小鼠抗棉铃虫硫酸酯酶(HaSulf1)多克隆抗体的制备与鉴定

目的原核表达棉铃虫硫酸酯酶1(HaSulf1)蛋白,制备其多克隆抗体。方法构建原核表达载体,诱导表达,用镍柱纯化重组蛋白,注射免疫小鼠。采血后用ELISA检测多克隆抗体的效价,Western blot法检测其免疫特异性。结果获得重组质粒,诱导表达得到融合蛋白并成功纯化。ELISA实验检测获得的多克隆抗体效价最高可达到1∶819200。Western blot结果显示该抗体能与体外表达重组蛋白及棉铃虫体内的天然硫酸酯酶结合。结论原核表达获得重组HaSulf1蛋白并制备了特异性的小鼠多克隆抗体。