经方“大柴胡汤”对梗阻性胆汁淤积性肝损伤细胞焦亡调节作用的研究进展

梗阻性胆汁淤积性肝损伤可由高浓度的胆汁酸诱导细胞焦亡,当胆汁淤积时,胆汁酸在肝细胞内积聚引起线粒体损伤和内质网应激,肝细胞及胆管上皮细胞Toll样受体4(TLR4)适应性表达增加,激活磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号通路,进一步激活下游靶蛋白核转录因子(NF-κB),引起炎症反应、免疫应答和细胞焦亡。NF-κB核易位,启动致炎细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6),引起肝胆细胞炎性反应,引起肝损伤,同时激活核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎症小体,活化半胱氨酸天冬氨酸酶1(Caspase-1)引起细胞焦亡。结合梗阻性胆汁淤积性肝损伤的临证特点,分析其病理因素为“痰”和“瘀”,以湿热蕴结、熏蒸肝胆、少阳阳明同病。根据痰瘀为致病特点,通过临证实践总结经方大柴胡汤应用,其方证机制与梗阻性胆汁淤积性肝损伤病机相切合,就经方“大柴胡汤”对梗阻性胆汁淤积性肝损伤细胞焦亡的调节作用进行综述。

龙胆苦苷调控PPAR-α改善胆汁淤积性肝损伤的药效机制研究

目的 探讨龙胆苦苷通过过氧化物酶体增殖物激活受体-α(PPAR-α)通路对胆汁淤积性肝损伤的影响及作用机制。方法 (1)48只C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组、模型组[α-萘基异硫氰酸酯(ANIT),灌胃]、熊去氧胆酸组(200 mg/kg,灌胃)以及龙胆苦苷低、中、高剂量组(50、100、200 mg/kg,灌胃),每组8只。各组小鼠连续给予相应干预措施7 d。第5天给药6 h后,正常组灌胃给予空白橄榄油溶液,其余各组小鼠灌胃给予ANIT诱导胆汁淤积性肝损伤。给药结束后,观察小鼠体质量变化;记录肝脏质量,计算肝脏指数;检测小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBil)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测肝组织PPAR-α、核转录因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)mRNA表达;Western blot法检测小鼠肝脏中PPAR-α、细胞色素P4503A4(CYP3A4)、肉碱棕榈酰转移酶2(CPT2)以及组成型雄甾烷受体(CAR)蛋白表达。(2)采用L02人肝细胞进行体外实验,建立牛磺鹅去氧胆酸钠(TCDC)胆汁淤积性肝细胞损伤模型,采用10、50、100μmol/L龙胆苦苷进行干预。测定细胞上清液中AST、ALT、TBA的含量;RT-qPCR法验证肝细胞中PPAR-α、NF-κB、TNF-α、IL-1β mRNA表达;Western blot法检测肝细胞中PPAR-α、CYP3A4、CPT2以及CAR蛋白表达。(3)另在TCDC胆汁淤积性肝细胞损伤模型基础上,采用PPAR-α激动剂(非诺贝特)和抑制剂(GW6471)进行PPAR-α拮抗实验。Western blot法检测肝细胞中PPAR-α、CYP3A4、CPT2、CAR蛋白表达。结果 (1)龙胆苦苷可下调胆汁淤积性肝损伤小鼠血清中AST、ALT、TBA、TBil含量(P<0.05),并改善小鼠肝脏病变情况。(2)龙胆苦苷可上调胆汁淤积性肝损伤模型小鼠肝组织和模型细胞中PPAR-α mRNA水平,降低促炎细胞因子NF-κB、TNF-α、IL-1β的mRNA水平。(3)龙胆苦苷能上调胆汁淤积性肝损伤小鼠肝组织PPAR-α、CYP3A4、CPT2蛋白水平,降低CAR蛋白水平。(4)PPAR-α抑制剂可降低龙胆苦苷对胆汁淤积性肝损伤细胞中PPAR-α的上调作用,并进一步影响PPAR-α对于CYP3A4、CPT2、CAR蛋白的调控作用。结论 龙胆苦苷可通过上调PPAR-α蛋白调控胆汁酸相关蛋白CYP3A4、CPT2、CAR表达,进而降低NF-κB、TNF-α、IL-1β等促炎细胞因子水平,从而发挥抗胆汁淤积性肝损伤的作用。

