北部湾三角棘原甲藻(甲藻门原甲藻目)的形态观察和18S rDNA序列分析

利用光学显微镜、分子生物学方法,对分离自广西北部湾海域的三角棘原甲藻 Prorocentrum triestinum BBW-02藻株的形态特征进行了描述,并探讨了其分子系统进化关系。三角棘原甲藻 BBW-02细胞呈长卵形或披针形,细胞长20~26μm,宽10~14μm,顶刺形如矛尖,刺丝胞孔数量较少,排列不规则,主要分布于壳板边缘,距离细胞底端1/3处壳板两侧各有2个近于对称排列的刺丝胞孔。18S rDNA序列同源检索和系统进化分析表明,三角棘原甲藻BBW-02与其他地理株系的三角棘原甲藻聚为一支,亲缘关系密切,遗传差异仅为0.000~0.001。与其他种类相比,三角棘原甲藻BBW-02与同属中的P. gracile亲缘关系最近。

论巨鹿之战过程及棘原位置

公元前208年,巨鹿之战爆发,此战从巨鹿始至棘原终,战役的结果是,诸侯联军消灭了秦军40万人,从此以后,秦王朝再无兵可战,直接导致最后的灭亡。然而因为时间久远,史料不足,河流、地貌、地名的变化,战役的经过已很难考证,其中确定棘原的位置成为研究这段历史的关键。

不同浓度二甲基亚砜对细粒棘球蚴原头节生长的影响

目的探讨不同浓度二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)对细粒棘球蚴原头节生长的影响。方法2020年1月—2022年6月陇南市第一人民医院联合石河子大学课题组用不同浓度浓度的二甲基亚砜(0.1%、0.2%、0.5%、1.0%、2.0%)对细粒棘球蚴原头节进行处理,RPMI 1640培养基设为空白对照组,采用0.1%伊红染色法检测细粒棘球蚴原头节在48 h的生长情况,观察不同浓度的二甲基亚砜对体外原头节生长的影响;用活性试剂盒检测作用48 h后原头节内Caspase-3酶活性的影响;透射电镜观察DMSO作用48 h后原头节内部超微结构的改变。结果0.5%的DMSO作用原头节48 h后,原头节存活率与空白对照组对比,差异无统计学意义(P>0.05);但浓度为1.0%、2.0%DMSO作用原头节48 h后,其存活率分别为(55.3±1.13)%、(41.7±1.24)%,其存活力明显低于空白对照组,差异有统计学意义(t=8.726、9.217,P<0.05)。1.0%、2.0%DMSO作用后头节Caspase-3活性明显增加。2.0%DMSO组内部超微结构变化包括合胞体带疏松、表面微绒毛减少。结论在DMSO浓度0.1%~0.5%的范围内对细胞产生影响无明显变化。

细粒棘球绦虫在人体内棘球蚴原头节、囊壁蛋白质表达谱分析

目的初步掌握流行于青海省细粒棘球绦虫幼虫棘球蚴(原头节、囊壁)在中间宿主人体内蛋白质表达情况。方法利用SDS-PAGE和western-blot分析棘球蚴原头节和囊壁蛋白质表达谱,进一步利用2DE和MALDI-TOF质谱分析技术对原头节和囊壁蛋白质构成情况进行全面的研究分析。结果在原头蚴、囊壁组织的双向电泳图中,各蛋白点通过MALDI-TOF-MS检测,原头蚴和囊壁分别有40个蛋白质点和8个蛋白质点得以初步鉴定,包括有:(1)细胞骨架蛋白:肌动蛋白、原肌球蛋白。(2)代谢相关酶类:苹果酸脱氢酶;磷酸丙糖异构酶;脯氨酸氧化酶;谷胱甘肽-S-转移酶;类胡萝卜脱氢酶;肽基脯氨酰顺反异构酶;(3)物质转运相关蛋白:载脂蛋白A-I;(4)应激反应蛋白(HSP70,HSP20相关蛋白)。结论初步鉴定了寄生人体细粒棘球蚴原头蚴、囊壁组织中的部分蛋白质点,其中,原头蚴中共有40个蛋白点,囊壁中有8个蛋白点。这些蛋白可能与细粒棘球蚴运动、生长、发育、代谢调控等方面有关。

