高眼压作用下大鼠小梁网组织弹性模量的变化

目的探究高眼压持续作用不同时间下大鼠小梁网组织弹性模量的变化情况,为深入研究小梁网组织的力学特性与房水外流阻力之间的关系提供基础。方法选取18只SD雄性大鼠,体重控制在260~300 g。右眼通过烙闭上巩膜静脉建立高眼压实验组模型,左眼不做任何处理作为对照组,并分别在2周、3周、4周取下眼球后制作小梁网组织横截面冰冻切片,利用原子力显微镜对小梁网区域进行纳米压痕实验,使用Sneddon接触模型对压痕曲线进行拟合,得到高眼压作用持续不同时间下小梁网弹性模量的变化情况。结果实验组与对照组眼压差异具有显著性,说明成功建立了高眼压动物模型。2周、3周、4周实验组的小梁网弹性模量分别为(20.55±5.68)kPa、(23.98±4.42)kPa、(28.56±5.94)kPa,明显大于各自的对照组,且不同时间点3个实验组的小梁网组织弹性模量也存在统计学上的差异。结论随着高眼压的持续作用,小梁网组织弹性模量明显增大,且与作用时间呈正相关。这一发现一定程度上考虑了高眼压对小梁网力学性质的影响,为深入了解高眼压对眼球生理机制的影响提供了重要线索,所得结果对房水外流阻力增大机制的研究具有参考意义。

糖皮质激素性高眼压小梁网病理改变及相关分子机制进展

糖皮质激素性高眼压(GIOH)是一种由糖皮质激素引起的高眼压。长期处于GIOH状态,可能会导致视神经损害和视野缺损,最终发展成糖皮质激素性青光眼(GIG),可能致盲。糖皮质激素主要通过介导糖皮质激素受体(GR)发挥生物学作用,同时还涉及到转化生长因子(TGF)-β、Wnt、Rho等因素在GIOH的形成中的作用。深入探讨GIOH小梁网的病理改变及相关分子机制对于理解GIOH的发病机制和治疗提供了重要的理论依据。因此文章就GIOH小梁网的病理改变及相关分子机制进行综述,旨在为进一步研究GIOH的病理机制及治疗提供理论依据。

小梁网泵衰竭在青光眼发病中的作用机制的研究进展

青光眼是一组以视盘萎缩凹陷、视野缺损以及视力下降为共同特征的视神经退行性疾病,也是世界首位不可逆性致盲眼病,导致患者生活质量降低、引起极大卫生经济负担。但其发病机制尚不明确,促进房水排出从而降低眼内压仍是目前减缓疾病进展的唯一治疗手段。房水排出的主要途径是经由小梁网进入Schlemm's管最后汇入巩膜外静脉,因此小梁网在调节房水排出以及平衡眼内压方面发挥重要作用。近年来,体内以及体外房水排出测量技术和小梁网成像技术不断突破,众多研究表明小梁网存在压力依赖的节律性搏动,在房水的脉冲式排出中起到关键作用,但在青光眼中这种搏动随疾病的进展减弱甚至消失。文章以小梁网的泵理论为核心,总结青光眼中房水排出的最新研究进展,并从恢复小梁网功能的角度出发探索可能有效的治疗策略,为青光眼的临床诊治提供新的思路。

小梁网生物力学性能在青光眼发病机制中的研究进展

小梁网作为房水外流通路的首个阻力部位,对眼压调控有重要影响。小梁网生物力学性能改变可能会影响滤过系统房水的排出,对原发性开角型青光眼(POAG)发病有重要意义。眼压与小梁网生物力学性能改变可能有相关性,但目前研究表明,小梁网生物力学性能主要由遗传与基因突变、年龄、细胞外基质和细胞骨架成分、溶血磷脂酸、地塞米松、Rho相关蛋白激酶抑制剂等因素影响。此外,其他眼内疾病也可能会对小梁网生物力学性能产生影响。在机械牵拉下,小梁网产生的应变可能暗示了高眼压状态下房水外流的分子机制、流出通路的调节机制及POAG的发病机制。小梁网生物力学性能研究将为青光眼早期诊断、治疗提供更有力的理论依据和实验基础。本文就小梁网生物力学测量方法、影响因素以及传感通路对小梁网细胞生物力学性能影响的研究现状进行综述,以期对POAG的病因、发病机制及治疗做进一步阐述。

