棉籽肽制备工艺的初步研究

本文以水解度和DPPH·清除能力作为评价指标,采用单因素试验和响应面法优化棉籽肽制备工艺。结果表明,最佳工艺条件为酶解温度53.5℃,液料比18,酶解时间4 h。对最佳工艺进行验证,棉籽蛋白的水解度为22.7%,质量浓度为1.23 mg/mL的棉籽肽DPPH·清除能力为85.12%。

制备抗氧化棉籽肽用蛋白酶的筛选

本实验研究了由Alcalase碱性蛋白酶、Flavourzyme风味蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、无锡2709碱性蛋白酶、无锡精制中性蛋白酶等蛋白酶水解棉籽蛋白的水解度及水解液抗氧化活性的大小。结果表明,Alcalase碱性蛋白酶水解能力最大,水解液清除自由基的能力也最大,实际生产中为了去除多肽的苦味物质,应先用Alcalase碱性蛋白酶水解,再用Flavourzyme风味酶作用。

棉籽肽的制备工艺、抗氧化活性及部分特性研究

以水解度(DH)及DPPH·清除率为考察指标,利用单因素实验和正交实验探讨碱性蛋白酶酶解棉籽蛋白制备棉籽肽的最佳工艺条件。以VC为对照研究了棉籽肽的总还原力、对·OH及O-2·的清除作用及部分特性。结果表明,棉籽肽的最佳制备条件为:反应时间180 min,p H 9.5,温度55℃,底物质量浓度3.00 mg/m L,碱性蛋白酶加酶量50 U/m L。在最佳条件下,棉籽肽的DPPH·清除率为63.42%,DH为85.90%。棉籽肽的·OH及O-2·清除率均随其质量浓度增大而增强,半数抑制浓度(IC50)分别为0.044 mg/m L和0.046 mg/m L,且均强于VC。棉籽肽总还原力与其质量浓度呈剂量依赖关系,稍弱于VC。棉籽肽等电点约为p H 2,不同p H下,棉籽肽的·OH清除率均在60 min时达到最大,但在不同温度下,棉籽肽·OH清除率随时间变化不大,60℃时达到最大值。

富含棉籽肽发酵棉粕对AA肉鸡生长性能和免疫功能的影响

试验旨在研究富含棉籽肽的发酵棉粕(枯草芽孢杆菌-1和扣囊复膜酵母Su 2019混菌发酵)对AA肉鸡生长性能和免疫功能的影响。试验选取240羽1日龄健康的AA肉鸡母雏,根据体重相近原则分为4组,对照组(CK,添加6%棉粕),试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(分别添加4%、6%、8%富含棉籽肽发酵棉粕),每组4个重复,每个重复15羽鸡。试验分为1~21和22~42日龄两个阶段,试验期42 d。每个阶段结束时,对肉鸡称重,采集血液样本,测定每个阶段肉鸡的生长性能和免疫功能指标。结果表明:①与CK相比,Ⅱ组肉鸡21 d平均日增重(ADG)极显著提高(P<0.01),且显著高于Ⅰ组(P<0.05);Ⅲ组肉鸡42 d平均日采食量(ADFI)显著提高(P<0.05),且极显著高于Ⅱ组(P<0.01);②与CK相比,Ⅲ组肉鸡21 d胸腺指数显著增加(P<0.05),且其42 d胸腺指数显著高于Ⅰ组(P<0.05);Ⅱ组42 d法氏囊指数极显著提高(P<0.01);③Ⅲ组肉鸡21 d吞噬指数显著高于其他处理组(P<0.05);试验Ⅰ、Ⅱ组42 d吞噬指数均显著高于CK(P<0.05);④Ⅲ组肉鸡21 d的IL-2、IL-1β含量显著高于CK和Ⅰ组(P<0.05),IL-6含量极显著高于CK(P<0.01);与CK相比,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组42 d的IL-2含量均显著提高(P<0.05),Ⅲ组IL-1β极显著提高,而IL-6含量极显著降低(P<0.01),Ⅰ、Ⅲ组TNF-α含量极显著提高(P<0.01);⑤与CK相比,试验Ⅲ组肉鸡21 d的IgM、IgA含量极显著提高(P<0.01),Ⅰ组IgG含量极显著高于其他组(P<0.01);Ⅱ组42 d的IgM和IgA含量均极显著提高(P<0.01)。综上所述,肉鸡日粮中添加一定比例的富含棉籽肽的发酵棉粕,可以提高肉鸡的生长性能和免疫功能。

