建立实时荧光定量逆转录PCR方法检测非小细胞肺癌棘皮动物微管相关蛋白4-间变淋巴瘤激酶融合基因

目的建立一种实时荧光定量逆转录PCR方法,对非小细胞肺癌间变淋巴瘤激酶(ALK)融合基因进行快速、敏感和特异检测。方法首先,应用Primer Premier 5.0软件,针对棘皮动物微管相关蛋白4(EML4)-ALK常见融合变异V1、V2、V3a和V3b设计引物和Taqman水解探针。然后,以包含EML4-ALK融合变异V1、V2、V3a和V3b的假病毒颗粒为研究对象,进一步分析所建立方法的灵敏度、敏感性和特异性。最后,用所建立的方法检测50例非小细胞肺癌临床标本,其中包含3例ALK-荧光原位杂交(FISH)(+)样本。结果在无背景RNA干扰情况下,建立的实时荧光定量逆转录PCR方法检测灵敏度高达10拷贝/!l。在500拷贝/!l的野生型背景RNA下,其敏感性达1%,在5000拷贝/!l的野生型背景RNA下,其敏感性达0.5%。对于检测特异性,以正常人白细胞及血浆RNA为研究对象,均未见非特异性扩增。对50例非小细胞肺癌临床标本进行检测,47例阴性标本检测均为阴性,3例ALK-FISH(+)标本2例检测阳性,1例未检出,未检出原因与标本RNA提取失败有关。结论本研究建立的实时荧光定量逆转录PCR方法是一种快速、简便以及具有高灵敏度和特异性的EML4-ALK融合基因检测方法,值得在临床进一步验证和推广。

表皮生长因子受体和Kirsten鼠肉瘤基因及棘皮动物微管相关类蛋白4-间变性淋巴瘤激酶融合基因突变在肺腺癌组织中的表达及其临床意义

目的评估表皮生长因子受体(EGFR)基因、Kirsten鼠肉瘤(KRAS)基因及棘皮动物微管相关类蛋白4-间变性淋巴瘤激酶(EML4-ALK)融合基因3种肿瘤驱动基因在肺腺癌组织中的表达并分析其临床意义。方法收集2014年1月至2017年8月在新疆维吾尔自治区人民医院行手术确诊并术后行EGFR、KRAS基因及EML4-ALK融合基因突变检测的172例肺腺癌患者的肺腺癌组织标本。分析3种肿瘤驱动基因突变与临床相关指标的关系。结果 172例患者中共检测到EGFR基因突变者66例(38.4%),病理分型腺泡型、乳头型及贴壁性,年龄≤60岁、女性、男性未吸烟或轻度吸烟、高分化和中分化患者EGFR基因突变率较高(均P<0.05);共检测到KRAS基因突变者39例(22.7%),病理分型实体性以及微乳头型、年龄>60岁、男性、重度吸烟者、低分化患者KRAS基因突变率较高(均P<0.05);共检测到EML4-ALK融合基因突变14例(8.1%),年龄≤60岁、男性未吸烟和轻度吸烟、高分化和中分化患者EML4-ALK融合基因突变率较高(均P<0.05),EML4-ALK融合基因突变与患者病理分型和性别无关(均P>0.05)。172例肺腺癌患者中,1例患者出现EGFR基因与EML4-ALK基因共同突变,1例患者出现KRAS基因与EML4-ALK基因共同突变,未出现EGFR基因与KRAS基因共同突变。结论患者病理分型、年龄、性别、吸烟状况及肿瘤分化程度与3种肿瘤驱动基因突变有一定的关系,3种肿瘤驱动基因在肺腺癌中很少共同突变。多基因联合作用的肺腺癌患者的抗肿瘤靶向治疗需要更多的研究为临床提供理论依据。

棘皮动物微管相关类蛋白4-间变性淋巴瘤激酶与耐药性非小细胞肺癌研究进展

非小细胞肺癌（NSCLC）是肺部恶性肿瘤中最常见的病理类型，占肺癌总数的85%,由于其起病隐匿，多数NSCLC患者明确诊断时已处于中晚期，已失去手术治疗机会， 而目前以铂类为主的联合标准化疗方案因不良反应多、有效率有限，使得晚期NSCLC患者治疗较为棘手。随着近年来对恶性肿瘤分子生物学的不断深入研究，以表皮生长因子受体 （EGFR）酪氨酸激酶抑制剂（TKI）为代表的分子靶向精准治疗成为中晚期NSCLC患者的最佳选择，然而部分NSCLC患者EGFR基因检测阴性或对EGFR-TKI无效或耐药，因此，尚需进一步探 寻耐药性NSCLC的有效治疗策略。

