luxAB基因标记的K2116L菌株在棉花根际中的定殖

采用三亲本杂交法将发光酶luxAB基因转移进棉花根际促生菌芽胞杆菌K2116菌株中,获得标记菌株K2116L。标记菌株连续传代15次均未发生质粒丢失现象,表明标记菌株具有较好的遗传稳定性;K2116L菌株的生长及其释钾能力未受到标记质粒的影响。K2116L菌株在灭菌和非灭菌的黄褐土、黄潮土和红壤3种土壤中均能长期存活;在灭菌土壤中的数量稍高于非灭菌土壤;在3种土壤中的数量依次为:黄褐土>黄潮土>红壤;在不同土壤中,K2116L菌株具有与土著菌株进行空间和营养竞争的能力。采用根盒试验追踪标记菌株在棉花根部的定殖动态,棉花播种12d时标记菌株在0～2、2～4cm深度根际土壤定殖密度达到最大;18d时在4cm以下的深度达到最高水平。棉花播种18d时标记菌株在所有深度的根表均达到最高定殖水平,0～2cm根段定殖密度为1.76×106cfu.g-1,8cm以下根段达到1.6×105cfu.g-1。补充营养后,根际和根表标记的菌株数量均有明显上升。试验数据显示,随着根的生长标记菌株不断向根尖方向扩散。

棉花根对老年小鼠红细胞和脑内SOD活性及MDA含量的影响

采用自然衰老的小鼠,观察棉花根水煎剂对老年小鼠红细胞和脑内超氧化物歧化酶(SOD)活性和脂质过氧化物的代谢产物丙二醛(MDA)含量的影响。实验结果表明:棉花根可使老年小鼠红细胞和脑内MDA含量明显下降,SOD活性增高,SOD/MDA的比值显著升高。提示棉花根可抑制老年小鼠体内脂质过氧化物的生成,提高SOD活性,进而延缓机体,尤其是脑的衰老过程。

棉花根醇提物与水提物的止咳祛痰抗炎作用研究

制备棉花根醇提物和水提物,止咳实验采用小鼠浓氨水引咳法,祛痰实验采用气管酚红排泌法,抗炎实验采用二甲苯致耳肿胀法,观察棉花根醇提物和水提物的止咳祛痰抗炎作用。实验小鼠分正常对照组,醇提物与水提物高低剂量组及阳性药物对照组。结果发现棉花根醇提物、水提物均能延长小鼠的咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数,均能增加气管内的酚红排泌量,对二甲苯所致的耳肿胀均有显著的抑制作用。

一株棉花根际铁载体产生菌E19的分离鉴定

目的:从棉花根际细菌中筛选出铁载体产生能力较强的菌株并对其进行鉴定。方法:用梯度稀释法从棉花根际中分离出细菌,再通过在CAS检测平板上显色圈的大小从中筛选出铁载体产生能力较强的菌株,并对其进行生理生化鉴定和16S rDNA序列分析。结果:筛选出一株铁载体产生能力较强的菌株E19,13项生理生化指标除甲基红试验呈阳性外,其它均与恶臭假单胞菌相同。其16S rDNA与恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)的同源性为100%。

利用发光酶基因标记技术跟踪棉花根圈中的绿针假单胞菌PL9L

采用细菌转化和杂交的方法，成功地将全套发光酶基因标记系统Ｔｎ７ｌｕｘＣＤＡＢＥ引入绿针假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｃｈｌｏｒｏｒａｐｈｉｓ）ＰＬ９，得到稳定的发光标记菌ＰＬ９Ｌ。采用发光菌落平板计数法和Ｘ射线胶片自显影法，通过盆栽试验和盒裁试验，研究了发光标记菌ＰＬ９Ｌ在棉花根圈的定殖动态和分布规律。盆栽试验结果表明，在灭菌土盆栽中，播种后６ｄ左右ＰＬ９Ｌ在棉花根圈的定殖水平达最高（３１×１０９ｃｆｕ／ｇ根土），播种后５６ｄ左右趋向稳定，ＰＬ９Ｌ数量为１７×１０２ｃｆｕ／ｇ根土；未灭菌土盆载中，播种后８ｄ左右ＰＬ９Ｌ的定殖水平达最高（１１×１０９ｃｆｕ／ｇ根土），４６ｄ左右趋向稳定，菌数为１４×１０２ｃｆｕ／ｇ根土。盒栽试验结果表明，ＰＬ９Ｌ可从种子向根尖方向扩散，但并不与根的伸长生长同步，播种后３６ｄ，灭菌土盒栽中ＰＬ９Ｌ可扩散至种子下方１２０ｃｍ以内，而未灭菌土盒栽中ＰＬ９Ｌ扩散至１１０ｃｍ以内。在棉花根尖区域均未检测到ＰＬ９Ｌ。

