稻区杂草上的梨孢菌与稻瘟病发生的关系

从水稻和稻田周围常见的１０种杂草上来集梨孢属菌株，以涂沫法作交互接种，分离自牛筋草、狗尾草、法氏狗尾草、李氏禾、罗氏草、铺地黍、稗和马唐的梨孢菌与分离自水稻的梨孢菌可以交叉侵染其寄主，茭白和碎米莎草梨孢菌与稻梨孢菌不能交互侵染；自然诱发条件下来自牛筋草和狗尾草的梨孢菌与来自水稻的梨孢菌对其寄主同样发生交叉侵染。直接从杂草寄主上分离的梨孢菌株对水稻的致病性较弱，接种到水稻感病品种发病后再分离的菌株，对水稻致病性增强，对原寄主的致病性基本保持不变。推断稻瘟病区稻田周围牛筋草、狗尾草、法氏狗尾草、李氏禾、罗氏草、铺地黍、稗和马唐等杂草寄主上的梨孢菌在稻瘟病菌的积累和传播方面具有作用。

灰梨孢菌产孢培养基筛选

【目的】筛选操作方法简便、产孢效果好、适宜于大多数灰梨孢菌的产孢培养基,为灰梨孢菌研究提供一定的技术支持。【方法】从水稻、香蕉和杂草马唐上分离获得6个灰梨孢菌菌株,接种于紫花鸭趾草、高粱粒和大麦粒等9种培养基上,测定不同培养基对灰梨孢菌产孢量的影响,并比较分析紫花鸭趾草培养基对病菌致病力的影响。【结果】高粱粒、大麦粒和紫花鸭趾草培养基对6个菌株孢子形成均有明显的促进作用,以紫花鸭趾草培养基的促进作用最明显。与常用的高粱粒培养基相比,6个菌株在紫花鸭趾草培养基上形成的病菌分生孢子对香蕉和水稻的致病力没有明显差异。在4℃冰箱中,用紫花鸭趾草培养基保存蕉瘟病和稻瘟病菌菌种,两年后病菌仍具有生活力。【结论】紫花鸭趾草培养基是适宜于灰梨孢菌分生孢子形成的理想培养基,紫花鸭趾草培养基也适合于保存灰梨孢菌。

无毒基因在不同寄主梨孢菌中的变异研究

梨孢菌除侵染水稻外,还可侵染禾本科和莎草科等多种植物,已有研究表明稻区草类寄主的梨孢菌与稻瘟病的发生有关。无毒基因在水稻—稻瘟病菌互作系统中扮演了重要角色,并且无毒基因经常发生变异,可以利用无毒基因变异的特性来研究梨孢菌群体的遗传多样性。对35株草类寄主的梨孢菌进行系统进化分析,这些菌株被分为两类,一类是寄主为马唐的菌株,另一类是寄主为牛筋草和狗尾草的菌株。筛选了27对无毒基因引物,对这些草类寄主梨孢菌进行扩增,结果表明无毒基因在这些菌株中的变异类型有完全缺失、插入、不完全缺失、多位点,其中完全缺失为主要的变异类型。进一步对无毒基因的扩出率进行统计,结果表明,供试菌株中没有菌株同时含有所有已克隆的无毒基因,此外,所有供试菌株均没有AVR-Pik/km/kp,PWL3和PWL4基因,以马唐为寄主的菌株中没有ACE1,AVRPiz-t,AVR-Pita1和PWL1;以牛筋草为寄主的菌株中没有AVR-Pia,AVR-Pita1,AVR-Pita2和PWL2;以狗尾草为寄主的菌株中没有AVR-Pii,AVR-Pia,PWL1和PWL2。

几种寄主植物上分离的梨孢菌研究——云南省稻瘟病菌有性世代研究之四

为了解稻瘟病菌的寄主范围和有性世代形成生境,笔者研究了云南省内采集的马唐、蟋蟀草、龙爪稷及水稻上分离的Pyricularia菌作了分生孢子大小的比较、交互感染接种试验及有性世代形成状况的研究,结果表明:这几种寄主植物的分离菌应属同一个种,它们无性阶段的分生孢子形态十分一致,除马唐菌原外,它们可以相互交配,产生子囊孢子,但致病性有差异;蟋蟀草分离菌与龙爪稷分离菌可以交互感染,但对水稻、马唐无致病性;水稻、马唐分离菌仅能使分离寄主发病。文章还对该种菌的学名作了讨论,建议我国使用Pyricularia grisea(Cooke)Saccardo作为稻瘟病菌无性时期的学名,有性时期学名使用Magnaporthe grisea(Hebert)Barr comb.nov.