药物性胆汁淤积型肝损伤患者的临床表现、影像学特征以及转归

目的分析药物性胆汁淤积型肝损伤患者临床表现、影像学特征以及转归。方法纳入2020年3月至2022年3月在我院确诊为药物性胆汁淤积型肝损伤的患者47例。分析纳入病例的年龄阶段、用药情况、临床表现、致病药物及影像学表现,比较不同预后结局并分析预后的影响因素。结果47例患者中,年龄<40岁、40~60岁、>60岁分别为3例(6.4%)、23例(48.9%)、21例(44.7%)。用药时间为3~150 d,潜伏时间2~180 d。42例(89.4%)存在1种及以上临床症状,5例(10.6%)仅有肝功能异常而无自觉症状。致病药物共计74种,其中31例(65.9%)服用1种以上致病药物,排名前5种药物包括服用中草药21例(44.7%)、服用抗菌类药物16例(34.0%)、服用抗结核药物14例(29.8%)、服用消化系统药物13例(27.6%)及服用抗肿瘤药物7例(14.9%)。病情严重程度1级、2级、3级、4级分别为19例(50.0%)、17例(44.7%)、6例(15.8%)、5例(13.1%)。有30例(63.8%)行磁共振胰胆管成像,其余患者均行B超或腹部CT检查。10例(21.3%)影像学上存在硬化性胆管炎样改变,其中5例(10.6%)为肝外狭窄,3例(6.4%)肝内外胆管均有狭窄,2例(4.2%)为肝门部胆管狭窄。随访至2023年10月,治愈27例(62.5%),好转11例(20.0%),预后不良7例(12.5%),死亡2例(5.0%),总有效率为82.5%。定义治愈、好转病例为有效组(n=38),预后不良、死亡病例为无效组(n=9)。有效组年龄、RUCAM评分、WBC、PLT、初始ALP、初始TBil、峰值ALP、峰值TBil、硬化性胆管炎样改变分别为(53.5±7.0)岁、8(7,9)分、5.0(3.9,7.5)×10^(9)/L、227(170,278)×10^(9)/L、(401.6±37.2)U/L、(126.5±21.3)μmol/L、(436.0±37.2)U/L、(146.3±35.6)μmol/L、4例(10.5%),无效组分别为(62.4±11.3)岁、6(6,7)分、7.4(5.0,9.3)×10^(9)/L、130(98,155)×10^(9)/L、(503.4±54.0)U/L、(150.2±47.0)μmol/L、(634.5±82.6)U/L、(181.2±64.5)μmol/L、6例(66.7%),差异均有统计学意义(P<0.05)。有效组1、2、3、4级为17例(44.7%)、16例(42.1%)、3例(7.9%)、2例(5.3%),无效组1、2、3、4级为2例(22.2%)、1例(11.1%)、3例(33.3%)、3例(33.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。RUCAM评分、峰值ALP、峰值TBil及病情严重程度是药物性胆汁淤积型肝损伤患者预后独立影响因素(P<0.05)。结论多数药物性胆汁淤积性肝损伤预后良好,临床应对RUCAM评分低、峰值ALP、峰值TBil高及病情严重患者密切关注。

