HE染色法、扫描电镜法和透射电镜法对梁氏异蝎毒素抑制HeLa细胞增殖的形态学影响进行了较系统的研究。用不同浓度的蝎毒处理HeLa细胞(0,20,40,60μg/m L),发现随着蝎毒浓度的升高HeLa细胞的死亡率增加,经毒素作用后,试验组与对照组相比,细胞突起收缩、形态变圆、体积缩小,染色质浓缩,导致细胞大量凋亡。结果表明:梁氏异蝎毒素对HeLa细胞的形态学具有很大的影响,能显著抑制HeLa细胞增殖。该研究对利用梁氏异蝎毒素开发新型抗癌药物提供了新的信息。

蝎毒对Hela细胞的体外药理学研究

以东亚钳蝎毒素和梁氏异蝎毒素来研究蝎毒对Hela细胞增殖的影响,MTT法试验结果:20,40,60μg/m L的2种蝎毒对Hela细胞均有抑制增殖的作用,具有浓度和时间的依赖关系,随着浓度升高和时间的延长,Hela细胞增殖的抑制作用增强。淋巴细胞转化试验结果:20,40,60μg/m L的2种蝎毒均能促进淋巴细胞转化,并且梁氏异蝎毒素的作用更强。乳酸脱氢酶(LDH)释放试验结果:2种毒素均能促使LDH的释放,随着蝎毒浓度的增加和时间的延长,Hela细胞溶液上清液中LDH释放量逐渐增加。由此证明,这2种蝎毒均可抑制Hela细胞增殖,有望成为一种抗肿瘤药物。