老年急性脑出血并癫痫患者血清中血管生成素样蛋白4和微小RNA-124蛋白表达水平及其临床意义

目的 分析血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)、微小RNA-124(miR-124)在老年急性脑出血并发癫痫患者中的表达及其临床意义。方法 选取2020年1月至2022年1月首都医科大学附属北京地坛医院顺义院区收治的72例急性脑出血并发癫痫患者为急性脑出血并发癫痫组,另选取同期收治的单纯急性脑出血患者50例为急性脑出血组,健康体检的健康志愿者50例为对照组。检测各组血清ANGPTL4水平、miR-124 mRNA表达量。结果 与对照组比较,急性脑出血组、急性脑出血并发癫痫组ANGPTL4水平较高,miR-124 mRNA表达量较低(P<0.05);与急性脑出血组比较,急性脑出血并发癫痫组ANGPTL4水平较高,miR-124 mRNA表达量较低(P<0.05)。ANGPTL4与癫痫严重程度、认知障碍、脑卒中史呈正相关,miR-124与癫痫严重程度、认知障碍、脑卒中史呈负相关(P<0.05)。多因素logistic回归分析,结果显示认知障碍、脑卒中史、ANGPTL4、miR-124为影响老年急性脑出血并发癫痫的危险因素。ROC曲线显示,ANGPTL4、miR-124联合检测对老年急性脑出血并发癫痫的预测价值高于单项检测预测(P<0.05)。结论 老年急性脑出血并发癫痫患者ANGPTL4表达较高,miR-124表达较低;ANGPTL4、miR-124与患者癫痫严重程度、认知障碍、脑卒中史相关,且两项联合检测对老年急性脑出血并发癫痫的预测价值较高。

Toll样受体4激动剂LPS腹腔注射对大鼠心肌缺血再灌注损伤的预防作用及其作用机制

目的 探讨Toll样受体4(TLR4)激动剂LPS腹腔注射对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的预防作用及其作用机制。方法 将60只大鼠根据随机数字表法分为LPS干预组(0.1 mg/kg、0.5 mg/kg、1 mg/kg,均为小剂量)、维拉帕米干预组、模型组、假手术组,每组15只。构建MIRI模型前7 d,LPS干预组给予0.1 mg/kg、0.5 mg/kg、1 mg/kg LPS腹腔注射,维拉帕米干预组给予2.5%维拉帕米(2 mg/kg)腹腔注射,假手术组与模型组给予等容量生理盐水腹腔注射;均每日1次。然后,除假手术组外,其余组大鼠进行缺血再灌注处理。处理后72 h,采用超声检测各组大鼠心功能,苏木精—伊红(HE)染色观察各组大鼠心肌组织病理学变化,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测算各组大鼠心肌梗死面积;采用Western blotting法检测大鼠心肌组织FoxO3a、pFoxO3aS253、Beclin-1及LC蛋白。结果 与假手术组比较,模型组大鼠左心室射血分数(LVEF)、短轴缩短率(LVFS)减小(P均<0.05);心肌损伤严重,心肌梗死面积百分比升高(P均<0.05);心肌组织中pFoxO3aS253蛋白相对表达量降低(P<0.05),FoxO3a、Beclin-1、LC蛋白相对表达量升高(P均<0.05)。与模型组比较,维拉帕米干预组及LPS干预组大鼠LVEF、LVFS增加(P均<0.05);0.1 mg/kg及0.5 mg/kg LPS干预组大鼠心肌病变改善不明显,维拉帕米干预组和1 mg/kg LPS干预组大鼠心肌纤维水肿、断裂、坏死及炎细胞浸润程度均减轻;维拉帕米干预组及LPS干预组大鼠心肌梗死面积百分比降低(P均<0.05),pFoxO3aS253蛋白相对表达量升高(P均<0.05),FoxO3a、Beclin-1、LC蛋白相对表达量下降(P均<0.05)。结论 小剂量TLR4激动剂LPS可预防大鼠MIRI,其作用机制可能与促使FoxO3a磷酸化及抑制Beclin-1、LC激活有关。

LILRB4在肿瘤微环境中的作用及其在肿瘤治疗中的应用进展

人类白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)是一种免疫抑制性受体,正常生理情况下,其在单核细胞、巨噬细胞及树突状细胞上表达。LILRB4在多种肿瘤组织中的肿瘤细胞及巨噬细胞、自然杀伤细胞等免疫细胞中的表达高于相应正常组织,能够影响肿瘤细胞的生物学行为及肿瘤免疫微环境,显著促进肿瘤进展,且LILRB4的肿瘤免疫治疗显示出良好的疗效。该文对LILRB4在血液系统肿瘤、实体肿瘤中的表达与作用,以及靶向LILRB4治疗肿瘤的策略进行综述。