消黄去疸汤对胆汁淤积性肝损伤大鼠肠物理屏障及Th17/Treg平衡的影响

目的 探讨消黄去疸汤对胆汁淤积性肝损伤大鼠肠黏膜屏障及免疫的作用机制。方法 48只大鼠随机分为空白组、模型组(0.075 g/kg α-萘异硫氰酸酯)、熊去氧胆酸组(0.06 g/kg)和消黄去疸汤低、中、高剂量组(5.62、11.23、22.47 g/kg),每组8只。HE染色观察肝组织病理变化,比色法检测血清ALT、AST、TBIL、TBA水平,RT-qPCR与Western blot法检测肝组织RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白表达,以及肠组织ZO-1、occludin、claudin-3、Jam-3 mRNA及蛋白表达,流式细胞仪检测脾脏Th17、Treg细胞百分率。结果 模型组大鼠肝细胞形态脂质样沉积,脂肪样变性,汇管区周围有结缔组织增生,伴随炎性细胞浸润;各给药组均能改善肝组织病理损伤,且高剂量组更为明显。与空白组比较,模型组血清ALT、AST、TBIL、TBA水平升高(P<0.01),肝组织RORγt mRNA及蛋白表达升高(P<0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达降低(P<0.01),肠组织ZO-1、occludin、claudin-3、Jam-3 mRNA及蛋白表达降低(P<0.01),脾脏Th17细胞百分率升高(P<0.01),Treg细胞百分率降低(P<0.01);与模型组比较,熊去氧胆酸组和消黄去疸汤各剂量组血清ALT、AST、TBIL、TBA水平降低(P<0.01),肝组织RORγt mRNA及蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达升高(P<0.01),肠组织ZO-1、occludin、claudin-3、Jam-3 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),脾脏Th17细胞百分率降低(P<0.01),Treg细胞百分率升高(P<0.01)。结论 消黄去疸汤可有效缓解胆汁淤积性肝损伤,其机制可能与改善肠道黏膜屏障及调节Th17/Treg免疫平衡有关。

儿童胆汁淤积性肝病进展为急性肝衰竭的危险因素分析

目的探讨儿童胆汁淤积性肝病(CLD)进展为急性肝衰竭的危险因素,为预测和改善儿童CLD的预后提供参考。方法选取2020年1月至2022年12月于首都儿科研究所附属儿童医院住院治疗的CLD患儿44例,通过电子病历系统收集病例资料并根据出院时的临床转归结果将患儿分为单纯CLD组(25例)及急性肝衰竭组(19例)。采用多因素logistic回归分析探讨CLD患儿发生急性肝衰竭的影响因素,并进一步采用受试者操作特征(ROC)曲线分析上述影响因素对CLD患儿发生急性肝衰竭的预测价值。结果两组患儿性别、年龄、病程、病因比较差异均无统计学意义(P>0.05);与单纯CLD组相比,急性肝衰竭组的白蛋白、血红蛋白、血小板计数更低,降钙素原、国际标准化比值、血氨水平更高,凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间更长,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示降钙素原及活化部分凝血活酶时间是儿童CLD发生急性肝衰竭的独立危险因素(P<0.05),且ROC曲线分析显示两者同时升高对CLD患儿发生急性肝衰竭的预测价值更高(曲线下面积为0.974,敏感度为0.895,特异度为0.960)。结论部分CLD患儿起病后可能会进展至急性肝衰竭,早期应密切监测活化部分凝血活酶时间及降钙素原,特别是对于二者呈进行性升高的重症CLD患儿,应高度警惕急性肝衰竭的发生。

香兰素下调cGAS/STING信号通路改善肝内胆汁淤积大鼠肝组织损伤

目的探讨香兰素调节环鸟苷酸腺苷酸合成酶(cyclic guanylate adenylate synthetase,cGAS)/干扰素基因刺激因子(stimulator of interferon gene,STING)信号通路对肝内胆汁淤积(intrahepatic cholestasis,IC)大鼠肝组织损伤的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组、IC组、香兰素组、cGAS过表达组、香兰素+cGAS过表达组,连续给药7 d。测定大鼠体质量、肝质量和肝质量/体质量比值;酶联免疫吸附法测定肝功能指标(ALT、AST、ALP、LDH),IC指标(TBIL、TBA),肝纤维化指标(HA、LN、PCⅢ);HE、Masson染色分别观察肝脏病理学、纤维沉积变化,并计算胶原容积分数;蛋白印迹法检测肝组织cGAS/STING通路相关蛋白表达。结果香兰素可改善IC大鼠肝脏病理、纤维化,升高体质量,降低肝脏质量、ALT、AST、ALP、LDH、TBIL、TBA、HA、LN、PCⅢ、胶原容积分数、cGAS、STING蛋白(P<0.05);cGAS过表达可逆转香兰素对IC大鼠上述指标的影响(P<0.05)。结论香兰素可能通过下调cGAS/STING信号通路,改善IC大鼠肝功能、IC、肝纤维化和肝组织损伤。