棉花根际促生菌基因组DNA的提取及其鉴定

植物根际微生物基因组的提取往往因为细胞壁不能完全裂解以及内含物的成分和含量受到影响,获得完整的基因组DNA一直是土壤微生物分子生物学研究的关键。本文以新疆盐碱地棉花根际促生菌为材料,比较了SDS法、CTAB法以及高盐结合的CTAB法提取棉花根际促生菌基因组DNA的效率,结果显示,SDS法和CTAB法在细胞裂解后,由于过多的多糖类物质混于上清液中使其过于粘稠而无法分层,没能得到DNA样品。高盐结合的CTAB法则有效弥补了上述方法的不足,能够获得A260/A280为1.82、A260/A230为2.43的高质量基因组DNA。同时实验还以细菌16SrDNA为内标进行PCR扩增,结果证明所获得的棉花根际促生菌基因组DNA可直接用于PCR等分子生物学进一步研究。

超声波提取棉花根多糖的工艺研究

目的优选超声波提取棉花根多糖的条件,测定棉花根的多糖含量。方法采用正交实验方法,对超声提取的温度、提取时间、固液比和提取次数4个因素进行考察研究,以葡萄糖为标准品,用紫外分光光度法测定多糖含量。结果最佳提取条件为:固液比1∶14,提取时间30 min,提取次数3次,提取温度90℃。结论棉花根多糖的平均含量为1.477%。

纤维素酶法提取棉花根多糖的工艺优化

目的:优选纤维素酶法提取棉花根多糖的最佳工艺。方法:采用单因素实验和正交设计相结合的方法,对纤维素酶提取棉花根多糖的p H环境、提取时间、提取温度和酶用量4个因素进行考察研究,以葡萄糖为标准品,用浓硫酸-苯酚比色法测定多糖含量。结果:酶解p H5.8,酶解时间100min,酶解温度55℃,酶用量为1.4%是纤维素酶法提取棉花根多糖的最佳工艺,在此条件下,棉花根多糖提取率为15.552‰。结论:该方法重复性好、结果可靠,适宜用于棉花根多糖的提取。

棉花根心材与根皮的黄酮含量比较

目的优选超声提取棉花根总黄酮的条件,测定并比较棉花根心材和根皮的黄酮含量。方法采用单因素和正交实验相结合的方法,对超声提取的乙醇浓度、提取时间、提取温度和固液比4个因素进行考察研究,以芦丁为标准品,用紫外分光光度法测定黄酮含量。结果最佳提取条件为:乙醇浓度65%,提取时间90 min,提取温度70℃,固液比1∶12。棉花根心材和根皮的黄酮提取率分别为0.334 1%和0.703 3%。结论棉花根根皮的黄酮含量比心材的黄酮含量高。

新疆地区棉花根际拮抗菌的筛选与鉴定

从新疆地区棉花根际分离出4 028个细菌分离物,以棉花立枯病病原真菌立枯丝核菌(Rhizocto-nia solaniK櫣hn)为靶标菌,通过平板对峙法,获得48个具有拮抗性能的分离物,其中MK48、MK49、MK50及MK51具有较强的拮抗性能,且拮抗性能稳定,具有较好的生防潜力。经过形态观察、生理生化特性分析及16S rDNA序列分析,MK48为短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis),MK49和MK51为枯草芽孢杆菌(Bacillus sub-tilis),MK50是铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。MK48、MK49、MK50及MK51的16S rDNA序列在GenBank中注册号分别为:EU272855、EU272856、EU272857、EU272865。

