老年人梅毒筛查阳性与荧光梅毒螺旋体抗体吸收法及蛋白质印迹法复测结果的对比分析

目的:比较老年人梅毒筛查阳性与确认指标之间的关系,分析各检测指标在老年梅毒诊断的临床价值。方法:用酶联免疫吸附试验及甲苯胺红试验作为梅毒筛查,对老年人阳性标本用梅毒螺旋体明胶凝集试验检测,两种方法均为阳性者用荧光梅毒螺旋体抗体吸收法(FTA-ABS)检测及蛋白质印迹法(WB)确认,并对实验结果进行统计分析。结果:对酶联免疫吸附试验筛查梅毒的76例老年人阳性标本,用梅毒螺旋体明胶凝集试验检测有72例阳性,阳性符合率94.7%;两种方法均为阳性的72例标本经FTA-ABS及WB检测确证阳性71例,阳性符合率98.6%;并且FTA-ABS检测与WB检测结果一致。结论:为了提高老年人梅毒的检出率及正确性,对梅毒筛查阳性标本,应用TPPA进行确证,有疑义者用FTA-ABS或WB进行进一步检测确证。

用蛋白印迹技术初步评价重组梅毒螺旋体抗原的反应性

目的 : 初步分析重组梅毒螺旋体抗原对梅毒螺旋体抗体的反应性。方法 : 用蛋白印迹技术检测与麦芽糖结合蛋白 (MBP)融合的 2种重组梅毒螺旋体蛋白 (rTP47和rTP17)与二期梅毒患者血清的反应性。结果 : 30份二期梅毒患者血清均与MBP rTP47和MBP rTP17反应 ,反应强度与RPR试验测定的血清滴度无绝对一致性 ,但MBP rTP17与二期梅毒患者血清的反应强于MBP rTP47。 30份正常人血清均不与MBP rTP47和MBP rTP17反应。结论 : MBP rTP47和MBP

应用梅毒螺旋体明胶凝集试验等检测诊断梅毒的效果比较

目的:比较梅毒诊断中应用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、快速血浆反应素环状卡片实验(RPR)、梅毒螺旋体抗体检测(TP-Ab)的价值。方法:选取2021年1月—2022年9月泗洪县第一人民医院检验科检验的104例疑似梅毒患者。以重组免疫印迹技术(recombinant immunoblot assay,RIBA)检验作为“金标准”,比较所有疑似患者检测TPPA、RPR、TP-Ab在梅毒诊断中的价值,通过受试者工作特征曲线(ROC)分析其诊断效能。结果:金标准诊断结果为阳性79例、阴性25例,TP-Ab检测阳性79例、阴性25例,RPR检测阳性78例、阴性26例,TPPA检测阳性80例、阴性24例;TPPA的特异度(96.00%)、准确率(98.08%)高于TP-Ab特异度(76.00%)、准确率(88.46%)、也高于RPR的特异度(72.00%)、准确率(85.58%),差异有统计学意义(P<0.05);TPPA检测的ROC曲线下面积最大,曲线下面积(AUC)=0.974,RPR与TP-Ab、RPR与TPPA、TP-Ab与TPPA的AUC值两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:在梅毒诊断中,应用TPPA、RPR、TP-Ab检测诊断,TPPA检测的诊断效能最高,可为梅毒早期诊断治疗提供依据,具有一定应用价值。

梅毒螺旋体Tp0319重组蛋白的表达、纯化及其在临床诊断中的初步应用

目的克隆、表达及纯化梅毒螺旋体(Tp)外膜蛋白Tp 0319,并建立间接ELISA方法,探讨其在梅毒血清学诊断中的价值。方法构建重组质粒PQE32/Tp 0319,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和western blot鉴定表达结果;Ni-NTA亲和层析法纯化重组蛋白,间接ELISA检测梅毒患者血清中特异性IgG抗体。结果成功构建了PQE32/Tp 0319重组质粒;经SDS-PAGE检测,诱导产物显示有一条相对分子质量约为30 000的特异蛋白质条带,western blot分析证明其只与人抗Tp IgG发生特异性反应;将Tp 0139用于间接ELISA检测抗Tp抗体阴、阳性参比血清,特异性和敏感性均为100%;检测梅毒患者和健康献血者血清各150份,结果与TPPA法符合率为95.3%。结论制备的Tp 0319重组蛋白有较好的免疫反应性,可望用于临床梅毒血清学诊断。