KIF12基因新复合杂合突变导致进行性家族性肝内胆汁淤积1例报告

目的鉴定导致1例进行性家族性肝内胆汁淤积8(PFIC 8)患儿的KIF 12基因变异及其对功能的影响。方法分析1例PFIC 8患儿的临床资料,对患儿及其父母进行全外显子组测序,变异用一代测序进行验证。通过免疫荧光染色、细胞模型、实时定量聚合酶链式反应和蛋白质免疫印迹反应研究变异对基因功能的影响。同时对已报道的17例PFIC 8患儿的临床资料和基因变异进行文献复习。结果患儿,男,1个月14天,临床表现以发热和黄疸为主。全外显子组测序发现,患儿的KIF 12基因存在c.539G>A+c.928C>T复合杂合突变,此前未见报道。免疫荧光结果显示患儿肝细胞的KIF12蛋白的细胞内定位发生改变。在293T细胞中,c.539A、c.928T和c.539A+c.928T均可以使KIF12的mRNA表达减少,c.928T和c.539A+c.928T可使KIF12的蛋白水平表达降低(P<0.05)。文献回顾显示,已有7个KIF 12的纯合突变和1个复合杂合突变(c.538C>T+c.539G>A)被报道。在已报道的病例中,KIF 12的突变类型和PFIC 8患儿的肝外临床表型无关。结论在1例PFIC 8患儿中发现1种新的KIF 12复合杂合突变。在已发现的9个突变中,其类型与PFIC8肝外临床表型可能无关。

血清总胆汁酸对伴胆汁淤积的药物性肝损伤的诊断价值

目的 探讨血清总胆汁酸(TBA)对伴胆汁淤积药物性肝损伤的诊断价值。方法 收集2013年7月—2019年8月于首都医科大学附属北京佑安医院住院的药物性肝损伤(DILI)患者的临床资料、病理资料。以病理表现为依据,将入组患者分为伴胆汁淤积和无胆汁淤积两组,比较两组患者TBA水平。结果 共入组281例DILI患者,无胆汁淤积组患者127例(45.20%),胆汁淤积组患者154例(54.80%),其中胆汁淤积患者胆汁淤积病理表现以肝细胞胆汁淤积为主(61.04%)。两组患者性别、年龄、临床症状均无显著差异。胆汁淤积组患者TBA、总胆红素(TBil)及直接胆红素(DBil)均显著高于无胆汁淤积组患者[(97.01±72.08) vs (71.84±72.64)μmol/L、(139.17±147.23) vs (86.77±90.16)μmol/L、(102.30±110.63) vs (59.70±68.64)μmol/L,P均<0.05],且住院时间更长(P<0.05)。单因素分析表明,伴胆汁淤积组患者TBA、TBil及DBil显著高于无胆汁淤积的患者。多因素分析显示,TBA是药物性肝损伤患者胆汁淤积的独立预测指标。以99.70μmol/L为临界值,TBA预测肝组织学胆汁淤积的曲线下面积(AUC)为0.603(0.536~0.671)(P=0.003),其敏感度和特异度分别为52.6%和74.0%。且当TBA≥20.1μmol/L,即可考虑患者有75%的概率存在胆汁淤积,其敏感度大于76.6%。结论 血清TBA、TBil及DBil是鉴别药物性肝损伤胆汁淤积的敏感指标;血清TBA对伴胆汁淤积的药物性肝损伤具有一定的诊断价值。