棉花根水煎剂对D-半乳糖所致小鼠亚急性衰老模型影响的实验研究

通过观察棉花根水煎剂对D－半乳糖诱导的衰老模型小鼠红细胞和脑组织超氧化物歧化酶（SOD）活性和过氧化脂质（LPO）含量，探索棉花根的抗衰作用。结果表明，灌服棉花根组小鼠SOD活性明显高于对照组，而LPO含量则明显低于对照组，提示其具有抗衰作用。

棉花根大枣煎剂防治放化疗引起的白细胞减少临床研究

棉花根大枣煎剂防治放化疗引起的白细胞减少临床研究菏泽地区人民医院（２７４０３１）王擎玉，侯恩存关键词棉花根大枣煎剂，白细胞减少，临床研究恶性肿瘤放、化疗期间以白细胞（ＷＢＣ）减少最为常见。我们根据民间用棉花根治疗病后身体虚弱的经验，从１９９０年起用棉...

棉花根腐病菌鉴定特征的快速培养条件

系统地研究棉根腐病菌的形态学特征及生理生化特性 ,总结出适用于检验检疫部门之快速、准确的鉴定方法 ,即无性器官快速形成条件。实验表明 ,病菌在 2 8℃ ,经过改进的No .70培养基上可生长出易于快速鉴定的典型的无性器官。

棉花根腐病菌在我国的适生性研究

棉花根腐病菌是我国进境植物检疫性有害生物,也是棉花上的一种毁灭性病菌,目前尚未在我国发生。本研究充分利用GIS工具及相关的计算机编程技术研制开发棉花根腐病菌地理信息系统(CRRGIS)。该系统可对该病菌进行生物学、气象学分析研究,以此揭示棉花根腐病菌在我国的适生性、可能发生的区域,并预测其田间流行规律。

浙东沿海棉区棉花根蚜发生规律及防治研究

菜豆根蚜(Smynthurodes betae Westwood)近年来在浙东三门湾棉区为害棉花日趋严重。该蚜在田间先呈点片发生,后逐渐加重而成片。棉株为害轻时只发现叶片发红,生长停滞;为害严重时,则叶片凋落,直至枯死,造成大量缺苗。据调查,1990年宁海、三门两县严重为害面积达1250亩,其中有140多亩绝产,其余棉田仅收皮棉12.5千克/亩,比未受害棉田减产72.2％。

除草剂乙草胺对棉花根尖细胞有丝分裂的影响

以棉花根尖为材料,用不同浓度(0.1 mg/L,0.5 mg/L,1.0 mg/L,1.5 mg/L,2.0 mg/L)的乙草胺分别处理12 h、24 h、48 h和72 h,研究乙草胺对棉花根尖细胞有丝分裂指数和染色体形态的影响。结果显示,乙草胺处理浓度为0.1 mg/L,处理12 h条件下,棉花根尖细胞分裂指数达到最高,为8.46%,染色体没有出现畸变现象。在乙草胺处理浓度为2.0 mg/L,72 h条件下,棉花根尖细胞有丝分裂达到最低,为3.24%,染色体形态受畸变率为7.93%。在试验范围内,高浓度与长时间的乙草胺处理对棉花根尖细胞有丝分裂和染色体形态有抑制作用并具有遗传毒性效应。

果胶酶法提取棉花根多糖的工艺研究

目的:优选果胶酶法提取棉花根多糖的工艺。方法:利用果胶酶水解与传统热水浸提相结合的方法提取棉花根多糖,以多糖提取率为评价指标,结合单因素试验和正交设计,考察酶解温度、酶解时间、酶添加量和酶解p H 4个因素对多糖提取率的影响并进行验证试验。结果:果胶酶法提取棉花根多糖的最优工艺为酶解温度40℃、酶解时间150 min、酶添加量2.0%、酶解p H4.6。在此条件下,棉花根多糖的平均提取率为2.474%(RSD=3.34%,n=5)。结论:果胶酶法是一种有效的棉花根多糖提取方法;本试验优选工艺合理、可行。