梅毒螺旋体感染阳性患者C反应蛋白变化的研究

梅毒是由苍白密螺旋体引起的全身性疾病，在我国近年来随着性传播疾病的流行，其发病率又有增加的趋势，部分患者无明显症状成为隐性梅毒螺旋体感染。本文通过检测梅毒螺旋体阳性患者血清炎症因子C反应蛋白的含量探讨其与梅毒螺旋体感染的关系。

蛋白免疫印迹试验检测新生儿早期先天梅毒21例

目的:评估梅毒螺旋体蛋白印迹试验(TPPA-IgM-WB)在诊断新生儿早期先天梅毒中的作用。方法:对21例梅毒孕妇所产21例新生儿血清,应用梅毒螺旋体蛋白印迹试验(TPPA-IgM-WB)和常规血清学方法(TPPA、RPR、FTA-ABS-IgM)进行检测,评价上述实验诊断方法和常规实验室检测在先天梅毒早期诊断中的作用。结果:21例孕妇梅毒病例所生的21例新生儿中,按常规综合诊断方法10例诊断为先天梅毒,而新生儿血清IgM蛋白印迹试验l2例阳性(10例常规方法诊断为先天梅毒)。结论:血清IgM蛋白印迹试验诊断先天梅毒具有较高的特异性和敏感性,结果显示可能高于现行的常规综合诊断方法的诊断价值。

免疫印迹技术在老年人梅毒螺旋体抗体阳性标本中的临床应用

目的探讨免疫印迹技术在老年人梅毒螺旋体抗体阳性标本中的临床应用，减少假阳性，避免误诊。方法将ELISA法检测出的老年人梅毒螺旋体抗体阳性标本78例，用免疫印迹法（WB）和TPPA法进行确认实验。结果ELISA法检出阳性78例，WB法确认阳性68例，假阳性率12．82％；TPPA确认阳性69例，假阳性率11．53％；ELISA法假阳性的SCO值与真阳性的SCO值差别无统计学意义（P〉0．05），WB法与TPPA法确认的阳性率差别无统计学意义（P〉0．05）。结论为提高老年人梅毒检测的准确性，对ELISA法检测的阳性标本，结合临床表现与病史，对有疑问的标本，用WB法进行确认，排除假阳性。

梅毒密螺旋体Tp47重组蛋白的表达及其应用

目的 在大肠埃希菌中表达梅毒密螺旋体 (Treponemapallidum ,Tp)Tp47重组蛋白 ,用其建立诊断梅毒的酶联免疫法 (enzymeimmunoassay ,EIA)。 方法 应用聚合酶链反应法 (PCR)从Tp全基因组中扩增目的片段Tp47,并将其克隆到表达载体 pET - 3 0a中 ,构建重组质粒pET - 3 0a -Tp47。在大肠埃希菌中表达重组蛋白Tp47,亲和层析柱纯化 ,建立EIA法 ,检测血清中抗 -Tp抗体。 结果 获得了Tp47基因重组蛋白的高效表达 ,该重组蛋白存在于细菌上清中 ,占全菌体蛋白 12 %左右 ,分子量约 3 9kDa。蛋白印迹法 (westernblot,WB)显示 ,Tp47重组蛋白具有良好的抗原性。用Tp47重组蛋白建立EIA法 ,检测 11份梅毒血凝试验阳性和 2 8份阴性血清 ,灵敏度为 10 0 % (11/ 11) ,特异性为 96 4% (2 7/ 2 8)。

化学发光法检测梅毒螺旋体特异性抗体的实验评价

目的应用免疫印迹法(WB)比较临床常用的梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)与化学发光法(CLIA)检测血清梅毒螺旋体特异性抗体的符合率。方法收集7 805份临床检测的血清标本,分别用TPPA和CLIA进行梅毒螺旋体特异性抗体检测,对结果不一致的标本应用WB检测确证。结果 7 805份血清标本中,CLIA检测阳性310例,TPPA检测阳性262例。对结果不一致的48例标本应用WB检测验证,结果证实阳性36例,临界阳性8例,阴性4例,而TPPA的结果均为阴性。TPPA检测总符合率为99.44%,CLIA检测总符合率为99.95%。结论 CLIA敏感性优于临床常用的TPPA,且具有结果客观、易分析、重复性好等优点,但也存在个别假阳性和钩状效应,因此应结合TPPA及临床资料确诊。