褪黑素通过改善胆汁酸代谢减轻胆汁淤积肝损伤

目的初步探究褪黑素(melatonin,Mel)减轻胆酸(cholic acid,CA)诱导的胆汁淤积肝损伤的机制。方法将15只8周龄雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为3组(n=5):对照组、1%CA组和1%CA+Mel组,对照组喂养正常饮食,1%CA组和1%CA+Mel组喂养1%CA饮食14 d构建胆汁淤积小鼠模型,1%CA+Mel组同时腹腔注射褪黑素(100 mg/kg)。对1%CA组和1%CA+Mel组小鼠的肝组织进行α-SMA免疫组化染色,采用RT-qPCR检测小鼠肝纤维化相关指标的mRNA表达水平。采用液相色谱-串联质谱联用技术检测肝脏总胆汁酸,自动生化分析仪检测血清总胆汁酸。为了进一步了解胆汁酸代谢的机制,采用RT-qPCR检测小鼠胆汁酸合成和肝脏解毒酶相关指标的mRNA表达水平,Western blot检测胆汁酸合成和肝脏解毒酶相关指标的蛋白表达水平。结果与1%CA组相比,1%CA+Mel组的小鼠肝纤维化相关指标Tgfβ1、ColⅠa1、ColⅡa1和α-SMA的mRNA表达水平明显降低(P<0.05),小鼠肝组织α-SMA免疫组化染色结果显示肝星状细胞活化明显减少。与1%CA组相比,1%CA+Mel组小鼠血清与肝脏中胆汁酸含量显著减少,其中TCA含量显著降低,胆汁酸合成酶胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,Cyp7a1)和Cyp8b1的mRNA水平均显著降低,肝脏解毒酶Cyp2b10和尿苷二磷酸葡萄糖醛基酶1A1(udp-glucuronosyltransferase,Ugt1a1)的mRNA水平明显升高,Cyp2b10和胆盐磺基转移酶(sulfotransferase family 2A member 1,Sult2a1/2)的蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论褪黑素通过减少胆汁酸合成和增加肝脏解毒酶的方式改善胆汁淤积。

黄芪多糖对急性肝内胆汁淤积性肝损伤大鼠模型的影响

探究黄芪多糖对急性肝内胆汁淤积性肝损伤大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine transaminase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase,AST)、肿瘤坏死因子a(tumornecrosisfactor-a,TNF-a)、白细胞介素6(interleukin6,IL-6)水平的影响。将雄性健康SD大鼠54只随机分为空白组、实验组(模型组、熊去氧胆酸组及黄芪多糖低、中、高剂量组),每组9只。除空白组、模型组外,其余四组大鼠均给予熊去氧胆酸溶液及黄芪多糖低、中、高(0.2、0.4、0.8 g/kg)溶液,1次/d,共7 d。于第5 d,实验组给予1%α-萘异硫氰酸酯(ANIT)油溶液灌胃建立模型,空白组给予等容积橄榄油。观察大鼠一般情况,采用全自动生化分析仪检测血清ALT、AST含量,采用ELISA法检测血清中炎性因子TNF-α、IL-6表达水平。与空白组相比,模型组ALT、AST、TNF-α、IL-6均升高,具有显著性差异(P<0.01)。与模型组相比,熊去氧胆酸组及黄芪多糖低剂量组、中剂量组、高剂量组均降低,具有显著性差异(P<0.01)。与熊去氧胆酸组相比,黄芪高剂量组效果最为显著,ALT、AST、TNF-α、IL-6均降低,具有显著性差异(P<0.01)。黄芪多糖可以缓解ANIT诱导的急性肝内胆汁淤积性肝损伤并降低ALT、AST、TNF-α、IL-6水平。

ABCB11基因突变致良性复发性肝内胆汁淤积症2型1例

患者,女性,29岁,因“间断皮肤瘙痒、纳差、尿黄10余年,加重10天”入院。现病史:患者2003年9月无明显诱因出现皮肤瘙痒、皮肤黄染,伴纳差、恶心、厌油、尿黄、大便颜色变浅,无腹痛、腹泻,无发热,于我院住院治疗。查肝功能异常(表1),血常规及凝血功能未见异常,甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒系列均阴性,诊断为“单纯性胆汁淤积”。

丁二磺酸腺苷蛋氨酸联合门冬氨酸钾镁治疗胆汁淤积性肝炎的效果

目的:探讨丁二磺酸腺苷蛋氨酸在治疗肝内胆汁淤积性肝炎时的效果。方法:选取医院收治的100例肝内胆汁淤积性肝炎患者,通过随机数表法分为对照组(50例,常规保肝治疗)和观察组(50例,常规保肝+丁二磺酸腺苷蛋氨酸联合治疗),对比临床疗效和肝功能改善情况。结果:治疗后,观察组患者的TBIL、ALT、GGT三项指标均显著低于对照组(P<0.05),观察组患者的治疗总有效率和不良反应发生率均优于对照组(P<0.05)。结论:丁二磺酸腺苷蛋氨酸针对性治疗肝内胆汁淤积性肝炎具有更高的疗效,可以改善肝功能性,且可减少不良反应,具有安全性。