p38MAPK抑制剂SB202190体外对细粒棘球蚴原头节的作用

目的探讨p38MAPK抑制剂SB202190体外抑制细粒棘球蚴原头节生长的作用。方法将体外培养的细粒棘球蚴原头节分别加入12.5、25、50、100μmol/L的SB202190中体外孵育。利用伊红染色的方法,在光镜下观察原头节的活力变化。实验重复3次;扫描电子显微镜下(SEM)下观察SB202190作用后原头节表面超微结构改变;不同浓度SB202190作用24h后,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性检测试剂盒检测caspase-3酶活性。结果 50μmol/L和100μmol/L的SB202190作用1d后,头节活力开始下降。作用14d后,100μmol/LSB202190组无存活的头节,50μmol/L SB202190组的头节活力仅为13.8%。超微结构显示100μmol/LSB202190作用6d后,原头节顶突外翻、变形,顶突界面缺损,吸盘变形,体表出现虫蛀样损害。不同浓度SB202190作用24h后,与正常对照组比较,SB202190高浓度组原头节的caspase-3表达明显增高。结论 p38MAPK抑制剂SB202190在体外有明显的抑制细粒棘球蚴原头节生长的作用。

Eg.ferritin抗血清介导的体外杀伤细粒棘绦虫原头节作用的观察

目的体外观察细粒棘球绦虫重组铁蛋白(Eg.ferritin)抗血清对细粒棘球蚴原头节(PSC)的杀伤作用。方法用纯化的Eg.ferritin免疫新西兰家兔制备抗血清,以不同浓度的抗血清与细粒棘球绦虫原头蚴体外共培养,光镜观察培养不同时间点细粒棘球原头节的变化,透射电子显微镜观察原头节超微结构的改变。结果抗血清组的原头蚴的死亡率及破坏程度与抗血清的浓度呈正相关,与对照组相比,抗血清对原头节有杀伤作用(P<0.01)。在20%抗血清组中,原头节内部被大量空泡及髓样结构代替或无结构。结论细粒棘球蚴重组铁蛋白抗体对细粒棘球绦虫有明显的杀伤作用。

过氧化氢体外诱导细粒棘球蚴原头节细胞Caspase-3表达及超微结构改变的影响

目的探讨过氧化氢(H2O2)体外诱导细粒棘球蚴原头节细胞凋亡、Caspase-3表达和细胞超微结构的影响。方法RPMI1640添加谷氨酰胺组即体外培养细粒棘球蚴原头节,用5mmol/L H2O2诱导8h,使其发生细胞凋亡。用原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶标记技术(TUNEL法)检测原头节细胞凋亡情况,用过氧化物酶标记链霉卵白素(SP)染色半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)。在透射电镜下观察原头节细胞超微结构的变化。结果过氧化氢诱导原头节细胞凋亡细胞增加,caspase-3表达增加,电镜观察原头节细胞异染色质增加,部分细胞染色质异常浓缩呈现凋亡细胞征象。结论H2O2可诱导细粒棘球蚴原头节细胞凋亡,且caspase-3参与原头节细胞的凋亡。