梅毒螺旋体特异性抗体对梅毒早期诊断和治疗的评价

目的:为评价梅毒血清特异性抗体在梅毒早期诊断及治疗后的意义。方法:采用蛋白印迹法(Westernblotting,WB)、快速血浆反应素(RPR)试验、梅毒颗粒凝集试验(TPPA)3种方法,对67例梅毒及其中经治疗后随诊18～24个月的21例患者作血清检测。对5年来诊治的临床一期、二期梅毒血清抗体的变化进行分析。结果:20例一期梅毒WB检测出现不同抗体谱条带,其中均有相对分子质量为47000的条带,RPR试验及TPPA部分为阴性。经治疗后随诊18～24个月的21例梅毒患者,18个月内检测时WB9.52%阴转,24个月时28.57%阴转;TPPA阴转的情况同WB;RPR滴度随疗后时间的增加而逐渐下降,6个月内28.57%阴转,24个月85.71%阴转。结论:相对分子质量为47000、17000的条带对早期梅毒的诊断既敏感又特异;部分一期和二期梅毒患者在经过有效治疗后2年,梅毒抗体可以完全消失;RPR试验可用于梅毒治疗期间的疗效判定。

化学发光微粒子免疫分析法检测梅毒螺旋体特异性抗体的应用与评价

目的评价化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)检测梅毒螺旋体特异性抗体(抗-TP)的实验室应用,采用受试者操作特性(ROC)曲线分析应用CMIA检测抗-TP最佳的S/CO的cutoff值,以提高抗-TP检测的灵敏度和特异度。方法收集美国雅培公司I2000化学发光免疫分析仪检测的抗-TP阴性、弱阳性、阳性血清共294份,分别用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)和欧蒙免疫印迹法(WB)进行抗-TP检测,比较TPPA与CMIA的特异性和敏感性,采用SPSS 16.0统计软件对抗-TP S/CO值绘制ROC曲线,得出CMIA在本实验室的S/CO最佳cutoff值。结果以免疫印迹法结果为金标准,CMIA与TPPA的阳性检出率分别为42.1%和42.5%,敏感性为100.0%和99.2%,特异性为88.2%和88.7%,阳性预测值为86.1%和86.7%,阴性预测值为100.0%和99.3%,与WB的总符合率均为93.2%。ROC曲线分析其最佳筛查cutoff值S/CO=3.125时,CMIA的特异性为98.4%,敏感性为97.2%,ROC曲线下面积为0.956,具有很好的诊断价值。结论 CMIA法和TPPA法具有高敏感性和特异性。采用ROC曲线分析得到CMIA S/CO的cutoff值为3.125时,可显著提高实验的特异性。

蛋白免疫印迹和荧光-PCR诊断早期先天梅毒研究

目的评价荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和血清IgM抗体蛋白免疫印迹实验(serumIgMwestern blot,IgM-WB)在新生儿先天梅毒早期诊断中的作用。方法在知情同意的情况下,选取34例梅毒孕妇及其新生儿和40例非梅毒对照孕妇及其新生儿,分别给予荧光定量聚合酶链反应、血清IgM-WB试验和常规血清学方法(TPPA、RPR、19S-FTA-ABS),以双盲对照的形式评价上述实验诊断方法和常规实验室检测(临床+常规血清学方法RPR滴度的比较+治疗)在先天梅毒早期诊断的作用。结果34例孕妇梅毒病例所生的新生儿中,按常规综合诊断方法3例确诊为先天梅毒,6例拟诊为先天梅毒。34例完成妊娠的梅毒孕产妇病例中,孕妇胎盘和脐带组织荧光定量聚合酶链反应11例阳性(9例常规方法诊断为先天梅毒);新生儿血清IgM蛋白印迹试验10例阳性(9例常规方法诊断为先天梅毒);40例作为对照的非梅毒孕妇及新生儿各项检查均为阴性。结论胎盘组织荧光定量聚合酶链反应和血清IgM蛋白印迹试验诊断梅毒,结果显示可能高于现行的常规综合诊断方法的诊断价值,且优于常规综合诊断方法中的任何一种。