膜技术在制备棉籽蛋白多肽中的应用研究

采用微滤膜对棉籽蛋白酶解液进行除杂,首先根据膜通量及蛋白透过率选定合适的微滤膜,再考察了操作压力和温度对选定微滤膜通量的影响。结果表明:膜孔径为100nm的微滤膜较30nm微滤膜更适合本物料体系。且随着分离时间的延长,膜通量逐渐减小,至20min^30min后,膜通量趋于稳定;膜通量与压力和温度在一定范围内呈正相关。

棉籽多肽缓解体力疲劳的研究

为了开发利用棉籽多肽资源,研究了棉籽多肽缓解体力疲劳活性。对小鼠体重、负重游泳时间、血乳酸含量、血清尿素氮、肝糖原、超氧化物歧化酶含量及丙二醛含量进行了测定。结果表明:棉籽多肽能延长小鼠的负重游泳时间,提高小鼠体内超氧化物歧化酶(SOD)的活性,降低小鼠体内丙二醛(MDA)的含量,提高小鼠肝糖原的储备量,降低小鼠运动后血清尿素氮和血乳酸水平,说明棉籽多肽具有较好的缓解体力疲劳效果。

棉籽多肽的制备及其自由基清除能力研究

以碱溶酸沉法提取的棉籽蛋白为原料,分别用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶对其进行水解,比较4种蛋白酶水解棉籽蛋白的水解度及棉籽多肽自由基清除能力。结果表明:中性蛋白酶水解所得棉籽多肽自由基清除能力较强。在单因素试验基础上,采用正交优化试验,得到中性蛋白酶水解制备棉籽多肽最佳条件为:水解时间5 h,水解温度45℃,pH 7.5,加酶量8 000U(100 mL 5%棉籽蛋白溶液)。在最佳条件下棉籽蛋白的水解度为11.23%,制备的棉籽多肽对超氧阴离子自由基清除率为72.48%,对羟自由基清除率为89.01%,其10倍稀释液对DPPH自由基清除率为84.67%,与0.5 mg/mL VC的自由基清除能力相当。

枯草芽孢杆菌、酿酒酵母及其复合菌发酵棉粕营养成分变化的研究

试验旨在研究枯草芽孢杆菌、酿酒酵母及其复合菌发酵棉粕的常规营养成分、棉籽肽含量及棉籽肽分子质量分布的变化。试验设4个组:对照组(未发酵组)、试验Ⅰ组(枯草芽孢杆菌-1)、试验Ⅱ组(酿酒酵母)及试验Ⅲ组(枯草芽孢杆菌-1和酿酒酵母复合发酵)。检测各组棉粕样品粗蛋白质(CP)、干物质(DM)、粗灰分(Ash)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、粗脂肪(EE)、钙(Ca)、磷(P)、棉籽肽含量和棉籽肽分子质量分布等指标。结果表明:①试验Ⅰ组DM、CP和Ash含量极显著高于其他处理组(P<0.01);对照组EE含量显著高于其他处理组(P<0.01);试验Ⅲ组ADF含量极显著低于其他处理组(P<0.01);3个试验组Ca和P含量较对照组均有所提高,其中试验Ⅲ组Ca和P含量显著高于对照组(P<0.05)。②各试验组之间游离氨基酸和总游离氨基酸含量差异均不显著(P>0.05),但与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组总游离氨基酸含量分别提高了134.02%、75.59%和75.44%;③各试验组酸溶蛋白质和棉籽肽含量均极显著高于对照组(P<0.01),其中试验Ⅰ组的酸溶蛋白质和棉籽肽含量最高;3个发酵试验组1000 u以下的棉籽肽峰面积百分比分别为89.41%、77.61%和84.58%。综合以上试验结果,在枯草芽孢杆菌、酿酒酵母及其复合菌的作用下,通过固态发酵能显著改善棉粕的营养价值,为棉粕资源的开发利用提供了理论依据。

Antioxidant Activity of Peptides Obtained from Cotton Ground Oil-Cake Proteins

Antioxidant activity of the peptides derived from proteins of defatted cottonseed kernels and cotton ground oil-cake by their enzymatic hydrolysis with acidic （Asp. niger） and neutral proteinases （Bac. amyloliquefaciens） was studied. Antioxidant activity of the derived peptides depended on the used proteins and enzymes. The peptides derived by using of neutral proteinase possessed higher antioxidant activity, in comparison with the peptides derived by acidic proteinases.