高吸水性树脂协同高强度聚焦超声对细粒棘球绦蚴原头节细胞酶活性的影响

目的为探索高吸水性树脂(Super Absorbent Resin,SAR)协同高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)对离体细粒棘球绦蚴原头节酶活性的影响。方法将离体原头节悬液(每mL含有2 000个原头节),分为4组:I组(仅原头节悬液)、Ⅱ组:仅SAR组(0.01gSAR)、III组(单纯HIFU照射)、IV组(HIFU照射+0.01gSAR)、Ⅴ组(HIFU照射+0.1gSAR)。以声功率为100w的高强度聚焦超声波辐照30s,辐照后悬液涂片进行台盼兰及经冰冻切片酶组织化学染色,观察原头节形态学改变,并用半定量方法检测原头节内细胞的葡萄糖-6-磷酸酶和琥珀酸脱氢酶的活性。结果显示当超声剂量一定时,原头节的形态改变与SAR剂量有正效应关系,SAR量越大,其破坏程度越高。正常原头节透亮、外形完整,各实验组原头节深染或结构崩解。单纯HIFU照射组在作用60s时,原头节死亡率为80.1%;HIFU结合不同量SAR两组原头节在HIFU作用10s时,其死亡率分别为87.82%和89.1%。加入SAR后再经过HIFU照射各组原头节内细胞葡萄糖-6-磷酸酶和琥珀酸脱氢酶活性降低,明显低于单纯超声组(P<0.05),阴性对照组无酶反应物产。结论 SAR能增加HIFU辐照对原头节的急性杀伤作用,使原头节内细胞的葡萄糖-6-磷酸酶活性和琥珀酸脱氢酶活性均显著低降低,从而影响其活力。

电子束对体外培养的细粒棘球蚴及其p38 mRNA表达的影响

目的观察电子束照射对体外培养的细粒棘球蚴形态结构、死亡率及其p38 mRNA表达的影响。方法采集自然感染的绵羊肝中的细粒棘球蚴原头蚴,随机分成3组,分别用0 Gy、30 Gy、60 Gy的不同剂量的6 MeV电子束各照射1次,照射后连续培养3 d、14 d,光镜观察虫体的大体变化及死亡率,qRT-PCR法测定p38基因的表达水平。结果60 Gy组较0 Gy、30 Gy组原头蚴变性坏死数目明显增多,死亡率有差异(P<0.0125),连续培养天数(3 d、14 d)对虫体死亡率无影响。经电子束照射后,30 Gy、60 Gy组原头蚴p38 mRNA表达水平较0 Gy组升高(P<0.05)。结论体外培养的原头蚴经电子束照射后大体形态结构发生明显变化、死亡率升高,且与电子束的剂量存在量效关系;p38 mRNA的表达量随着电子束的剂量的增加而升高,p38基因可能参与电子束所致体外杀伤棘球蚴的作用机制。

两种棘球绦虫原头节促进骨髓间充质干细胞钙化的差异性分析

背景:细粒棘球蚴与泡状棘球蚴的生长方式不同,肝细粒棘球蚴病可以形成完整的纤维钙化囊壁,肝泡状棘球蚴病呈浸润性生长,不能形成完整的纤维钙化囊壁。骨髓间充质干细胞参与棘球蚴病纤维钙化囊壁的形成,但细粒棘球蚴和泡状棘球蚴钙化特征不同与骨髓间充质干细胞的作用尚不清楚。目的:比较2种棘球绦虫原头节对骨髓间充质干细胞钙化的作用,初步探讨2种棘球蚴钙化灶差异的形成机制。方法:提取、培养、鉴定C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞。将骨髓间充质干细胞分别与泡状棘球绦虫原头节、细粒棘球绦虫原头节共培养,以骨髓间充质干细胞单独培养为对照组。共培养1,4,7 d取骨髓间充质干细胞通过微量酶标法检测成骨标记物碱性磷酸酶活性,RT-qPCR检测BMP2和RUNX2 mRNA的表达,Western blot检测BMP2、RUNX2和P-Smad1/5/8的蛋白表达。结果与结论:①细粒棘球绦虫原头节共培养组、泡状棘球绦虫原头节共培养组1,4 d的碱性磷酸酶活性均高于对照组(P <0.05),且细粒棘球绦虫原头节共培养组1,4,7 d的碱性磷酸酶活性高于泡状棘球绦虫原头节共培养组(P <0.05)。②Western blot结果显示:细粒棘球绦虫原头节共培养组和泡状棘球绦虫原头节共培养组1,4 d的BMP2、RUNX2、P-Smad1/5/8蛋白表达高于对照组(P <0.05),细粒棘球绦虫原头节共培养组高于泡状棘球绦虫原头节共培养组(P <0.05)。③RT-qPCR结果显示:细粒棘球绦虫原头节共培养组1,4,7 d的BMP2、RUNX2mRNA表达水平显著高于对照组(P <0.05),细粒棘球绦虫原头节共培养组4,7 d的BMP2、RUNX2 mRNA表达水平显著高于泡状棘球绦虫原头节共培养组(P <0.05)。泡状棘球绦虫原头节共培养组1,4,7 d的RUNX2 mRNA表达水平显著高于对照组(P <0.05)。④结果表明,棘球绦虫原头节与骨髓间充质干细胞共培养通过上调BMP-Smad1/5/8通路促进骨髓间充质干细胞钙化因子碱性磷酸酶和RUNX2的表达,共培养后期泡状棘球蚴促钙化作用明显减弱,细粒棘球蚴促钙化作用保持不变,提示该机制可能与2种棘球蚴生长方式不同相关。