布鲁氏菌病合并胆汁淤积性肝病1例及文献复习

布鲁氏菌病是影响人类健康的重要人畜共患病,可累及人体全身任意器官或系统,临床表现多样。肝脏作为人体最大的网状内皮细胞吞噬系统,在机体抗布鲁氏菌感染中发挥着重要作用。布鲁氏菌感染常可引起机体转氨酶升高或肝脏肿大^([1]),但布鲁氏菌相关的肝脏肉芽肿和胆汁淤积性肝病较少,布鲁氏菌病引起的肝脏并发症需重视。

105例药物性胆汁淤积型肝损伤患者临床特征分析

目的探讨药物性胆汁淤积型肝损伤患者基本信息、临床特征、影像学表现及转归。方法回顾性分析近5年来的住院患者中诊断为药物性胆汁淤积型肝损伤的病例资料,记录其临床数据,至少随访6个月。结果共有105例药物性胆汁淤积型肝损伤患者,中位年龄55岁,男性占比54.3%,多无特异性临床症状。所涉及的药物近80余种,前3位依次为中药(34.3%)、抗肿瘤药(22.9%)、抗生素(10.5%)。49例行磁共振胰胆管成像患者中,有7例(14.3%)患者存在硬化性胆管炎样改变。105例患者中治愈53例(50.5%),好转41例(39.0%),未愈7例(6.7%),死亡4例(3.8%),总有效率为89.5%。结论药物性胆汁淤积型肝损伤主要发生于老年患者,涉及药物种类较多,以中药最为多见。药物还可引起类似于硬化性胆管炎样改变,因此应将药物性胆汁淤积型肝损伤作为胆汁淤积和胆管造影异常患者的鉴别诊断之一。基础肝病对患者预后无影响。二元Logistic逐步回归分析示:Roussel Uclaf因果关系评价法(RUCAM)评分低、血红蛋白水平低、住院时间短以及白细胞计数高是药物性胆汁淤积型肝损伤患者转归的独立危险因素。

护肝布祖热方对大鼠肝内胆汁淤积性肝损伤的影响及机制

目的研究护肝布祖热方(HBF)对大鼠肝内胆汁淤积性肝损伤的影响及潜在机制。方法将大鼠随机分为对照组(control组)、模型组(model组)、熊去氧胆酸(UDCA)组(阳性对照,60mg/kg)和HBF低、中、高剂量组(HBF-L、HBF-M、HBF-H组,0.4、0.8、1.6g/kg),每组6只。各药物组大鼠每天灌胃相应药液1次,连续7d;control组和model组大鼠灌胃等体积水。实验第5天,除control组外,其余各组大鼠均单次灌胃α-异硫氰酸萘酯橄榄油溶液(100 mg/kg)建模。造模48 h后,检测大鼠血清中肝功能指标(天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶、碱性磷酸酶、总胆汁酸、总胆红素、直接胆红素)含量和氧化应激指标[丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶]水平,观察肝组织病理形态变化,检测肝组织中炎症相关因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)]和法尼酯X受体(FXR)信号通路相关因子[FXR、小异源二聚体伴侣受体(SHP)、多药耐药蛋白2(MRP2)、胆盐输出泵转运蛋白(BSEP)、钠离子依赖性牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)、有机阴离子转运多肽2(OATP2)和胆固醇7α羟化酶(CYP7A1)]mRNA,以及FXR信号通路相关蛋白(FXR、MRP2、BSEP、NTCP)和核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白的表达情况。结果与model组比较,HBF-H组大鼠血清中上述肝功能指标含量和MDA水平,肝组织中上述炎症相关因子mRNA、CYP7A1 mRNA的表达水平以及NF-κBp65蛋白的相对表达量均显著降低,血清中GSH水平和肝组织中FXR、SHP、MRP2、BSEP、NTCP、OATP2mRNA的表达水平以及FXR、MRP2、BSEP、NTCP蛋白的相对表达量均显著升高(P<0.05或P<0.01),肝组织病理改变明显好转;HBF-L组、HBF-M组、UDCA组大鼠均只有部分指标显著逆转(P<0.05或P<0.01)。结论HBF可预防大鼠肝内胆汁淤积性肝损伤,此作用可能与激活FXR信号通路、减轻炎症和氧化应激有关。