梅毒螺旋体特异性IgM抗体检测的临床评价

目的探讨梅毒螺旋体特异性IgM抗体检测在各个时期梅毒诊断中的意义。方法采用蛋白印迹法(WB)检测IgM、甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST)、梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)和暗视野检查梅毒螺旋体(TP)4种方法,对21例一期梅毒患者、8例二期梅毒患者、4例潜伏期梅毒患者、3例怀疑先天性梅毒婴儿、7例正规治疗18个月后梅毒患者及5例健康对照者进行检测分析。结果一期梅毒患者组IgM、TRUST、TPPA、TP阳性率分别为100.0%、42.9%、57.1%和66.7%。二期梅毒患者组、潜伏期梅毒、先天性梅毒患者组IgM、TRUST、TPPA阳性率均为100.0%。正规治疗18个月后梅毒患者组IgM、TRUST、TPPA阳性率分别为0、28.6%和100.0%。健康对照组IgM、TRUST、TPPA均为阴性。结论梅毒螺旋体特异性IgM抗体检测灵敏度高、特异性强,适用于未经治疗的各个时期的梅毒诊断。

蛋白印迹法Western—Blot诊断梅毒的临床评价

蛋白印迹法(Western-Blot)是80年代新发展起来的一种先进检测技术,它结合了免疫学和生物化学的特点,特异性强,敏感性高。本文试以荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA—ABS)和快速血浆反应素试验(RPR)作为对照,对蛋白印迹法用于诊断梅毒的若干问题作一临床评价。

化学发光法检测梅毒螺旋体抗体的临床研究

目的:应用免疫印迹法(WB)比较临床常用的梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)与化学发光法(CLIA)检测血清梅毒螺旋体特异性抗体的符合率。方法:收集7 805份临床检测的血清标本,分别用TPPA和CLIA进行梅毒螺旋体特异性抗体检测,对结果不一致的标本应用WB检测确证。结果:7 805份血清标本中,CLIA检测阳性310例,TPPA检测阳性262例。对结果不一致的48例标本应用WB检测验证,结果证实阳性36例,临界阳性8例,阴性4例,而TPPA的结果均为阴性。TPPA检测总符合率为99.44%,CLIA检测总符合率为99.95%。结论:CLIA敏感性优于临床常用的TPPA,且具有结果客观、易分析、重复性好等优点,但也存在个别假阳性和钩状效应,因此应结合TPPA及临床资料确诊。

三种梅毒螺旋体抗体检测方法的比较分析

目的比较化学发光法(TP-CLIA)、酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝聚试验(TPPA)对梅毒螺旋体特异性抗体(TP-Ab)检测的意义。方法分别用CLIA、ELISA和TPPA检测患者的1 797份血清样本,收集CLIA/ELISA/TPPA/法检测均阳性但临床未明确诊断的标本及结果不一致标本以重组免疫印迹法(RIBA)最终确认。结果三种方法共筛选69例阳性及可疑血清标本。CLIA/ELISA/TPPA法均阳性标本63例,其中52例有临床明确诊断。另11例3种方法检测均阳性但未明确诊断标本和6例检测结果不一致标本用RIBA确证。CLIA法确认阳性66例,阳性率3.67;ELISA法确认阳性65例,阳性率3.62;TPPA法法确认阳性61例,阳性率3.39;CLIA、ELISA及TPPA法敏感性分别为98.51%、97.02%和91.05%;特异性均为99.88;诊断效率分别99.83%、99.78和99.66%。结论 CLIA法和ELISA法敏感性均高于TPPA法,不管用何种方法检测对于临床诊断不符的标本均应慎重,必要时用RIBA法补充确认,以排除假阳性。