甘氨鹅脱氧胆酸对体外细粒棘球蚴原头节活力及ROS影响

目的研究甘氨鹅脱氧胆酸(glycochenodeoxycholic acid,GCDCA)对体外细粒棘球蚴原头节活力及活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平的影响。方法将细粒棘球蚴原头节分为对照组及GCDCA处理组(500、1 500、2 500μmol/L),应用体外培养技术,通过伊红染色法每天定时在光学显微镜下观察原头节的活力并记录存活和死亡数目。使用试剂盒检测不同浓度GCDCA处理24h后各组原头节体内caspase-3酶活性变化;DCFH-DA染色法荧光显微镜观察GCDCA作用24h后原头节内ROS水平变化。结果 500、1 500、2 500μmol/L GCDCA处理后均可导致原头节活力减弱,且最高浓度组在第7d时原头节全部死亡。500、1 500、2 500μmol/L GCDCA组作用原头节24h后caspase-3酶活性与对照组相比明显升高(F=555.162,P<0.05)。500、1 500、2 500μmol/L GCDCA作用原头节24h后原头节内ROS水平与对照组相比明显升高(F=216.901,P<0.05)。结论 GCDCA能抑制体外原头节生长,促使原头节死亡,可能与活化caspase-3及提高原头节内ROS水平相关,具体机制有待进一步研究。

丙泊酚抑制过氧化氢诱导细粒棘球蚴原头节凋亡作用机制的初步研究

目的初步探讨丙泊酚抑制过氧化氢诱导细粒棘球蚴原头节凋亡作用机制。方法应用体外培养技术,通过伊红染色法定时在光学显微镜下观察各组原头节的活力并记录存活和死亡数目。使用试剂盒及DCFH-DA染色法荧光显微镜观察检测0.5 mmol/L H2O2组及1 mmol/L丙泊酚+0.5 mmol/L H2O2组原头节体内HO-1酶活性及ROS水平的变化。结果DMSO及不同浓度的丙泊酚体外作用于原头节24 h,原头节的活力均大于95.0%。0.5 mmol/L H2O2作用于原头节6 h,原头节活力为38.0%。丙泊酚(0.5 mmol/L、0.75 mmol/L、1 mmol/L)预处理8 h后加入0.5 mmol/L H2O2共培养6 h,原头节的存活率明显增加(P<0.05)。1 mmol/L丙泊酚预处理原头节8 h后加入0.5 mmol/L H2O2共培养6 h,HO-1酶活性较单独使用0.5 mmol/L H2O2组明显增加,ROS水平相比较则相反。结论丙泊酚对原头节无毒性且具有抑制过氧化氢诱导细粒棘球蚴原头节凋亡作用,其机制可能与增加HO-1酶活性及降低原头节内ROS水平有关,具体机制有待进一步研究。

