棒杆菌属细菌分类鉴定的方法学比较及对四环素与大环内酯类抗菌药物耐药机制的研究

目的评价全自动微生物鉴定系统鉴定棒杆菌属的准确率及可靠性;分析棒杆菌属的耐药状态,探讨其对大环内酯类、四环素类抗菌药物的主要耐药机制,为临床合理使用相关抗菌药物提供依据。方法选用VITEK-2Compact系统、API CORY系统、VITEK-32系统对分离的37株纹带棒杆菌、5株无枝菌酸棒杆菌进行分类鉴定并比较,采用微量稀释法进行药敏试验,对ermX、tetAB基因进行PCR扩增及双向测序后,在GenBank中比对。结果 API鉴定为纹带棒杆菌的37株菌,VITEK-32均错误地鉴定为干燥棒杆菌,VITEK-2Compact鉴定正确;37株菌对红霉素、四环素的耐药率分别为83.8%、75.7%;28株菌在染色体DNA中检测到tetAB基因,31株菌染色体DNA检测到ermX基因。结论 VITEK-2Compact在鉴定纹带棒杆菌方面较准确可靠,但在鉴定其他棒杆菌方面有限制;纹带棒杆菌对大环内酯类、四环素的耐药率较高,染色体中获得ermX基因、tetAB基因决定簇是其耐药的主要原因。

棒杆菌属细菌药敏试验方法学评价及对喹诺酮类药物主要耐药机制的研究

目的筛选适合临床常规使用的检测棒杆菌属药敏试验的方法,分析棒杆菌属的耐药状态,为临床合理使用相关抗菌药物提供依据;探讨gyrA、parC基因的改变与棒杆菌属耐喹诺酮类抗菌药物的关系。方法采用K-B纸片扩散法、琼脂稀释法、E-test、VITEK-AMS、微量稀释法等5种方法测试纹带棒杆菌及假结核棒杆菌对16种抗菌药物的药物敏感性;PCR扩增检测gyrA和parC基因喹诺酮类耐药决定区相关片段并测序,在GenBank中进行Blast及BlastX分析并观察氨基酸突变点,用NcoI酶进行PCR-RFLP。结果 5种方法在检测万古霉素药物敏感性无差异,K-B纸片扩散法有极重大误差及重大误差,经Bowker检验,差异有统计学意义(P<0.05);细菌在AST-GP67卡片中未充分生长;37株纹带棒杆菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率均为94.6%,30株菌发生双突变(87位Ser突变为phe,91位Asp突变为Ala),5株菌单点突变(87位Ser突变为phe);PCR-RFLP经NcoI酶切后显示,敏感株和耐药株均产生3个条带。结论棒杆菌属对多种抗菌药物的耐药率较高,对万古霉素全部敏感;VITEK-2Compact仪器法、K-B纸片扩散法不适用于棒杆菌属药敏试验,E-test、琼脂稀释法可采纳,但红霉素除外;纹带棒杆菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药机制主要是gyrA基因突变引起,尤以双突变占优势,纹带棒杆菌不携带parC基因,不编码拓扑异构酶Ⅳ。

用MALDI-TOF MS技术快速鉴定临床分离棒状杆菌属细菌

目的评价基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)快速鉴定临床分离的非白喉棒状杆菌的价值。方法收集本院58株非白喉棒状杆菌,用MALDI-TOF MS和16S rRNA基因测序两种方法进行鉴定和比较。用MALDI-Biotyper软件构建不同棒状杆菌MALDI-TOF MS蛋白系统发育树。结果 58株非白喉棒状杆菌中,54株MALDI-TOF MS与16S rRNA基因测序鉴定结果一致,包括34株纹带棒状杆菌(Corynebacterium straitum)、11株杰氏棒状杆菌(C.jeikeium)、3株C.resistens、2株解葡萄糖苷棒状杆菌(C.glucuronolyticum)、2株黏金色棒状杆菌(C.aurimucosum)和2株无枝菌酸棒状杆菌(C.amycolatum)。4株16S rRNA基因测序无法鉴定到种的菌株中,MALDI-TOF MS鉴定为2株产黏棒状杆菌(C.mucifaciens)、1株C.singulare和1株假白喉棒状杆菌(C.commune)。结论 MALDI-TOF MS可将棒状杆菌属细菌快速、准确地鉴定到种。

地霉属真菌和棒状杆菌属菌株协同发酵生产γ-癸内酯

使用有油脂水解活性的地霉属菌株PL-4与有内酯合成能力的棒状杆菌属菌株RS105进行协同发酵转化蓖麻油生产γ-癸内酯。发酵产物用GC/MS(气质联用)方法进行检测,结果显示使用具有油脂降解能力的地霉属真菌PL-4协同发酵较单独使用RS105发酵时内酯的产率有明显提高。