CXCR4 MFAP2 KLF4在分化型甲状腺癌中的表达及对预后的预测价值研究

目的:研究趋化因子4受体(CXCR4)、微纤维相关蛋白2(MFAP2)、Krüppel样因子4(KLF4)在分化型甲状腺癌(DTC)中的表达及对预后的预测价值。方法:选择我院2019年7月至2020年7月收治的113例DTC患者,术中留取其肿瘤组织及癌旁正常组织。采用蛋白免疫印迹法检测DTC组织及癌旁正常组织中CXCR4、MFAP2、KLF4表达水平,分析CXCR4、MFAP2、KLF4表达水平与DTC临床病理特征的关系。对DTC患者进行3年随访,统计3年总生存情况,比较死亡组与存活组CXCR4、MFAP2、KLF4表达水平,采用ROC曲线分析CXCR4、MFAP2、KLF4对DTC预后的预测价值,采用Cox回归模型进行DTC预后单因素和多因素分析。结果:与癌旁正常组织比较,DTC组织CXCR4、MFAP2蛋白表达量显著升高(P<0.05),KLF4蛋白表达量显著降低(P<0.05)。TNM分期Ⅲ期、发生淋巴结转移、肿瘤低分化者CXCR4、MFAP2蛋白表达量显著高于TNM分期Ⅰ+Ⅱ期、未发生淋巴结转移、肿瘤中高分化者(P<0.05),TNM分期Ⅲ期、发生淋巴结转移、肿瘤低分化者KLF4蛋白表达量显著低于TNM分期Ⅰ+Ⅱ期、未发生淋巴结转移、肿瘤中高分化者(P<0.05)。113例DTC患者随访3年期间失访8例,最终获得随访者105例。死亡组患者CXCR4、MFAP2蛋白表达量显著高于存活组(P<0.05),KLF4蛋白表达量显著低于存活组(P<0.05)。绘制ROC曲线发现,CXCR4、MFAP2、KLF4单独或联合预测DTC预后的AUC(95%CI)分别为0.692(0.562~0.823)、0.729(0.590~0.869)、0.766(0.622~0.910)、0.832(0.690~0.975),联合预测的效能显著优于单项检测(P<0.05)。Cox回归分析显示,淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期、肿瘤低分化、CXCR4表达升高、MFAP2表达升高、KLF4表达降低是DTC预后的危险因素(P<0.05)。结论:分化型甲状腺癌患者肿瘤组织中CXCR4、MFAP2呈高表达,KLF4呈低表达,其表达水平与淋巴结转移、肿瘤分化程度、TNM分期及3年总生存率相关,三者联合检测有助于预测分化型甲状腺癌预后。

非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变和EML4-ALK融合基因表达的研究

目的研究广西地区非小细胞肺癌（NSCLC）表皮生长因子受体（EGFR）基因突变和棘皮动物微管相关类蛋白4与间变性淋巴瘤激酶（EML4-ALK）融合基因表达的情况。方法分别采用扩增耐突变系统（ARMS-PCR）法和实时荧光定量PCR扩增检测119例NSCLC患者EGFR基因外显子18~21的突变和9种EML4-ALK融合突变体,同时分析其与临床病理特征的关系。结果 119例NSCLC患者共检出44例EGFR基因突变,检出率为37.0%,检出7例EML4-ALK融合基因阳性表达,检出率为5.9%。其中EGFR基因突变主要见于腺癌、女性、不吸烟患者;EML4-ALK融合基因表达可能与不吸烟有关,而在性别、年龄、肿瘤病理类型、淋巴转移方面比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;EGFR基因突变与EML4-ALK融合基因不共存。结论广西地区NSCLC患者的EGFR基因突变率与EML4-ALK融合基因阳性表达率与中国其他地区总体水平接近,均具有一定临床病理特征。