鹅脱氧胆酸诱导细粒棘球蚴原头节凋亡作用机制的初步研究

目的初步探究鹅脱氧胆酸(chenodeoxycholic acid,CDCA)诱导细粒棘球蚴原头节凋亡的作用机制。方法采用鹅脱氧胆酸体外处理细粒棘球蚴原头节,0.1%伊红染色,倒置显微镜观察原头节的活力;Caspase-3试剂盒检测其酶活性变化;采用DCFH-DA染色法利用荧光酶标仪检测鹅脱氧胆酸作用2、4 d后原头节内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的荧光强度的变化;western blot技术检测Nrf2蛋白的表达;生物化学法测定细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)和硫氧还蛋白过氧化物酶(thioredoxin peroxidase,TPx)酶活性的变化。结果体外应用500、1000、2000、3000μmol/L鹅脱氧胆酸能够抑制原头节体外生长,随着时间的延长,抑制作用逐渐增强;不同浓度鹅脱氧胆酸作用原头节24、48 h后caspase-3酶活性升高,随着时间的延长caspase-3酶活性增加越明显;不同浓度鹅脱氧胆酸作用原头节2、4 d后观察到原头节内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的水平升高(F=1631.77,P<0.05),同时western blot检测发现Nrf2蛋白的表达降低(P<0.05),并检测到抗氧化物酶谷胱甘肽过氧化物酶(F=756.033,P<0.05)和硫氧还蛋白过氧化物酶(F=608.848,P<0.05)的活性降低。结论鹅脱氧胆酸诱导细粒棘球蚴原头节凋亡可能是通过氧化应激途径起作用。

纳米化阿苯达唑对细粒棘球蚴原头节生长的影响

目的观察比较阿苯达唑粉剂和纳米化阿苯达唑在体外对细粒棘球蚴原头节作用的影响。方法将阿苯达唑粉剂溶解于DMSO后与纳米化阿苯达唑分别配成3.13、6.25、12.5、25μg/m L浓度,按照所设分组体外培养,倒置显微镜下观察各药物处理组经伊红染色后原头节的形态及活力。ELISA试剂盒测定药物作用3、6 d后原头节体内抗氧化酶NQO-1的活性变化。结果将相同条件下阿苯达唑粉剂和纳米环阿苯达唑各浓度组原头节的活力较空白对照组降低。12.5、25μg/m L浓度组纳米化阿苯达唑酶活性变化高于阿苯达唑粉剂组。结论阿苯达唑粉剂和纳米阿苯达唑均有不同程度的体外抗细粒棘球蚴原头节作用;纳米化阿苯达唑在体外抑制细粒棘球蚴原头节生长作用优于普通阿苯达唑粉剂,有望成为治疗细粒棘球蚴病的一种新的剂型。

去氢骆驼蓬碱体外诱导细粒棘球蚴原头节凋亡过程中caspase-3及抗氧化酶活性检测分析

目的观察不同浓度去氢骆驼蓬碱体外诱导细粒棘球蚴原头节生长凋亡过程中虫体活力、Caspase-3及相关抗氧化酶活性变化。方法将体外培养的细粒棘球蚴原头节分为空白对照组、溶剂组、阿苯达唑(ABZ)阳性对照组及不同浓度去氢骆驼蓬碱(25、50μmol/L)处理组进行体外干预试验,于48、96、144、192、240、288h后取样,经0.1%伊红染色后置于倒置显微镜下观察原头节活力。试验重复验证3次,绘制活力曲线图。用ELISA试剂盒检测作用48h、96h后各浓度组原头节caspase-3及抗氧化酶HO-1和NQO-1的活性变化。结果去氢骆驼蓬碱处理组从作用第48h开始原头节活力开始下降,培养至第240h时25μmol/L组原头节死亡率为97.9%,50μmol/L组原头节均死亡。ELISA法测定25、50μmol/L去氢骆驼蓬碱作用原头节48h后caspase-3活性分别为(32.776±8.437)ng/ml和(52.129±5.949)ng/ml,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);ELISA法测定25、50μmol/L去氢骆驼蓬碱作用48、96h后原头节抗氧化酶HO-1和NQO-1活性分别为(0.563±0.031)ng/ml、(1.832±0.10)ng/ml和(0.425±0.011)ng/ml、(1.288±0.05)ng/ml,差异均有统计学意义(P<0.05),且呈时间及剂量依赖性。结论去氢骆驼蓬碱能抑制体外培养的细粒棘球蚴原头节的生长,并能降低caspase-3及抗氧化酶活性,具体机制有待进一步研究。