青光眼患者Klotho与凋亡相关因子异常表达及其在小梁网氧化应激损伤预测中的作用

目的研究青光眼患者Klotho蛋白、凋亡相关因子表达与小梁网组织氧化应激损伤的关系。方法选取我院于2021年10月至2023年10月收治的86例(86眼)青光眼患者为研究组,均于术中获取小梁网组织样本,另选取非眼部疾病患者小梁网供体组织样本(45例)为对照组。采用苏木精-伊红(HE)染色观察小梁网组织病理学特点,检测小梁网组织中Klotho蛋白、凋亡相关微粒蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、超氧化物歧化酶(SOD)以及过氧化物酶(POD)表达水平。比较2组患者之间以及不同视野平均缺损程度青光眼患者Klotho蛋白、ASC蛋白、Caspase-1蛋白、SOD、POD表达水平,采用Pearson法分析青光眼患者Klotho蛋白、凋亡相关蛋白表达水平与小梁网氧化应激损伤的相关性。结果HE染色结果显示,研究组小梁网结构紊乱、板层交错,小梁束增厚,小梁细胞核固缩;对照组小梁网组织薄板以及小梁细胞束整齐排列,小梁细胞形态正常。研究组患者小梁网组织Klotho蛋白表达水平低于对照组,而ASC、Caspase-1蛋白表达水平均高于对照组(均为P<0.05)。不同严重程度患者Klotho蛋白、ASC蛋白、Caspase-1蛋白以及SOD、POD表达水平差异均有统计学意义(均为P<0.05)。随着疾病严重程度的增加,Klotho蛋白、SOD表达水平均呈明显降低趋势,而ASC蛋白、Caspase-1蛋白、POD表达水平呈明显增加趋势(均为P<0.05)。Pearson相关分析显示,小梁网组织Klotho蛋白与POD表达水平呈负相关,与SOD表达水平呈正相关,ASC、Caspase-1蛋白与POD表达水平均呈正相关,与SOD表达水平均呈负相关(均为P<0.05)。结论青光眼患者小梁网组织中Klotho低表达,而ASC、Caspase-1高表达,且表达水平与视野平均缺损程度呈相关性,可反映小梁网组织应激损伤程度。

小梁网-Schlemm管通道建模及流固耦合分析

目的原发性开角型青光眼是常见的青光眼类型(约占65%),其发病机制尚未阐明,主要危险因素为病理性眼压升高。目前认为临床上大部分高眼压的形成主要由房水外流阻力增加所致,特别是小梁网-Schlemm管通道流出阻力的增加。本研究通过建立小梁网-Schlemm管通道三维模型及有限元分析方法,探究通道压差、房水黏度、入口速度等因素对小梁网-Schlemm管通道结构及房水动力学参数的影响,为房水流出障碍形成机制研究提供有价值的基础认识。方法基于三维重建出的大鼠小梁网-Schlemm管通道三维模型,使用ANSYS软件对模型进行双向流固耦合分析。为模拟房水外流方向上小梁网最内侧与巩膜静脉压之间的不同压差环境,本研究共分析了12组通道压差(33~931 Pa),讨论小梁网-Schlemm管通道壁面剪应力、组织变形等参数与压差之间的定量关联关系。结果小梁网组织及Schlemm管周围组织变形程度随通道压差的增加逐渐增大,最大值出现在Schlemm管外壁(靠近集液管一侧)组织上。当通道压差大于266 Pa时,小梁网-Schlemm管通道壁面剪应力随通道压差增大变化明显,最大值出现在小梁网通道向Schlemm管汇集处的较细分支上。结论通道压差增大导致的小梁网-Schlemm管通道结构、房水动力学参数的变化是导致房水外流阻力增大的重要影响因素。

糖皮质激素诱导小梁网组织失能的研究进展

糖皮质激素(glucocorticoids,GCs)作用于小梁网组织,诱导发生组织形态学的改变与功能失衡。研究证实糖皮质激素性青光眼与原发性开角型青光眼(primary open angle glaucoma,POAG)具有相似的小梁网形态与功能变化,然而POAG的发病机制仍不清楚。阐明GCs如何诱导小梁网形态学的改变,如何影响房水流出阻力,有利于探索POAG的发病机制。文章主要就GCs对小梁网的影响作一综述。