Ⅳ期维吾尔族NSCLC患者EML4-ALK、EGFR基因突变状态及生存分析

目的探讨棘皮动物微管样蛋白4-间变淋巴瘤激酶(EML4-ALK)和表皮生长因子受体(EGFR)基因突变状态与未经系统酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)治疗的Ⅳ期维吾尔族非小细胞肺癌(NSCLC)患者长期生存的关系。方法收集97例未经TKIs治疗的Ⅳ期维吾尔族NSCLC患者的组织标本,分别运用FISH及ARMS方法检测EML4-ALK基因融合及EGFR基因突变状态并进行生存分析。结果 97例Ⅳ期维吾尔族NSCLC组织中,6例(6.2%)存在EML4-ALK基因融合,26例(26.8%)存在EGFR基因突变。生存分析显示,EML4-ALK基因融合患者与EML4-ALK基因未融合患者总生存期(OS)差异无统计学意义(P=0.941),EGFR基因突变患者与EGFR野生型患者OS比较差异无统计学意义(P=0.607)。EGFR/EML4-ALK综合突变对Ⅳ期维吾尔族NSCLC患者长期生存发现,EGFR突变型组、EML4-ALK阳性组、EML4-ALK阴性+EGFR野生型组患者中位OS分别为17.7、17.3、16.2个月,差异无统计学意义(P=0.915)。结论在排除TKIs治疗影响的情况下,EML4-ALK融合基因与EGFR基因突变状态尚不能作为评估Ⅳ期维吾尔族NSCLC患者预后的独立因素。

炎症微环境中HMGB1表达变化对肺癌细胞生物学行为的影响

目的探讨炎症微环境中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达变化对肺癌细胞生物学行为的影响。方法选择支气管上皮细胞HBE(以下称HBE细胞),构建氧糖剥夺/复氧模型,将其分为空白对照组、阴性对照组、HMGB1组。阴性对照组、HMGB1组分别转染阴性对照siRNA和HMGB1 siRNA,空白对照组不予转染。经验证成功下调了HBE细胞HMGB1表达。取氧糖剥夺/复氧培养的HBE细胞与人肺腺癌细胞A549(以下称A549细胞),于共培养装置上下层中共培养,上层细胞分组及转染方法同上。各组转染6 h再培养48 h,收集A549细胞,制成细胞悬液。细胞悬液培养6、12、24、48、72时,采用MTT法检测各组A549细胞增殖能力。细胞悬液培养24时,采用流式细胞术检测各组A549细胞凋亡率和细胞周期,采用Western blotting法检测各组Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)蛋白表达。结果 HMGB1组培养6、12、24、48、72 h A549细胞增殖能力均低于阴性对照组和空白对照组(P均<0.05),而阴性对照组与空白对照组比较P均>0.05。HMGB1组A549细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组(P均<0.05),而阴性对照组与空白对照组比较P>0.05。HMGB1组G0/G1期、S期细胞所占比例均高于阴性对照组和空白对照组(P均<0.05),G2/M期细胞所占比例低于阴性对照组和空白对照组(P均<0.05),而阴性对照组与空白对照组比较P均>0.05。HMGB1组TLR4、NF-κB相对表达量明显低于阴性对照组和空白对照组(P均<0.05),而阴性对照组与空白对照组比较P均>0.05。结论下调炎症微环境中HMGB1表达可抑制肺癌细胞增殖并促进其凋亡;HMGB1可能通过TRL4信号通路抑制NF-κB下游信号通路,导致肿瘤细胞逃脱免疫监视。

EGFR与EML4-ALK基因突变共存型非小细胞肺癌1例

近年来,驱动基因是非小细胞肺癌（NSCLC）研究的热点,尤其在肺腺癌,已经取得了可喜的成果。其中表皮生长因子受体（EGFR）、棘皮动物微管样蛋白4-间变淋巴瘤激酶（EML4-ALK）及K-Ras等基因的研究结果逐渐改变了人们对NSCLC发生、发展生物学本质的认识,针对上述靶点的靶向干预,可以说是NSCLC治疗史上一个重要＂里程碑＂。