梅毒螺旋体特异性抗体检测方法在血清学诊断中的应用评估

目的对临床上常用的2种梅毒螺旋体(TP)特异性抗体检测方法进行评价。方法收集350份术前筛查样本,以梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)检测结果分组(第1组125份样本,为TPPA有反应性;第2组25份样本,为TPPA 1∶80弱反应性;第3组200份样本,为TPPA阴性),采用免疫层析法和化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)平行检测3组样本,结果不一致的样本采用免疫印迹法复核。结果第1组和第2组150份样本中,免疫层析法检出有反应性样本145份,5份未检出,敏感性为96.7%(145/150);CMIA检出有反应性样本150份,敏感性为100.0%(150/150),2种方法的敏感性差异无统计学意义(P>0.05)。第3组200份样本中,免疫层析法检出弱反应性样本8份,CMIA检出有反应性样本16份。免疫层析法与TPPA有13份样本的检测结果不一致,2种方法的一致率为96.3%(337/350);CMIA与TPPA有16份样本的检测结果不一致,2种方法的一致率为95.4%(334/350);免疫层析法的特异性为98.5%(192/195),CMIA的特异性为94.4%(184/195),2种方法的特异性差异无统计学意义(P>0.05)。结论免疫层析法和CMIA均具有很好的敏感性和特异性,且与TPPA一致性较好,可用于临床检测。

ECLIA法检测梅毒螺旋体特异性抗体的临床价值

目的分析电化学发光免疫法(ECLIA)法检测梅毒螺旋体特异性抗体的临床价值。方法选取医院收治的疑似梅毒患者200例,分别用ECLIA、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)以及免疫印迹法(WB)进行检测,以WB法检测结果为金标准,比较ECLIA与TPPA检测结果的准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。结果ECLIA检测结果为阳性161例中WB检测153例为阳性,8例为阴性;检测结果为阴性39例中WB检测全部为阴性。TPPA检测结果为阳性150例中WB检测143例为阳性,7例为阴性;检测结果为阴性50例中WB检测10例为阳性,40例为阴性;ECLIA检测准确度96.00%,灵敏度100.00%,特异度82.97%,阳性预测值95.03%,阴性预测值100.00%;TPPA检测准确度91.50%,灵敏度93.46%,特异度85.11%,阳性预测值95.33%,阴性预测值80.00%;0<S/CO<1时,WB检测真阳性为0例,ECLIA检测准确度100.00%,TPPA检测检测准确度79.49%;1<S/CO<3时,WB检测真阳性为64例,ECLIA检测准确度91.43%,TPPA检测检测准确度95.71%;S/CO≥3时,WB检测真阳性为89例,ECLIA检测准确度97.80%,TPPA检测检测准确度92.31%。结论ECLIA检测是一种准确度、敏感度、特异度较高的检测梅毒抗体方法,结果判断客观。

国产和进口化学发光仪在梅毒螺旋体抗体检测中的应用比较

目的：探讨希森美康化学发光酶免疫分析仪（HISCL5000）和安图化学发光仪（LUMOA2000）在梅毒螺旋体抗体（TPAb）检测中的应用比较。方法：选取我院经过HISCL5000（临界值指数COI≥1）检测的200例和（LUMOA2000（S／CO≥1）检测阳性标本202例，之后使用TPPA进行比对检测，最后选择两者结果不符的标本进行重组免疫印迹验证。结果：安图化学发光仪（AutolumoA2000）和希森美康化学发光酶免疫测定仪（HISCL500（））两类仪器与TPPA比较，梅毒阳性检出率差异无统计学意义（x。=2．202，P〉0．05oTPPA阴性而重组免疫印迹验证结果为单个IgG抗体片段，分别为TmpA和Tpl5，最终判定TP抗体结果为不确定；TPPA和AutolumoLUMOA2000检测阳性，而HISCL5000检测阴性标本，重组免疫印迹验证结果为单个IgG抗体片段Tp453，最终判定TP抗体结果为不确定，TPPA、AutolumoLUM0A2000和HISCL5000检测阳性标本，验证结果为2个以上IgG抗体片段，最终结果为阳性结论：安图化学发光仪（AutolumoA2000）检测梅毒的结果与希森美康化学发光酶免疫测定侧HISCL5000）一样准确，完全可以作为日常筛查方法，满足检验科的临床应用。