棒状杆菌属分离鉴定及抗生素敏感性试验

目的 :棒状杆菌属系统生理、生化特性及抗生素敏感性试验研究。方法 :对临床分离的85株棒状杆菌首选葡萄糖OF和硝酸盐还原两个试验将该属细菌初步分为4组 ,再用API方法鉴定到种。K -B法做药敏试验。结果 :85株棒状杆菌属经鉴定得4组7种 ,药敏试验棒状杆菌属对万古霉素均敏感。结论 :棒状杆菌鉴定API法是一种理想、简便、快速、准确的方法。JK菌群棒状杆菌耐药率最高 ,仅对万古霉素敏感 ,其他棒状杆菌属种对头孢唑啉、头孢哌酮。

棒状杆菌细胞壁中的主要成分的合成过程

棒状杆菌属由Lehmann和Neumann于1896年确立,为革兰染色阳性、形态棒状的一类细菌,具有一定致病性的独立群体,隶属于细菌域,放线菌门,放线菌纲,放线菌目,棒杆菌亚目,棒杆菌科。棒状杆菌广泛存在于自然界,主要分离自人类、动物以及土壤、水等环境资源，部分菌种属条件致病菌，而大部分则为正常菌群。新近发布的“原核细胞一览表”显示，该属目前含有106个菌种，从致病性角度分类，该属细菌主要包括三个类群：人类致病菌；动植物致病菌；非致病性土壤源菌。其中，人类致病菌以白喉棒状杆菌为代表，其余致病性棒状杆菌均报道为条件致病菌。

棒状杆菌败血症患者的药学监护

目的:探讨临床药师对棒状杆菌败血症患者实施药学监护的意义。方法:临床药师参与1例老年女性棒状杆菌败血症患者的诊疗过程,给予相应的药学监护。结果:临床药师通过对该患者实施药学监护,保证患者治疗效果良好,顺利出院。结论:临床药师通过参与抗感染治疗的临床实践,可协助医师保证药物治疗的安全性和有效性,使患者获得优良的药学服务。

放线杆菌属和棒状杆菌属的新种

1.美国Michael等最近从牛瘤胃中分离到一种细菌,为一种无运动性、多型性、革兰氏阴性杆菌（0.8×1μm）,在TSB琼脂培养基上生成的菌落为环状、边缘整齐、灰白色、半透明,直径1—1.5μm;生长温度为37—39℃,在20℃或45℃或在含4.5％（W/V）NaCl TSB中不能生长。在CO2

棒状杆菌临床分离株药物敏感性及同源性分析

目的了解棒状杆菌感染在临床中的耐药状况及同源性。方法用肉汤微量细菌定量法检测抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),随机扩增多态性DNA(RAPD-PCR)并对棒状杆菌进行基因分型。结果 184株棒状杆菌对青霉素、头孢噻肟、红霉素、环丙沙星、四环素、克林霉素的耐药率均超过50%,对多西环素、亚胺培南、庆大霉素、利福平的耐药率在60%～80%之间,未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药。18株纹带分离株可分成5型,其中A型占14株(77.8%)。结论棒状杆菌对多种抗菌药物的敏感性降低,纹带棒状杆菌存在院内传播的趋势。

118株棒状杆菌所致感染性疾病及耐药性分析

近几十年来．抗生素的使用促使感染性疾病的病原菌种类不断发生变化，条件致病菌有明显增多的趋势。一直以来人们对于棒状杆菌属多只重视白喉棒状杆菌．而忽视了该属其中一些条件致病菌。为了解临床上病原菌的致病性及耐药情况。现对本院2005年1月至2006年12月期间分离的118株棒状杆菌分析。现报道如下。

1929例血液标本培养出类白喉棒状杆菌及其L型22例

１９２９例血液标本培养出类白喉棒状杆菌及其Ｌ型２２例刘继英，杨树屏，段茂华，路彦坛，陈燕（胜利石油管理局中心医院检验科，２５７０３４）临床上为了控制感染，使用广谱抗生素，由于没查清感染的病原菌而造成用药不当，导致治疗无效或使病程迁延不愈；本文对分离到...

棒杆菌启动子片段的酶谱分析及定位

用大肠杆菌启动子探测质粒pSDS I (Ap^r,Tc^s)从钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)6282染色体的HindⅢ酶切片段中,克隆到两个具有启动功能的DNA片段,分别将两个重组质粒命名为pSDB5和pSDB21。含有这两个质粒的菌株均可以在含300μg/ml Tc的平板上生长。通过酶切分析,pSDB5的插入片段为1.6kb,pSDB21的插入片段为3.4kb,并分别作出了它们的限制性酶切图谱。对pSDB21利用其EcoR Ⅰ和BglⅡ位点,通过亚克隆删除了与启动功能无关片段,构建成pSDB210和pSDB211,从而使启动子定位于约0.1kb的BglⅡ/HindⅢ外源片段上。分子杂交实验证明所得到的这两个具有启动功能的DNA片段确实来源于钝齿棒杆菌6282的染色体DNA。

L-赖氨酸发酵的研究钝齿棒状杆菌PI-3-2的L-赖氨酸发酵中间生产试验

1978年我们完成了北京棒状杆菌AS 1.563发酵生产L-赖氨酸研究的扩大试验。为进一步提高L-赖氨酸产率和糖原料的转化率,采用钝齿棒状杆菌(Corynebacterium crenatum)PI-3-2进行了L-赖氨酸发酵中间生产的研究,现报道如下。