杂草和水稻梨孢菌亲缘关系研究

利用12个引物的随机扩增多态性DNA标记(RAPD)对来自18种寄主的49个梨孢菌株进行了亲缘关系分析,从DNA电泳谱带中可以直观地看出,来自同一种或同一属或亲缘关系相近寄主上的梨孢菌带型较相似,相反,亲缘关系较远的寄主上的梨孢菌带型差异较大,茭白、碎米莎草和马唐寄主上的梨孢菌的谱带均非常特异,与牛筋草和狗尾草等其他15种寄主的梨孢菌有较大差异,牛筋草和狗尾草等15种寄主的梨孢菌存在比较多的共有谱带。对引物S380扩增的RAPD谱带进行聚类分析表明,18种寄主上的49个梨孢菌株可分为5个类群。种与种之间的DNA(RAPD谱带)电泳谱带差异非常明显,而种内品种间的带型差异比较小。

康宁木霉对稻梨孢菌生防效果研究

研究了康宁木霉(Trichoderma koningii)对稻瘟病菌的生防效果,并对发酵配方及发酵条件进行了优化。结果表明:最适发酵培养基配方为500 mL水中含麸皮10.0 g,玉米芯粉15.0 g,硫酸铵1.0 g,磷酸二氢钾1.0 g,氯化钙0.15 g,硫酸镁0.25 g。最适发酵条件:初始pH值5.5,每250 mL三角瓶加培养基60 mL,发酵温度29℃,发酵时间8 d。在此最适的发酵条件下,其相对抑菌率达75.5%。

油菜素内酯对稻梨孢菌的抑菌活性

为有效抑制稻梨孢菌对水稻的侵染,以2株稻梨孢菌37631、37661为供试菌株,采用生长速率测定法对5种植物生长调节剂(油菜素内酯、生长素、细胞分裂素、赤霉素和脱落酸)进行了抑菌活性测定,并研究了油菜素内酯对稻梨孢菌菌丝体干质量和孢子萌发的影响。结果显示,油菜素内酯对稻梨孢菌菌丝延伸具有明显的抑制作用,当浓度达到5μmol/L时,其对2个菌株的菌丝延伸抑制率分别为58.18%和53.37%,半数效应浓度(EC_(50))分别为3.7μmol/L和5.2μmol/L;同时,油菜素内酯处理可在一定程度上改变菌落形态。其他4种植物生长调节剂对稻梨孢菌菌丝延伸没有明显的抑制作用。菌丝干质量测定结果显示,油菜素内酯能明显抑制稻梨孢菌的生长,在2μmol/L处理情况下,培养至第8天时2株稻梨孢菌菌丝干质量与对照(0μmol/L处理)相比分别减少了52.60%和48.44%。通过对稻梨孢菌孢子萌发的研究发现,油菜素内酯对稻梨孢菌的孢子萌发也具有明显的抑制作用,当浓度达到5μmol/L时,其对2个菌株的孢子萌发抑制率分别为53.25%和49.34%,EC_(50)值分别为4.31μmol/L和6.42μmol/L。综上,油菜素内酯对稻梨孢菌的菌丝延伸、菌丝干质量及孢子萌发都有明显影响。

稻梨孢菌与其他寄主梨孢菌在水稻植株上的交互作用

作者研究了1个稻梨孢菌株与4个稻以外寄主梨孢菌株在混合接种和间隔接种条件下,在水稻植株上的交互作用。结果表明:弱致病菌与强致病菌间交互作用较强,非致病菌与强致病菌间较弱。弱致病菌可明显降低强致病菌的致病性,非致病菌对强致病菌的作用,多数组合表现为减轻病害,但有少数组合表现为促进发病。弱致病菌先接种;2天后接种强致病菌,比两者混合接种具有更强烈的互作效应,病斑数减少达35.7％—38.1％。先接种菌的孢子浓度对后接种菌的致病性也有影响。

梨孢属（Pyricularia）真菌的产孢研究

试验了１１种寄主梨孢菌在１５种培养基上的产孢差异，其中以大麦粒和高梁粒培养基产孢为优，适合水稻、狗尾草、粟、稗、牛筋草、茭白和碎米莎草等寄主梨孢菌的产孢培养；不同寄主梨孢菌在供试培养基上的产孢能力有较大差异，稻梨孢菌的产孢能力强，其次为牛筋草、稗、茭白和碎米莎草梨孢菌，马唐、毛马唐、李氏禾和罗氏草梨孢菌的产孢能力极差，在参试的１５种培养基上产孢均甚少，产孢差的菌株在蓝黑光灯，黑光灯和日光灯下照射可提高产孢量；培养皿敞开光照比覆盖光照有利于孢子的形成，光照培养时间对产孢也有影响。马唐、牛筋草、狗尾草梨孢菌接种到水稻感病品种原丰早上发病后再分离的菌株，产孢能力明显提高。