原发性开角型青光眼小梁网组织早衰的初步研究

【目的】观察正常小梁网组织和POAG小梁网组织在超微结构和衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)表达方面是否存在差异。【方法】正常人小梁网组织取自广东省眼库的正常人眼球(10例),平均年龄(36.90±10.10)岁;POAG小梁网组织来自中山眼科中心青光眼科行小梁切除术者(10例),平均年龄(39.80±11.64)岁。用透射电镜观察两组小梁网组织超微结构;用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色法对两组小梁网组织进行染色,并分析两者之间衰老染色的差异。【结果】透射电镜发现正常人小梁网组织细胞膜完整,核染色均匀居中,胞浆中可见形态正常的中心体,周围散落分布着的线粒体、溶酶体等细胞器;基底膜完整连续;弹性纤维周围绕有薄鞘,胶原纤维呈束状排列、整齐;Schlemm管管腔通畅。而POAG患者的小梁网组织中可见细胞脱落溶解,细胞膜不完整,细胞核固缩或肿胀,线粒体水肿,线粒体嵴扩张;Schlemm管管腔变狭窄;弹性纤维增多且排列紊乱;基底膜增厚。SA-β-Gal染色发现POAG小梁网中的衰老细胞阳性率较正常人小梁网组织高(P<0.001)。【结论】POAG小梁网超微结构破坏明显,SA-β-Gal染色增强,在POAG小梁网中可能存在早衰。

人眼小梁网细胞的体外培养

目的 探讨体外培养人眼小梁网细胞的方法并观测其生物学特性。 方法 采用组织块培养方法进行体外细胞培养 ,二甲基噻唑二苯基四唑溴盐比色法、倒置显微镜、透射电镜 ,免疫细胞化学等方法观察体外培养细胞的生物学特性并进行鉴定。 结果 组织块培养 7～ 15 d后可见细胞从其边缘向外生长。倒置显微镜下成梭形、圆形、椭圆形、并有多个突起 ;电镜可见小梁网细胞表面有较多微绒毛 ,细胞间缝隙连接 ,胞质内见很多次级溶酶体。免疫细胞化学检测纤维黏连蛋白、层黏连蛋白和神经元特异性烯醇化酶染色阳性。这些特征可与角膜内皮细胞和巩膜成纤维细胞相鉴别。 结论 组织培养方法能够成功体外培养人眼小梁网细胞。

糖皮质激素对小梁网的作用研究进展

应用糖皮质激素可引起眼压升高 ,它与原发性开角型青光眼关系密切。糖皮质激素对小梁网的作用可作为一个良好模型用于研究青光眼的发病机制。糖皮质激素对小梁网的作用是多方面的 ,它包括细胞外基质、细胞膜、细胞骨架及细胞核的多重变化。

NrF2/Keap1/ARE信号通路在老年性青光眼患者小梁网组织功能损伤中的作用

目的探讨核因子E2相关因子(NrF)2/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白(Keap)1/抗氧化反应元件(ARE)信号通路在老年性青光眼患者小梁网组织功能损伤中的作用。方法选取2018年5月至2019年10月确诊为老年性青光眼患者42例(42眼)为老年性青光眼组,以因故死亡成人的供体眼球标本35例为对照组。老年性青光眼组均行小梁切除术,留取小梁网组织标本,对照组切取小梁组织。免疫组化检测标本组织中NrF2、Keap1、ARE阳性表达情况;实时聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测NrF2、Keap1、ARE mRNA和蛋白表达水平;比色法检测过氧化物酶和超氧化物歧化酶水平。结果老年性青光眼组NrF2、ARE阳性表达率明显低于对照组,Keap1阳性率明显高于对照组(P<0.01)。老年性青光眼组小梁网组织中NrF2、ARE mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组,Keap1 mRNA和蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05,P<0.01)。老年性青光眼组小梁网组织中过氧化物酶水平明显高于对照组,超氧化物歧化酶水平明显低于对照组(P<0.01)。结论老年性青光眼患者小梁网组织中NrF2、ARE低表达,Keap1高表达,与氧化应激状态有关;激活NrF2/Keap1/ARE信号通路有利于控制患者的病情发展。

煤及半煤岩巷围岩分类与锚梁网支护专家系统

利用统计分析、模糊推理等多种手段,提出一种煤巷围岩稳定性综合分类法,研究平顶山矿区煤巷稳定性变化规律,得到了评价围岩稳定性的统计判据,可根据巷道条件及实测信息评价巷道稳定程度,并绘制出多指标围岩分类图,直观表达了样本及样本分布规律,既提高了分类的可靠性,又简化了分类方法。开发出煤及半1煤岩巷锚梁网支护专家系统,该专家系统通用于煤巷锚梁网支护系列选型,并在平顶山矿区得到成功应用。

