几种理化因子对梅氏新本尼登虫(Neobenedenia melleni)卵发育的影响

水温在18-29℃之间梅氏新本尼登虫（Neobenedenia melleni）虫卵的发育和孵化速度随温度的升高而加快，〈18℃、〉33℃发育停滞；盐度〈13．7‰虫卵不发育，〈22．9‰或〉44．3‰卵发育停滞在眼点期，盐度居22．9‰～44．3‰之间，其改变对虫卵发育没有显著影响；酸碱度变化对虫卵发育没有明显的影响，础为5.5或9．5时，卵均可正常发育并孵化，但孵化出的纤毛幼虫在pH〈6．0或〉9．0时，存活时间和活力明显降低。

几种理化因子对梅氏新本尼登虫卵发育的影响

观察在不同的水温、盐度、酸碱度条件下梅氏新本尼登虫（Neobenedenia melleni）卵发育以及毛蚴孵出的变化，以研究理化条件对卵发育的影响。结果表明，18～29℃之间，梅氏新本尼登虫虫卵的发育和孵化速度随温度的升高而加快，水温〈18℃或〉33℃发育停滞；盐度〈13．7虫卵不发育，盐度〈22．9或〉44．3卵发育停滞在眼点期，盐度居22．9～44．3之间，其改变对虫卵发育没有显著影响；酸碱度变化对虫卵发育没有明显的影响，pH为5．5或9．5时，卵均可正常发育并孵化，但孵化出的纤毛幼虫在pH〈6、0或〉9．0时，存活时间和活力明显降低。

新本尼登虫Neobenedenia sp.的扫描电镜观察

报告作者在扫描电镜下详细观察新本尼登虫Neobenedeniasp .和本尼登虫Benedeniasp .之超微结构 。

梅氏新贝尼登虫(Neobenedenia melleni)卵黄铁蛋白的cDNA克隆、原核表达及抗血清制备

从cDNA文库中获得了梅氏新贝尼登虫卵黄铁蛋白(NmYF)的编码序列。序列全长739个核苷酸,3′-末端具有polyA尾,单一大开放阅读框编码一个由226个氨基酸组成的分子量为26.1kDa的蛋白。序列比较表明,NmYF与卫氏并殖吸虫卵黄铁蛋白最相似,氨基酸序列同源性为23.7%。系统进化树分析表明,NmYF、卫氏并殖吸虫卵黄铁蛋白和头槽绦虫卵黄铁蛋白形成了一个小的进化簇,而体铁蛋白序列形成了一个大的进化簇,揭示了卵黄铁蛋白和体铁蛋白间的差异以及进化上的相关性。这是梅氏新贝尼登虫卵黄铁蛋白基因序列的首次报道。随后,构建了插入有全长NmYF基因开放阅读框序列的原核表达质粒pET-22b-NmYF,转化大肠杆菌BL21pLysE菌株,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE检测表明预期大小的目的蛋白大量表达。随后制备了目的蛋白的多克隆抗血清,它能与目的蛋白起强的特异性反应,但与细菌自身蛋白不起反应,可用于后续研究。

印度尼西亚峇淡岛海域鱾新本尼登虫(Neobenedenia girellae)形态学及28S rRNA分子鉴定

本研究通过结合形态学与DNA分子标记等生物学手段,对印度尼西亚峇淡岛海域海水鱼类养殖中的本尼登虫(Isolate Batam, IB)进行形态学分析和种类鉴定。IB虫株在形态上与鱾新本尼登虫(Neobenedenia girellae)相似,属于新本尼登属。28S rRNA序列扩增得到序列为394 bp,与其他本尼登虫属比对相似性在85.86%~99.47%之间。进化树构建结果显示IB虫株与其他珻氏新本尼登虫(Neobenedenia melleni)和鱾新本尼登虫构成一簇,而本尼登虫自成一簇。综上所述,本研究结果支持鱾新本尼登虫与珻氏新本尼登虫为同种异名的分类学观点,并将IB虫株定种为鱾新本尼登虫。

魢新本尼登虫(单殖目:多室科)的发育

报道了寄生于海水养殖鱼类体表的新本尼登虫 (Neobenedeniagirellae)生活史各期的发育过程。虫卵在 2 5℃～ 2 8℃海水温度条件下 4～ 6d钩毛蚴发育成熟 ;用钩毛蚴人工感染一种鲻科鱼类———棱 (Lizacarinatus)获得成功。在 2 6℃～ 30℃实验室温度条件下 ,钩毛蚴感染棱 10～ 14d后虫体发育成熟 ,并在感染后的第 16天虫体开始产卵。本文对新本尼登虫的生活史发育各期幼虫的形态进行详细的观察、描述。

玫氏新本尼登虫扫描电镜观察(单殖吸虫纲,分室科)(英文)

报道寄生于福建海水养殖鱼类高体的玫氏新本尼登虫 (单殖吸虫纲 ,分室科 )的扫描电镜观察。虫体体表无棘 ,前吸器和后吸器盘状。副甲片。

梅氏新贝尼登虫钩毛蚴及成虫活力(单殖吸虫目:多室科)

对梅氏新贝尼登虫 (Neobenedeniamelleni)的钩毛蚴和成虫的存活时间进行了研究 .结果表明 ,钩毛蚴在新鲜过滤海水中 4℃时可存活 6～ 98h ,2 5℃时可存活 1.5～ 2 5 .5h ,30℃时可存活 0 .5～ 14h ;将离体成虫置于新鲜过滤海水中 ,2 8℃时最长存活时间为 2 1h .在 2 5℃～ 2 8℃的水温条件下 ,该虫感染宿主后 ,16d后产卵 ,成虫虫体寿命约为