黄秦艽对ANIT诱导的小鼠胆汁淤积性肝损伤保护研究

为了探讨黄秦艽水提物(WVBF)对ANIT诱导的小鼠胆汁淤积性肝损伤保护作用及机制研究,将雄性C57BL/6小鼠50只随机分为5组,即正常组(NC)、模型组(MC)、阳性对照熊去氧胆酸组(UDCA 45 mg/kg)、WVBF低剂量组(WVBF 25 mg/kg)和WVBF高剂量组(WVBF 50 mg/kg).灌胃给予WVBF,连续10 d,在第7天用ANIT油溶液(75 mg/kg)一次性灌胃造模,采集血液和肝脏样品测定血生化、肝脏病理以及FXR/SHP通路相关基因水平.结果显示:与模型组相比,WVBF给药组小鼠肝脏坏死情况明显好转,炎性细胞浸润减少,血清中ALT、AST、TBA、T-Bil-V和D-Bil-V明显下降,肝脏中Fxr、Shp、Mpr2和Bsep mRNA的水平显著上调,WVBF(50 mg/kg)组Ntcp的mRNA水平显著下调(P<0.05).这表明黄秦艽对ANIT诱导的小鼠胆汁淤积性肝损伤具有保护作用,其机制可能与调节胆汁酸的合成、分泌、转运和重吸收有关.

妊娠期肝内胆汁淤积症孕妇血清PAF、ESM-1和 TGF-β_(1)水平与新生儿急性肺损伤的关系

目的 评价妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)孕妇血清血小板活化因子(PAF)、内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)和转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))水平与新生儿急性肺损伤(ALI)的关系。方法 选择2020年1月至2022年1月在该院诊断为ICP的孕妇128例作为ICP组,选择同期在该院产检的正常孕妇45例作为对照组。比较ICP组和对照组血清PAF、ESM-1和TGF-β_(1)水平;比较血清PAF、ESM-1和TGF-β_(1)在不同严重程度ICP患者及生产不同严重程度ALI新生儿的ICP患者中的水平;分析血清PAF、ESM-1和TGF-β_(1)诊断ICP患者生产的新生儿发生ALI的效能。结果 ICP组血清PAF、ESM-1和TGF-β_(1)水平明显高于对照组(P<0.01);ICP患者重度组血清PAF、ESM-1和TGF-β_(1)水平明显高于轻度组(P<0.01);ALI组ICP患者血清PAF、ESM-1和TGF-β_(1)水平明显高于无ALI组(P<0.01),且RDS组ICP患者血清PAF、ESM-1和TGF-β_(1)水平明显高于TTPN组(P<0.01)。血清PAF、ESM-1和TGF-β_(1)联合检测诊断ICP患者生产的新生儿发生ALI的灵敏度为80.6%,特异度为100.0%,AUC为0.965,AUC明显高于PAF、ESM-1、TGF-β_(1)单项检测(P<0.05);而PAF、ESM-1、TGF-β_(1)单项检测诊断ICP患者生产的新生儿发生ALI的AUC之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 血清PAF、ESM-1和TGF-β_(1)可能是判断ICP严重程度的指标,参与了ALI的发生、发展,PAF、ESM-1和TGF-β_(1)联合检测有助于提高对ICP患者生产的新生儿发生ALI的诊断效能。