经房角镜光凝小梁网法建立慢性高眼压大鼠模型及其与经角膜缘光凝法的比较

背景慢性高眼压动物模型的建立是青光眼发病机制研究的基础，以往激光光凝建立慢性高眼压动物模型的方法存在模型眼压波动大，需要重复光凝和并发症多的问题，造模方法的改良对于顺利开展相关的实验研究具有重要意义。目的用经房角镜光凝小梁网法建立大鼠慢性高眼模型，并与以往的经角膜缘光凝法进行比较。方法选取8～12周龄清洁级Fischer344大鼠36只，将动物分为正常对照组、经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组，每组12只，经角膜缘光凝组采用532nmYAG激光经角膜缘光凝大鼠右眼小梁网建立慢性高眼压模型，激光能量为440—500mW，激射光斑40～60个；经房角镜光凝组激光能量为800～850mw，激射光斑100～120个。光凝后用Tonolab眼压计测量并观察各组大鼠眼压变化；于光凝后第3周每组处死5只大鼠，分离视网膜，采用免疫荧光技术检测并比较各组大鼠视网膜中Tuj一1阳性的视网膜神经节细胞（RGCs）数目。实验动物的使用及喂养遵循ARVO声明。结果造模后3周各组大鼠一般情况可，眼表无明显损伤。经角膜缘光凝组和房角镜光凝组慢性高眼压模型的成模率分别为75％和100％。正常对照组、经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组大鼠模型眼造模后3周的平均眼压分别为（11．0±1．3）、（23．4±12．6）和（25．3±4。9）mmHg（1mmHg=0．133kPa），峰服压分别为（12．3±1．0）、（50．5±7．3）和（44．3±12．3）mmHg，组问总体比较差异均有统计学意义（F=25．496、80．762，均P〈0．001），其中经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组大鼠模型眼平均眼压均明显高于正常对照组，差异均有统计学意义（均P〈0．001），而2个组间平均眼压和峰眼压差异均无统计学意义（P=1．000、0．195）。正常对照组、经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组大鼠视网膜中Tuj-1阳性RGCs数目分别为（2048．2±148．5）、（645．2±177．1）及（1223．7±148．6）／mm2，总体比较差异有统计学意义（F=98．767，P〈0．001），其中经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组大鼠视网膜中Tuj-1阳性RGCs数目均明显少于正常对照组，且经角膜缘光凝组大鼠视网膜中Tuj-1阳性RGCs数目明显少于经房角镜光凝组，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论经房角镜光凝小梁网能够诱导大鼠慢性高眼压并导致RGCs损害，但眼压升高模式及RGCs损害程度与经角膜缘光凝法有所不同，经房角镜光凝法建立慢性高眼压模型成模率更高。

miR-181a靶向沉默信息调节因子相关酶1在过氧化氢诱导的人小梁网细胞氧化应激中的调节作用

目的探讨miR-181a对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人小梁网细胞(HTMCs)氧化应激的调节作用及其机制。方法HTMCs随机分为空白组(0μmol·L^(-1)H_(2)O_(2))、200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)组、400μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)组、600μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)组,分别使用相应浓度H_(2)O_(2)处理HTMCs,24 h后MTT法检测各组细胞存活率,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞miR-181a mRNA表达,Western blot检测各组细胞中沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)蛋白表达。根据转染物的不同分为miR-181a inhibitor组、miR-181a NC组、miR-181a mimics组、miR-181a inhibitor+si-SIRT1组和miR-181a inhibitor+si-NC组,使用二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测各组细胞内活性氧(ROS)含量,使用超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)ELISA试剂盒检测各组细胞SOD和MDA活性,使用Annexin V FITC/PI联合流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot检测各组细胞中SIRT1蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验对靶点进行验证。结果与空白组比较,200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)组、400μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)组、600μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)组细胞存活率均降低(均为P<0.05)。细胞miR-181a mRNA的表达随着H_(2)O_(2)浓度的增加而增加,SIRT1蛋白的表达随着H_(2)O_(2)浓度的增加而降低(均为P<0.05)。与miR-181a NC组比较,miR-181a mimics组细胞凋亡率、MDA活性和ROS含量均升高,细胞SOD活性、SIRT1蛋白表达均降低,miR-181a inhibitor组细胞凋亡率、MDA活性和ROS含量均降低,细胞SOD活性、SIRT1蛋白表达均升高(均为P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实,miR-181a靶向抑制SIRT1蛋白的表达。与miR-181a inhibitor+si-NC组比较,miR-181a inhibitor+si-SIRT1组细胞凋亡率、MDA活性和ROS含量均升高,SOD活性降低(均为P<0.05)。结论miR-181a可能通过靶向SIRT1调节H_(2)O_(2)诱导的HTMCs氧化应激作用。