养殖条件下3种石首鱼科鱼类肌肉营养成分的分析与比较

为探明石首鱼在广东相关水域养殖条件下的肌肉营养成分,对大黄鱼(Pseudosciaena crocea)、浅色黄姑鱼(Nibea coibor)、双棘原黄姑鱼(Protonibea diacanthus)进行了肌肉基本营养成分和氨基酸、脂肪酸的检测。结果显示,3种石首鱼科的鱼类基本营养成分除粗脂肪外没有显著性差异,3种鱼的水分为77.44%~77.90%,粗蛋白18.32%~19.76%,粗脂肪5.36%~1.08%,灰分1.34%~1.52%。肌肉中检测出17种氨基酸,其中必需氨基酸(EAA)占总氨基酸(TAA)的35.47%~37.64%,用氨基酸评分(AAS)、化学评分(CS)以及必需氨基酸指数(EAAI)对3种鱼的氨基酸进行评价,显示必需氨基酸含量较高,氨基酸组成平衡,是优质蛋白资源。3种鱼的肌肉中检测出17~24种脂肪酸,三类脂肪酸含量的比值没有显著差异,符合人类膳食中饱和脂肪酸(ΣSFA)∶单不饱和脂肪酸(ΣMUFA)∶多不饱和脂肪酸(ΣPUFA)应为1∶1∶1的比值。用血管动脉粥样硬化指数(IA)、血栓形成指数(IT)和多烯指数(PI)对3种鱼的脂肪酸进行评价,也符合人体营养需要。结果表明,3种石首鱼的肌肉均含有较高的营养成分。

氯舒隆和奥硝唑体外抗细粒棘球蚴原头节和多房棘球蚴的效果评价

目的研究氯舒隆和奥硝唑体外抗细粒棘球蚴原头节和多房棘球蚴的效果。方法从感染细粒棘球蚴绵羊肝脏中收集原头节;从感染长爪沙鼠腹腔中分离多房棘球蚴,加入预先接种人肝癌细胞的DMEM培养基中培养2个月后,收集直径为1~5 mm囊泡。实验分氯舒隆组(实验组)、奥硝唑组(实验组)、阿苯达唑组(阳性对照)和0.2%二甲基亚砜(DMSO)组(溶剂对照组)。每种药物设2个平行孔,终浓度均为40μmol/L,重复2次。每孔加细粒棘球蚴原头节约100个或多房棘球蚴囊泡25~35个。药物处理细粒棘球蚴原头节24、48、72、96、120、144和168 h后,显微镜下观察原头节形态,用台盼蓝染色,计算原头节存活率,组间存活率的比较采用方差分析。药物处理多房棘球蚴囊泡36 h和120 h后,显微镜下观察囊泡的形态学改变,测定培养上清液中碱性磷酸酶的活性,组间酶活性的比较采用卡方分析。结果氯舒隆、奥硝唑和阿苯达唑作用于原头节后,原头节颜色变深、钙颗粒减少、头钩脱落、头节外翻并伸长,0.2%DMSO对原头节形态无影响。氯舒隆、臭硝唑和阿苯达唑作用24、48、72、96、120、144和168 h后,原头节存活率分别为79%、70%、56%、42%、33%、16%、15%,86%、67%、63%、48%、32%、28%、21%和85%、71%、45%、36%、21%、15%、8%;0.2%DMSO组原头节存活率为100%。氯舒隆、奥硝唑和阿苯达唑组原头节存活率与0.2% DMSO组相比差异均有统计学意义(χ~2=147.83、130.58、170.37,P<0.05)。氯舒隆、奥硝唑和阿苯达唑作用后,多房棘球蚴囊泡均塌陷、皱缩,0.2%DMSO对多房棘球蚴囊泡形态无影响。作用36 h后氯舒隆、奥硝唑、阿苯达唑和0.2% DMSO组培养上清液碱性磷酸酶的吸光度(A405)值分别为0.196±0.030、0.186±0.004、0.244±0.049和0.131±0.020,作用120 h后分别为0.431±0.006、0.271±0.004、0.423±0.007和0.116±0.004。氯舒隆、奥硝唑和阿苯达唑组与0.2%DMSO组相比差异均有统计学意义(t=0.006、0.004、0.007,P<0.05)。结论氯舒隆和奥硝唑对体外培养的细粒棘球蚴原头节和多房棘球蚴均具有较强的作用,是潜在的抗棘球蚴药物。