黄肝煎液对胆汁淤积性肝损伤大鼠的保护作用及急性毒性研究

目的:观察医院制剂黄肝煎液对胆汁淤积性肝损伤的保护作用及急性毒性。方法:将72只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组和黄肝煎液低、中、高剂量组,每组12只,均连续灌胃给予相应药物14天,每天2次。除正常对照组外,其它各组均于给药第12天灌胃给予α-萘异硫氰酸酯(ANIT)建立胆汁淤积性肝损伤大鼠模型。采用全自动生化分析仪检测大鼠血清肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、羟脯氨酸(Hyp),血清黄疸指数总胆汁酸(TBA)及总胆红素(TBIL)水平;测定各组大鼠胆汁流量并计算肝脏指数;采用HE染色检测肝组织病理变化。急性毒性试验研究中,40只KM小鼠随机分为对照组和黄肝煎液组,黄肝煎液组以最大给药剂量灌胃给予黄肝煎液,对照组灌胃给予等量生理盐水。观察给药后14 d内小鼠的急性毒性反应,并测定血清ALT、AST、ALP、肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)、白蛋白(ALB)水平,计算脏器指数,评价黄肝煎液的急性毒性。结果:与模型组比较,黄肝煎液能够显著降低大鼠血清肝功能指标(ALT、AST、ALP和Hyp)及黄疸指数(TBIL和TBA),明显减小肝脏系数,增加胆汁流量,差异具有统计学意义(P<0.01),肝组织病理学改变显著改善。急性毒性试验中,以最大给药浓度1.63 g·mL^(-1),最大给药体积40 mL·kg^(-1)灌胃小鼠,24 h内给予黄肝煎液3次,最大日给药量为195.6 g·kg^(-1)(相当于临床成人日用剂量的80倍)时,除部分小鼠体质量降低、稀便软便外,其余小鼠均未出现死亡和明显的急性毒性反应。结论:黄肝煎液对ANIT诱导的大鼠胆汁淤积性肝损伤具有一定的保护作用,且无明显急性毒性反应。

梗阻性黄疸术后肝内胆汁淤积发生机制的实验研究

目的探讨大鼠梗阻性黄疸术后肝内胆汁淤积的发生机制。方法建立大鼠胆道梗阻及再通模型,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、间接胆红素(IBIL)、总胆红素(TBIL)水平;检测肝组织丙二醛(MDA)的含量;光镜观察肝组织病理学改变;采用RT-PCR及Western blot方法检测尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶1A1(UGT1A1)基因及蛋白的表达。结果胆道梗阻后,血清中ALT、AST、GGTI、BIL和TBIL水平及肝组织MDA含量明显升高;肝细胞水肿,炎细胞浸润,胆管上皮及结缔组织增生,假小叶逐渐形成;肝组织UGT1A1基因及蛋白的表达明显下降。胆道梗阻14 d再通后以上变化逐渐恢复,再通7 d后已接近正常。胆道梗阻28 d再通后以上变化恢复速度明显变慢,再通7 d后与对照组相比,仍有显著差异。结论随着胆道梗阻时间的延长,肝组织UGT1A1的表达明显下降;胆道再通后,UGT1A1的表达恢复缓慢。这可能是大鼠梗阻性黄疸术后肝内胆汁淤积发生的主要机制之一。

腺苷蛋氨酸联合复方赶黄草方治疗胆道梗阻所致胆汁淤积性肝损伤的疗效分析

目的:探讨腺苷蛋氨酸联合复方赶黄草方治疗胆道梗阻所致胆汁淤积性肝损伤的临床疗效。方法:选取2018年10月—2019年4月在我院收治的胆道梗阻所致胆汁淤积性肝损伤的患者70例,根据随机数字表法将患者分为对照组和观察组,每组患者35例。其中对照组患者使用丁二磺酸腺苷蛋氨酸肠溶片,观察组患者额外联合复方赶黄草方汤剂,比较两组的疗效、肝功能以及炎性因子的水平。结果:治疗后,两组患者血清中的直接胆红素(DBIL)、总胆固醇(CHOL)、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、间接胆红素(IBIL)水平均显著降低(P<0.05),且观察组优于对照组;两组患者白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)表达水平均显著降低(P<0.01),同时观察组下降水平较对照组更加明显(P<0.05),而两组患者血清IgA、IgE、Ca2+水平与治疗前比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:腺苷蛋氨酸联合复方赶黄草方可以有效缓解胆道梗阻所致胆汁淤积性肝损伤临床症状,能够改善患者肝功能并降低炎症反应水平。