综放工作面开切巷锚梁网支护技术研究

义马耿村煤矿综放工作面开采易自燃煤层,采用开切巷沿煤层顶板布置.为此首先对开切巷锚梁网支护的设计和施工有关问题进行了研究,然后对巷道顶板围岩进行了深基点位移观测,同时利用超声波技术对巷道两帮进行了松动圈测定,在此基础上讨论了大断面巷道锚杆与围岩之间相互作用关系,最后说明了锚梁网支护效果.本研究成果对大断面巷道锚梁网支护具有一定的参考价值.

大采高切眼全宽锚梁网索支护实践

介绍了皖北煤电集团任楼煤矿大采高工作面切眼的支护体系,经过研究及实践,在Ⅱ7210大采高(5.0m)工作面切眼成功实施了锚梁网索支护施工。实践证明,锚梁网索支护技术为大跨度切眼巷道支护提供一条新的技术途径,是一种适应性很强的大采高切眼支护体系。

可溶性CD44分子对人眼小梁网细胞凋亡调节蛋白bcl-2相关死亡因子bad表达的影响

背景研究表明可溶性CD44分子（sCD44）在原发性开角型青光眼（POAG）患者眼中的质量浓度高于正常人，POAG患者房水中sCD44水平与小梁网细胞凋亡相关蛋白的表达是否有关及其对POAG的共同作用机制至今尚不明确。目的探讨不同质量浓度的sCD44对POAG患者小梁网细胞凋亡调节蛋白bcl-2相关死亡因子bad表达的影响。方法收集POAG患者行小梁切除术中切除的小梁网组织，采用组织块培养法原代培养小梁网细胞，并用免疫细胞化学法对培养细胞进行鉴定，将第3代的小梁网细胞按随机数字表法随机分为6个组，分别在无血清培养基中加入含终质量浓度为0（对照组）、1、5、10、25、50μg／L的sCD44，培养细胞48h。采用细胞计数试剂8（CCK-8）法和ELISA法检测小梁网细胞中凋亡调节蛋白bcl-2相关死亡因子bad蛋白的表达。结果培养的细胞经层黏连蛋白（LM）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）单克隆抗体、纤维连接蛋白（FN）免疫组织化学染色呈阳性反应。CCK-8法检测0、1、5、10、25、50μg／LsCD44作用48h后小梁网细胞吸光度（A450）值分别为：0．2460±0．0019、0．1874±0．0015、0．1570±0．0016、0．1302±0．0019、0．1084±0．0018、0．0940±O．0020，差异有统计学意义（F=14．922，P=0．000），各实验组A450值均低于对照组，差异均有统计学意义（P=0．013、0．008、0．011、0．005、0．004）。ELISA法检测表明，0、1、5、10、25、50p^g／LsCD44作用48h后小梁网细胞中bad蛋白质量浓度分别为（114．8461±2．9560）、（137．8270±2．4259）、（161．4194±3．7381）、（170．9453±3．2006）、（221．2252±4．3738）、（324．6167±4．4220）ng／L，差异有统计学意义（F=16．610，P=0．000），各实验组小梁网细胞中bad蛋白质量浓度均明显高于对照组，差异均有统计学意义（P=0．017、0．013、0．008、0．007、0．006）。结论sCD44在一定质量浓度范围内可促进POAG小梁网细胞的凋亡，并且能上调凋亡调节蛋白bel-2相关死亡因子bad蛋白的表达。

