梨形马勃产胞外多糖发酵条件的响应面设计法优化

为优化梨形马勃产胞外多糖的培养基组成,运用响应面设计法对梨形马勃产胞外多糖的发酵条件进行优化研究.首先利用Minitab 16.0分析软件的Plackett-Burman设计模块对影响胞外多糖产量的培养基组分进行设计筛选,进一步结合单因素实验结果确定筛选出具有显著效应的3个因素:麦芽糖、维生素B1(VB1)和谷氨酸;然后通过该软件中的Box-Behnken实验设计模块对此3个因素进行优化,并对实验数据进行分析统计优化,结合基本培养基中其他成分含量而得到最高胞外多糖的最佳培养基组成:麦芽糖6.11%,谷氨酸0.70%,VB12.8×10-4%,酵母粉0.50%,KH2PO40.15%,MgSO4爛7H2O 0.10%,初始pH值5.5.在此优化培养条件下进行验证实验,得到梨形马勃胞外多糖产量为(3.71±0.16)g/L,比采用基本培养基的多糖产量增加了4.6倍.

基于ITS序列分析对药用真菌梨形马勃的分子鉴定

此次研究对来自野外的一株马勃类真菌子实体为未知样品,形态学鉴定为梨形马勃。利用ITS序列进行DNA分子鉴定。方法:PCR扩增得到ITS序列并且通过DNAMAN软件对序列进行修剪得到ITS2序列。运用BLAST分别对ITS序列,ITS2序列进行检索比对。分别对ITS序列与ITS2序列构建系统聚类NJ 树。结果:样品ITS序列Genbank注册号为KU145409。结论:ITS与ITS2序列均可鉴定此菌株为梨形马勃Lycoperdon pyriforme,隶属于马勃科马勃属真菌。本次研究验证了ITS序列具有鉴别马勃科真菌的能力。同时,我们初步发现ITS2有将样品与其他马勃科马勃属真菌区别开的能力可快速鉴别样品。

药用真菌梨形马勃的生药学研究

目的对梨形马勃进行生药学研究,为其开发应用提供依据。方法采集梨形马勃子实体,进行基原鉴别、性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别,结合文献资料确定其为梨形马勃Lycoperdon pyriforme Schaeff.。利用薄层色谱法建立梨形马勃专属性的薄层鉴别特征,利用高效液相色谱法测定其化学成分含量。结果薄层鉴别研究发现梨形马勃具有多个专属性的薄层色谱斑点,并含有麦角甾醇,麦角甾酮。高效液相色谱法测定其麦角甾醇含量为1.02mg/g、麦角甾酮含量为68.5μg/g。结论通过梨形马勃性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别、薄层鉴别,可综合鉴别梨形马勃的真伪,为其鉴别提供了参考依据。麦角甾醇和麦角甾酮含量可作为其质量控制的重要指标,也为今后梨形马勃开发利用提供科学依据。