河南省首次发现梨孢镰刀菌引起的小麦赤霉病

2015年从河南省田间小麦赤霉病病穗上分离得到一种生长速度较慢的镰刀菌,通过形态学和分子鉴定明确其分类地位,通过田间单小花滴注法和喷雾法接种测定其致病力,并通过高效液相色谱串联质谱分析对麦穗中的毒素种类进行测定,明确其产毒特征。结果表明:分离得到的8个菌株均为梨孢镰刀菌,在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上为白色菌落,菌落底部产生少量红色色素,平均生长速度为13.3 mm/d;小型分生孢子为椭球形葡萄状,平均大小为7.1μm×5.8μm,未见大型分生孢子和厚垣孢子;致病力弱,且不侵染穗轴,单小花滴注法接种条件下平均病级为0.1,喷雾法接种条件下平均病小穗率为6.5%;供试的8个镰刀菌菌株均不产生T-2和HT-2毒素,均产生雪腐镰刀菌烯醇(NIV)毒素,NIV毒素含量水平为371.74~5282.80μg/kg,其中3个菌株产生少量脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)毒素(86.13~227.22μg/kg)。

梨孢镰刀菌对麦芽挥发性风味物质的影响

采用固相微萃取-气质联用技术(SPEM/GC-MS)分析鉴定了梨孢镰刀菌在不同培养时期自身所产生的嗅感物质的构成。研究发现:不同培养阶段,梨孢镰刀菌所产生的的挥发性物质不同,都由挥发性醛、醇、酮、酸以及芳香族化合物所构成,同时,原料大麦和成品麦芽的挥发性风味物质构成具有很高的相似度。然而,其对麦芽风味的影响主要体现在对麦芽嗅感风味物质含量的影响上,没有产生新的风味代谢物质。梨饱镰刀菌对麦芽风味的构成以及形成都会产生一定的影响。

不同生育期追施印度梨形孢菌对油菜渍害预防效果的影响

研究了不同生育期对油菜(Brassica campestris L.)追施印度梨形孢菌(Pirformaspore indica)对渍害的预防和补救作用。试验设5个处理,A为渍前苗期施加印度梨形孢菌;B为渍前初花期施入印度梨形孢菌;C为渍后结荚期施入印度梨形孢菌;D为渍水不施加印度梨形孢菌(CK),以上各处理均在油菜盛花期进行15 d渍水处理,E为不加印度梨形孢且不渍水的正常管理组。结果表明,在作物的不同生育期追施印度梨形孢菌对渍害油菜产量的恢复和抗渍性具有显著影响,以渍后结荚期追施印度梨形孢菌的效果最佳,产量为137.9 kg/667 m2,较正常管理组减产22.3%,较CK组弥补产量损失101.9%,每667 m2约增收556.8元。

引起梨叶斑的菌绒孢属一新种(英文)

寄生在梨叶上引起梨叶枯病的菌绒孢属一新种：梨生菌绒孢Mycovellosiellapyricola.研究的标本保存在中国科学院微生物研究所菌物标本馆（HMAS）。

红外-核磁共振光谱-免疫亲和柱法解析梨孢镰孢菌代谢产物成分

利用红外光谱,核磁共振光谱结合免疫亲和柱的方法解析梨孢镰孢菌代谢产物成分,为真菌代谢产物的分析提供新的信息。将F.poae菌株在GYM培养基上25℃条件下培养12 h后转至8℃培养12 h,交替进行4周,将其代谢产物分离纯化、结晶,80℃干燥后用红外光谱仪分析产物结构,然后利用免疫亲和柱特异性,比较产物经T-2免疫亲和柱纯化前后的1H核磁谱图。由红外谱图可判断目标组分存在与单端孢霉烯族毒素相同的特征官能团,初步判定产物为单端孢霉烯族毒素。通过1H核磁谱图比较T-2免疫亲和柱纯化前后物质结构一致。梨孢镰孢菌代谢产物成分为T-2毒素。红外-核磁共振光谱结合免疫亲和柱的方法解析梨孢镰孢菌代谢产物的方法在国内外尚未见报道。