花生四氢酸氨基乙醇对体外培养的牛眼小梁网细胞基质金属蛋白酶-3和基质金属蛋白酶抑制剂-1表达的影响

目的观察花生四氢酸氨基乙醇(AEA)对体外培养的牛眼小梁网细胞基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响。方法对牛眼小梁网细胞进行原代及传代培养,并进行鉴定。对传3代的牛眼小梁网细胞分别施加AEA浓度为0.0、0.1、1.0、10.0μmol·L-1的无血清培养液,作用24 h后提取细胞上清液,并制备10.0μmol·L-1作用6、12、18、24 h的细胞上清液,用酶联免疫吸附测定法检测AEA作用后细胞上清液中MMP-3及TIMP-1水平的变化。结果随着AEA浓度的增加,MMP-3及TIMP-1水平均逐渐增加,并呈剂量依赖性(P<0.05)。10.0μmol·L-1AEA作用6、12、18、24 h后的MMP-3、TIMP-1水平均高于0.0μmol·L-1组(P<0.05),且MMP-3、TIMP-1水平随着作用时间的延长逐渐增加,各时间点之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论AEA可以促进MMP-3的分泌,早期AEA可以抑制TIMP-1的分泌,进一步打破MMP-3及TIMP-1的平衡,影响细胞外基质的降解,从而起到降低眼压的作用。

电压门控性氯通道3在高眼压模型大鼠小梁网中的表达

目的:检测电压门控性氯离子通道3(ClC-3)在大鼠小梁网中的表达情况,探讨其在青光眼发病机制中的可能作用。方法:30只健康雄性大鼠。左眼作为正常对照,右眼前房内注射玻璃酸钠,每周1次,连续10周,制备高眼压模型,每次全麻后玻璃酸钠注射前采用Tono-Pen XL眼压计测量双眼眼压并记录。实验分为正常对照组、玻璃酸钠注射3周组和10周组。分别取3组大鼠的小梁网组织,采用RT-PCR法检测ClC-3mRNA表达水平,免疫组织化学法检测ClC-3蛋白的表达。结果:玻璃酸钠注射后1、3和10周,大鼠右眼眼压均较注射前增高(P<0.01),注射后1周眼压值较注射前轻微增高,注射后3周眼压较注射前明显增高,但眼压值未达到高眼压成模标准,注射后10周眼压值较注射前明显增高,达到高眼压成模标准。RT-PCR法检测,与正常对照组比较,玻璃酸钠注射3周组大鼠小梁网组织中ClC-3mRNA表达水平明显增高(t=7.88,P<0.05);玻璃酸钠注射10周组大鼠小梁网组织中ClC-3mRNA表达水平明显降低(t=15.93,P<0.05)。免疫组织化学检测,3组大鼠小梁网组织中ClC-3蛋白表达均为阳性,玻璃酸钠注射3周组大鼠小梁网组织中ClC-3蛋白表达强度较正常对照组大鼠增强,玻璃酸钠注射10周组大鼠小梁网组织中ClC-3蛋白表达强度较正常对照组大鼠减弱。结论:大鼠小梁组织中存在ClC-3的表达,ClC-3可能与小梁网的病理调节有关联,进而参与青光眼的发病。

内皮素-1对体外培养人小梁网细胞纤维连接蛋白及Ⅰ型胶原表达的影响

目的观察内皮素-1(ET-1)对人小梁网细胞(TMCs)细胞外基质纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原(COLI)的影响。方法取死亡24h内尸眼小梁网组织,行TMCs原代和传代培养,并用FN、层黏连蛋白(LN)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和Ⅷ因子相关抗原(FⅧRAg)鉴定为人TMCs后,取传3代的人TMCs,给予不同浓度ET-1(10-9、10-8、10-7mol/L)孵育72h后,免疫荧光和Westernblot观察ET-1对TMCs中FN、COLI表达的影响;然后取传3代的人TMCs,分别给予10-7mol/LET-1、10-7mol/LET-1+10-7mol/LETA受体拮抗剂、10-7mol/LET-1+10-7mol/LETB受体拮抗剂后孵育72h,Westernblot观察ET受体拮抗剂对FN、COLI表达的影响。结果研究受到伦理委员会的批准,取材前征得供体家属的知情同意。培养的细胞形态多样,含少许色素颗粒,FN、LN、NSE染色均呈阳性反应,FⅧRAg呈阴性反应。人TMCs与10-9～10-7mol/LET-1共孵育后FN表达上调(F=18.41,P<0.05);与10-8mol/L、10-7mol/LET-1共孵育后COLI表达上调(F=39.81,P<0.05),并呈浓度依赖性,10-7mol/L时作用最明显;给予ETA受体拮抗剂后,与ET-1组相比,FN、COLI的表达均降低(qFN=7.213,P<0.05;qCOLI=6.187,P<0.05),但给予ETB受体拮抗剂后,FN、COLI的表达均无明显变化。结论 ET-1能够促进体外培养的人TMCs中FN、COLI的表达,其机制可能是通过激动ETA受体而非ETB受体发挥作用的。