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题名梨皱果类病毒的RTP-CR分析及鉴定
被引量:2
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作者
施圆圆
夏立秋
刘萍
杨希才
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机构
湖南师范大学生命科学学院
中国科学院微生物研究所
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出处
《生命科学研究》
CAS
CSCD
2006年第S2期85-91,共7页
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文摘
类病毒是由247~600个核苷酸组成的单链、共价闭合环状RNA,无蛋白质外壳.采用酚-氯仿抽提法提取梨中类病毒的粗核酸,再用DEAE纤维素过柱纯化;通过往返电泳检测,对比ASSVd,可知梨类病毒基因长度在328bp左右.设计引物,RTP-CR扩增此类病毒,除去所得PCR产物中的酶蛋白、单核苷酸等,再转化大肠杆菌DH5α;挑取阳性转化子,用碱性裂解法小量提取转化子质粒DNA;进行EcoRⅠ和HaeШ酶切鉴定,结果与预期的梨皱果类病毒基因大小一致.
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关键词
梨皱果类病毒
往返电泳
RTP-CR
克隆
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Keywords
pear crinkled skin viroid
round electrophoresis
RT-PCR
clone
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分类号
Q939.4
[生物学—微生物学]
S432.41
[农业科学—植物病理学]
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