棒柄花苷A对照品的制备研究

【目的】建立从棒柄花(Cleidion brevipetiolatumPaxet Hoffm)中制备棒柄花苷A(PPGA)对照品的方法。【方法】利用硅胶柱层析、重结晶和反相制备高效液相色谱对棒柄花的乙醇提取物进行分离纯化,以HPLC对棒柄花苷A进行纯度检查和含量测定,并通过UV,IR,MS,1 HNMR等对其进行结构确证。【结果】从棒柄花叶中分离、纯化出棒柄花苷A对照品,质量分数W>98.0%。【结论】所建立的制备方法简单,制备出的棒柄花苷A对照品符合中药化学对照品的相关要求,可作为棒柄花药材和含棒柄花成药质量控制,以及中药药效物质基础用的化学对照品。

棒柄花苷A对活化的HSC-T6细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究棒柄花苷A(PPGA)对白介素-1β(IL-1β)诱导活化的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖、胶原、凋亡和细胞周期的影响。方法:通过MTT法检测PPGA对HSC-T6细胞活力的影响,计算半数抑制浓度(IC_(50)),以IC_(50)设置给药浓度。将HSCT6细胞分为正常对照组、模型组和PPGA高、中、低剂量组,除正常对照组外,其他各组均用IL-1β刺激30 min使HSC-T6细胞活化,建立体外肝纤维化模型。药物干预24 h后,采用MTT法检测HSC-T6细胞增殖活力,免疫荧光法检测Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)和Ⅲ型胶原蛋白(Col-Ⅲ)表达,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果:PPGA作用于HSC-T6细胞24 h、48 h、72 h的IC_(50)分别为473 mg/L、100 mg/L、15 mg/L,因此选择200 mg/L、100 mg/L、50 mg/L分别作为PPGA高、中、低剂量进行后续实验。与正常对照组比较,模型组HSC-T6细胞增殖能力提高,Col-Ⅰ和Col-Ⅲ蛋白表达升高(均P<0.05),而细胞凋亡率和周期分布无明显改变(P>0.05);与模型组比较,PPGA高、中剂量组HSC-T6细胞增殖活力降低,Col-Ⅲ蛋白表达降低,PPGA各剂量组Col-Ⅰ蛋白表达降低,凋亡率升高,细胞S期延长(均P<0.05)。结论:PPGA可抑制HSC-T6细胞增殖,诱导细胞凋亡,并使HSC-T6细胞周期阻滞在S期,减缓肝纤维化的发展进程。