转座子Tn916接合转移诱变棒杆菌

采用滤膜接合法，将大肠杆菌中带有Ｔ＿ｃ抗性的转座子Ｔｎ９１６接合转移到北京棒杆菌ＧＭ９３中其进行诱变。接合频率在１０￣（－７）－１０￣（－８）之间，在没有选择压力的条件下传代培养，接合子是比较稳定的，仍保持Ｔ＿ｃ抗性。Ｔｎ９１６的接合转座作用可以使ＧＭ９３产生营养缺陷型突变，其中氨基酸营养缺陷型占８４％，并得到与Ｌ－Ｉｌｅ产生途径有关的六种氨基酸（Ｔｈｒ，Ｌｙｓ，Ｌｅｕ，Ｍｅｔ，Ｖａｌ，Ｉｌｅ）的缺陷株。

神经外科危重患者耐药纹带棒状杆菌肺部感染的临床特征及治疗

神经外科危重患者是一型特殊的患者,因神志昏迷、误吸、神经源性肺水肿、长程插管全麻手术、咳嗽反射减弱、长时间滞留重症监护病房、气道开放及使用镇痛镇静药物等不利因素致院内肺部感染高发,发病率在20%以上[1],远高于普通住院患者院内肺部感染的发病率。纹带棒状杆菌属于棒状杆菌属,为革兰阳性杆菌,广泛存在于人类皮肤、鼻黏膜等处,是条件致病菌;同白喉棒状杆菌相比,纹带棒状杆菌既往很少引起关注,但是近年来在临床工作中由耐药纹带棒状杆菌引起的院内感染屡屡被报道,如肺部感染[2]、颅内感染[3]、菌血症、关节炎等,甚至是院感的暴发[2]。且致病纹带棒状杆菌表现出多重耐药性,对万古霉素[4]、利奈唑胺敏感,而对其他抗生素耐药性较高。此研究旨在对神经外科危重患者中由耐药纹带棒状杆菌所致肺部感染的病例资料进行分析,深入认识疾病的易感因素、特点,并总结治疗方案。

住院患者分离的纹带棒状杆菌耐药性及同源性研究

目的分析研究住院患者分离的纹带棒状杆菌耐药性及同源性。方法选取于2013年10月至2014年4月在该院住院患者58例,对患者不同部位分离的纹带棒状杆菌58株,采用肉汤微量稀释法对患者进行体外药敏试验,对纹带棒状杆菌阳性患者的周边环境采用盐水棉拭子法进行采样,对分离的纹带棒状杆菌进行体外药敏试验;对58株纹带棒状杆菌采用脉冲场凝胶电泳法(PFGE)进行分子分型。结果纹带棒状杆菌聚集分布于2013年12月至2014年3月。药敏试验结果显示,四环素、红霉素、克林霉素、环丙沙星和青霉素这5种抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC)≥64μg/mL;万古霉素、利福平和庆大霉素的MIC均为0.5μg/mL;只有1株分离的纹带棒状杆菌对除克林霉素之外的所用抗菌药物全部敏感。PFGE分型结果显示,50株纹带棒状杆菌共分为7个不同基因型,其中0002型和0006型这两种基因型为优势型。从同期住院的同一病房患者身上分离出的纹带棒状杆菌同源性高。环境采样结果显示,纹带棒状杆菌分离阳性率达43.48%(10/23)。结论住院患者分离纹带棒状杆菌呈多重耐药性,且从不同患者身上分离出的菌株同源性极高。

一例从乳腺炎脓液分离的克氏棒状杆菌的错误鉴定及案例分析

目的了解从乳腺炎脓液分离的克氏棒状杆菌(克罗彭施泰特棒状杆菌,corynebacterium kroppenstedtii)导致肉芽肿性乳腺炎(granulomatous mastitis,GM)的临床特征,为微生物实验室培养鉴定及临床诊治提供帮助。方法收集到的同一患者两份乳腺炎脓液穿刺液标本接种于血琼脂平板及厌氧琼脂平板,对平板生长的细菌做革兰氏染色,并对细菌进行常规生化鉴定,质谱鉴定,和16S rRNA核酸序列测定。结果VITEK compact仪器生化鉴定为极小棒状杆菌[1],VITEK MS质谱鉴定结果为克氏棒状杆菌[2],16S rRNA核酸序列测定为克氏棒状杆菌。结论克氏棒状杆菌生长缓慢,传统生化反应鉴定错误,应用新技术工具质谱技术或基因组测序可以得到准确的结果。根据准确的细菌鉴定及药敏结果有利于指导临床选择合适的治疗方案包括手术和使用抗生素等。

棒状杆菌致尿路感染26例分析

以前,棒状杆菌属中,除白喉棒状杆菌外,其他棒状杆菌多认为是非致病菌,而近年研究表明,非白喉棒状杆菌亦可作为条件致病菌引起抵抗力低下的宿主发生各类感染[1、2].自1996年1月-2000年12月,我们先后从临床尿路感染患者的尿液中检出26株非白喉棒状杆菌.报告如下.