水蔓菁中5种主要化学成分的分离及含量测定

目的分析水蔓菁中的苷类化合物,建立同时测定5种主要苷类化合物含量的方法。方法对水蔓菁的苷类化合物进行分离和纯化,根据化合物的波谱数据进行结构鉴定;运用高效液相色谱(HPLC)的面积归一化法测定其5种主要苷类化合物的含量。采用安捷伦Extend-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm);甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^(-1);柱温:25℃;检测波长:260、340 nm。结果分离鉴定了水蔓菁中5个主要苷类化合物,分别为毛蕊花苷(1)、梓苷(2)、胡黄连苷Ⅱ(3)、梓醇6-咖啡酸酯(4)、水蔓菁苷Ⅱ(5),纯度分别为99.5%、99.5%、99.8%、99.8%及98.1%。在75 min内,水蔓菁中毛蕊花苷、梓苷、胡黄连苷Ⅱ、梓醇6-咖啡酸酯和水蔓菁苷Ⅱ能达到良好的分离,分别在0.597~9.552,0.212~3.398,0.200~3.146,0.300~4.806,0.300~4.813μg范围内呈良好线性关系(r分别为0.9999、0.9999、0.9999、0.9998、0.9999),平均回收率为98.57%、103.10%、103.97%、99.66%、103.60%,相对标准偏差(RSD)分别为2.45%、1.83%、2.11%、3.32%、1.96%。结论该研究建立的方法操作简便、准确,专属性强,重复性好,可用于水蔓菁中5种主要苷类化合物的含量测定,并为水蔓菁药材及其制剂的质量控制提供依据。