原发眼眶细粒棘绦虫原头蚴病一例

原发眼眶细粒棘绦虫原头蚴病一例刘春玲刘丹阳罗清礼患者男，２９岁，右眼前凸１年，眼酸胀、视力下降半年，于１９９５年１２月２７日入院。患者有与犬接触史，家族中无类似病史。体检全身无异常发现。眼部检查：右眼视力０．５，左眼０．７。右眼睑轻度肿胀，球结膜充血...

γ-射线对细粒棘球蚴原头节在小鼠体内生长的抑制作用

目的探讨γ-射线对细粒棘球蚴原头节生长的抑制作用。方法在体外培养的基础上,利用不同剂量的γ-射线对细粒棘球蚴原头节进行照射,并将照射后的原头节种植于小白鼠腹腔,4个月后进行剖腹观察,对不同照射剂量组(分别为10 Gy、20 Gy、40 Gy、80 Gy)原头节种植后所形成棘球蚴的发生情况、重量、组织结构进行分析,并与不照射(对照组)作对比。结果经过照射后,原头节种植于小白鼠腹腔后其棘球蚴发生率逐步降低,对照组为100%,10 Gy组为80.0%,20 Gy组为33.3%,40 Gy组为33.3%,80 Gy组为26.7%。剖腹称重后,各组棘球蚴重量中位数比较,10 Gy组(35.80 mg)、20 Gy组(0.00 mg)、40 Gy组(0.00 mg)及80 Gy组(0.00 mg)与对照组(157.80mg)相比,均明显下降,差异有统计学意义(P<0.001)。实验组所形成的棘球蚴发生钙化。结论γ-射线的照射可以抑制原头节形成棘球蚴,并可以导致所形成的棘球蚴结构破坏,加快棘球蚴坏死、钙化的转归过程。

细粒棘球蚴原头节mRNA测序及生物信息学初步分析

目的 利用RNA-seq技术对细粒棘球蚴原头节的转录组进行测序并对测序数据进行生物信息学分析,以揭示细粒棘球蚴原头节mRNA所包含的信息. 方法 用Trizol法提取原头节总RNA,分离mRNA,利用Illumina公司的HiSeq2000高通量测序仪对mRNA序列进行测序.参考英国桑格研究院（Wellcome Trust Sanger Institute）公布的细粒棘球绦虫基因组数据,对测序数据进行拼接组装,将获得的unigene与非冗余的蛋白序列数据库（non-redundant,Nr）、全球蛋白资源数据库（universal protein,UniProt）、基因本体数据库（gene ontology,GO）以及日本京都基因和基因组百科全书通路数据库（the kyotoencyclopedia of genes and genomes pathway,KEGG pathway）进行比对,获得该unigene的蛋白功能注释信息. 结果 测序后共获得132 007 609条读段（reads）,经过组装共形成91 342条unigene,平均长度为419 bp.通过GO分类注释,共有36 552个unigene获得了注释信息,分别归入到了生物学过程、分子功能、细胞组分3大类共计48个功能组.通过KEGG pathway的注释,有6 664条unigene注释到了KEGG上,参与了6大类生物过程中34个小类的代谢,共有227个代谢通路. 结论 获得了细粒棘球蚴原头节转录组相关信息,为棘球蚴病的后续研究提供了研究数据,积累了研究资料.