梅氏新贝尼登虫热休克蛋白60基因的克隆、序列分析及应激表达分析

热休克蛋白60(HSP60)是一种维持线粒体蛋白正常结构和功能的分子伴侣。该文克隆了梅氏新贝尼登虫HSP60基因cDNA序列(NmHSP60),并采用荧光定量RT-PCR和Western blot研究其在不同温度和盐度下的表达变化。以25℃为参照,18℃时,NmHSP60在虫卵和成虫中均表达下调;而32℃时,在成虫中表达上调。以盐度24为参照,盐度18时,NmHSP60在成虫中表达下调;盐度30时,在虫卵中表达上调。该结果揭示NmHSP60可能在梅氏新贝尼登虫应对环境应激中起重要作用。

梅氏新贝尼登虫膜联蛋白B1基因序列分析及应激表达分析

膜联蛋白(Annexins,ANX)是一类Ca^(2+)依赖性磷脂结合蛋白多基因家族,参与生物膜修复、Ca^(2+)调节、信号传导、膜泡运输以及细胞增殖等过程,部分成员其mRNA和蛋白表达与发育和环境变化紧密相关。研究采用生物信息学方法鉴定了梅氏新贝尼登虫anxb1(Neobenedenia melleni anxb1,nmanxb1)的序列特征,随后采用RT-qPCR技术确定其mRNA表达与发育和环境(温度和盐度)变化相关性。研究结果表明,NmANXB1具有4个由α-螺旋组成的重复单元,其中3个典型Ⅱ型Ca^(2+)结合位点、6个Ⅲ型Ca^(2+)结合位点,以及1个KGD基序。氨基酸序列的系统进化树分析揭示,nmanxb1与其他B族蠕虫类寄生虫anx共成一簇。RT-qPCR结果显示,nmanxb1 mRNA主要在虫卵中表达。低温和高温应激下虫卵nmanxb1 mRNA表达量显著上调;高温和低盐应激时成虫中的表达量也显著上升。以上结果揭示,NmANXB1可能参与梅氏新贝尼登虫的发育和环境应激适应过程。

中草药粗提物杀灭离体鱾新本尼登虫效果

鱾新本尼登虫作为海洋鱼类的一种体外寄生虫,是海水养殖中主要的流行病原。为了探究盐度对鱾新本尼登虫成虫和幼虫活力的影响,以成虫和幼虫的累积死亡率为指标,检测了成虫和幼虫在四种盐度(0、10、20和30 ppt)胁迫下的活力状况。在此基础上,测试了五种中草药猪苓、羌活、淡竹叶、牡丹皮和紫草的酒精粗提物离体杀灭鱾新本尼登虫的活性。研究结果表明,当水温维持在22℃时,成虫和幼虫处于30 ppt的海水盐度下,在实验分别开始的8小时和5小时内,它们的累积死亡率均为0%,可以维持较好的活力,该结果可为鱾新本尼登虫的离体杀虫实验提供时间依据。另外,离体杀虫实验结果表明,浓度为16 mg·L^(-1)和8 mg·L^(-1)的羌活酒精粗提物分别在158.7 min和135.7 min之内可以杀灭100%的成虫和幼虫。淡竹叶、牡丹皮和紫草的酒精粗提物在浓度高于64 mg·L^(-1)时才能杀灭所有的幼虫。猪苓提取物减少了成虫和幼虫的存活率。羌活提取物在浓度高于128 mg·L^(-1)时可以完全抑制鱾新本尼登虫虫卵的孵化,但是,持续暴露在256 mg·L^(-1)的猪苓、淡竹叶和紫草粗提物下十天,虫卵的孵化率仍无显著变化。根据这些结果可以表明上述的几种植物粗提物可以作为水产养殖中控制鱾新本尼登虫感染的植物型药物的潜在来源。

象山港养殖大黄鱼寄生新贝尼登虫成虫形态学和28S rDNA,ITS1分子鉴定

贝尼登类单殖吸虫是象山港海水养殖鱼类中一类危害严重的寄生虫。应用PCR扩增及DNA序列分析的分子生物学手段,并结合对成虫的形态学分析,对象山港养殖大黄鱼体表寄生的贝尼登类单殖吸虫(记作XSp)进行了种类鉴定,结果表明XSp从形态特征上属于新贝尼登虫属,与梅氏新贝尼登虫高度相似。扩增得到XSp的28SrDNA和ITS1序列长度分别为393和427bp,与梅氏新贝尼登虫和鱾新贝尼登虫的5个28SrDNA序列、2个ITS1序列的比对分析显示相似性除1个为97.4%外其余均大于99%,提示XSp与这几个鱾新贝尼登虫和梅氏新贝尼登虫为种内关系,而XSp与贝尼登虫的3个28SrDNA和1个ITS1序列相似性分别为84.3%～89.5%和60.2%。系统进化树显示该吸虫与梅氏新贝尼登虫和鱾新贝尼登虫形成一个紧密的簇,而与贝尼登虫亲缘关系较远。根据普通生物学和序列特征分析,将XSp定种为梅氏新贝尼登虫,并且支持Whittington和Horton(1996)提出的梅氏新贝尼登虫和鱾新贝尼登虫为同种异名的分类观点。