一株梨孢镰刀菌的分离与鉴定及其生长特性研究

从大麦表面分离出一株引起啤酒喷涌的镰刀菌,根据菌株在PDA上的菌落特征、菌丝和孢子形态,以及26s rDNA序列,鉴定为Fusarium poae(AY188915.1)。该菌的最适生长温度为25℃,最适pH为6,最适转速为200r/min,制麦条件适合该菌生长。

梨孢镰刀菌培养物提取后残渣对大鼠前胃致瘤作用的研究

本研究用梨孢镰刀菌培养物经70％乙醇、乙醚及生理盐水提取后的残渣,混以玉米面饲喂大鼠。对照组喂单纯玉米面,实验432天。实验组67.6％的动物前胃肉眼上出现粘膜粗糙、圆盘状病变或乳头状瘤。光镜下有73.5％的动物前胃出现癌前病变。对照组动物前胃均无明显变化。说明培养物虽经多次提取,其残渣仍有致瘤作用。

梨黑斑链格孢菌次生代谢产物的分离鉴定及毒素含量分析

通过分离鉴定梨黑斑链格孢菌次生代谢产物,比较分析梨链格孢菌利用库尔勒香梨、苹果、西红柿、马铃薯、大米、燕麦等不同营养基质后的毒素含量。采用硅胶柱色谱、制备高效液相色谱、1D&2D NMR技术等方法,分离鉴定梨黑斑链格孢菌次生代谢产物,高效液相色谱法分析毒素含量。从梨链格孢菌中分离鉴定了6个次生代谢产物,分别为交链孢烯(1)、链格苝醇(2)、交链格孢酚(3)、交链格孢酚单甲醚(4)、土曲霉酮(5)和7-氨基-1,3-二羟基-苯丙酮(6);发现梨链格孢菌利用不同营养基质所产生物毒素(化合物1-4)结构种类相同,但含量存在显著差异。对梨链格孢菌生物毒素成分进行了定性定量分析,明确了毒素成分的主要结构,揭示了该菌利用不同营养基质所产生物毒素含量差异的特点。

梨孢镰刀菌的PCR体系检测与优化

本文建立了梨孢镰刀菌的PCR检测方法，并对PCR体系中反应条件进行了优化：引物检测梨孢镰刀菌的最适退火温度为52℃；Taq DNA酶的最适用量为0.4μl；最适Mg2＋离子浓度为2.0mM；最适循环数为30次循环；；微管蛋白基因引物具有良好的特异性；梨孢梨孢镰刀菌DNA的最低检测限为417pg，表现出良好的灵敏性。

海南省部分水稻品种对稻瘟病菌22个株系的抗瘟性鉴定

为有效利用抗瘟品种控制稻瘟病的大发生,掌握水稻品种的抗瘟性。本研究采用五叶期水稻离体叶片研究了36个水稻品种对22个株系稻瘟病菌的抗性,有21个水稻品种表现抗病,其它15个品种感病。在此基础上对其中有代表性的4个水稻品种进行了抗瘟生化机制的初步研究。生化测定结果表明,接种RB22菌株后,各抗感品种中各种生化因子大部分具有明显差异,且具有一定的规律性。该结果对于培育新的抗瘟水稻品种、布局水稻不同抗瘟基因型品种和治理稻瘟病的流行具有一定意义。

狗尾草叶瘟病病原的分子鉴定及其对14种杀菌剂的敏感性测定

研究狗尾草叶瘟病的病原,并筛选对该病原菌具有较高活性的杀菌剂,对进一步认识该病害及指导其化学防治具有重要意义。采用rDNA-ITS通用引物PCR扩增的分子检测方法,对狗尾草叶瘟病病原进行了鉴定;并采用室内生长速率法,测定了14种杀菌剂对该病原菌的毒力。结果表明:该狗尾草叶瘟病病原菌为Pyricularia oryzae。该病原菌已对多菌灵产生了较低水平的抗药性,EC50为3.2196μg/mL;对其他13种杀菌剂均具有较高的敏感性,EC50为0.0067~0.6559μg/mL,抑菌活性顺序为嘧菌环胺>咯菌腈>咪鲜胺>氟碇胺>戊唑醇>吡唑醚菌酯>苯醚甲环唑>醚菌酯>腐霉利>氟吡菌酰胺>嘧菌酯>啶酰菌胺>菌核净。除多菌灵外,其他13种杀菌剂均可以作为由P.oryzae引起的狗尾草叶瘟病化学防治的候选药剂。