慢性阻塞性肺疾病合并非小细胞肺癌与EML4-ALK融合基因的关系

目的探究慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并非小细胞肺癌(NSCLC)与棘皮动物微管相关蛋白样4-间变淋巴瘤激酶(EML4-ALK)融合基因的关系。方法选取COPD合并NSCLC患者70例为COPD合并NSCLC组,另选取同期收治的单纯COPD患者70例为单纯COPD组,分别采集手术治疗过程中肺癌组织及COPD患者正常肺组织,采用免疫组化法分析EML4-ALK蛋白的表达,采用logistic回归分析影响COPD合并NSCLC患者发生的危险因素。结果单纯COPD组、COPD合并NSCLC组患者性别、年龄、体质指数(BMI)比较,差异无统计学意义(P>0.05);与单纯COPD组比较,COPD合并NSCLC组患者吸烟人数比例、PASP水平、EML4-ALK蛋白阳性表达率较高,FEV1、FEV1/FVC水平较低(P<0.05)。肺癌组织中EML4-ALK蛋白阳性表达与COPD合并NSCLC患者年龄、性别、肿瘤最大径、分化程度无关(P>0.05),与吸烟史、组织学类型、TNM分期及淋巴结转移有关(P<0.05)。FEV1/FVC指标降低、吸烟、EML4-ALK蛋白阳性表达是影响COPD合并NSCLC患者发生的危险因素(OR=1.694,95%CI:1.375~2.087;OR=2.013,95%CI:1.682~2.409;OR=3.249,95%CI:2.346~4.450;P<0.05)。结论肺癌组织中EML4-ALK蛋白阳性表达率较高与COPD合并NSCLC吸烟史、组织学类型、TNM分期及淋巴结转移有关,是影响COPD合并NSCLC发生的独立危险因素。

非小细胞肺癌恶性胸水中癌细胞EML4-ALK重排检测及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者恶性胸水(MPE)中癌细胞EML4-ALK基因重排的可行性及与其病理特征之间的关系。方法选取138例伴有MPE的NSCLC患者,用瑞氏染色法鉴定MPE中的癌细胞,用免疫组织化学法鉴定肿瘤组织中EML4-ALK基因重排,运用微流控芯片技术检测NSCLC患者MPE中癌细胞,采用荧光染色法确定癌细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测ALK基因重排状态。结果在138例NSCLC患者中,肿瘤组织免疫组织化学(IHC)染色有10例EML4-ALK基因阳性,qRT-PCR检测到10例EML4-ALK融合基因重排。IHC和qRT-PCR的一致性为100%,两者敏感性和特异性均为100%。ALK基因重排状况与患者EGFR突变等差异有统计学意义(P<0.05),而与病理分型、原发部位、临床分期及淋巴结转移等差异无统计学意义(P>0.05)。结论 qRT-PCR检测NSCLC患者MPE中癌细胞EML4-ALK融合基因是筛选ALK基因重排方法的一种补充,值得在临床中推广。

非小细胞肺癌EGFR基因突变与EML4-ALK融合基因的表达及其临床病理特征

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)、动物微管相关蛋白4-间变性淋巴瘤激酶(EML4-ALK)融合基因表达及其临床病理特征。方法收集病理确诊的NSCLC患者213例,采用扩增阻滞突变系统(ARMS)检测EGFR基因的突变状态,RT-PCR法检测EML4-ALK融合基因表达情况,分析突变与临床病理特征的关系。结果 EGFR基因突变率为25.35%,女性、腺癌、非吸烟患者突变率显著较高(P<0.05)。EML4-ALK融合基因表达率为2.82%,女性、腺癌、60岁以下非吸烟人群突变率显著较高(P<0.05)。未发现两个基因共同突变的病例。结论 NSCLC患者存在EGFR基因、EML4-ALK融合基因突变,均以女性、腺癌、非吸烟者表达较高。

EML4-ALK在非小细胞肺癌中的表达及检测

非小细胞肺癌(NSCLC)为当今最常见的恶性肿瘤之一,近年来我国肺癌的发病率和病死率增长迅速,已居癌症相关死亡首位。分子靶向治疗已成为晚期NSCLC治疗的研究热点之一,靶向药物如何针对性地用于患者的治疗是关键。棘皮动物微管结合蛋白4(EML4)与间变淋巴瘤激酶(ALK)形成的融合基因主要表达于NSCLC中,这可能是与NSCLC表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂耐药相关的新靶点。

转化生长因子β受体Ⅱ在EML4-ALK融合基因阳性肺腺癌患者肿瘤组织中的表达及其对H3122细胞侵袭力的影响

目的探讨转化生长因子β受体Ⅱ(TGFβRⅡ)在棘皮动物微管相关蛋白4-间变性淋巴瘤激酶(EML4-ALK)融合基因阳性肺腺癌患者肿瘤组织中的表达及对人EML4-ALK阳性肺腺癌细胞H3122侵袭力的影响。方法纳入EML4-ALK阳性肺腺癌患者18例,其中ⅠA期11例,ⅢA期7例,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测患者肺癌组织中TGFβRⅡmRNA的表达量。构建TGFβRⅡ沉默质粒(TGFβRⅡ-shRNA)及阴性对照(NC-shRNA)质粒,进行慢病毒包装后转染H3122细胞,并将转染TGFβRⅡ-shRNA、NC-shRNA质粒的细胞设为LV-shRNA-TGFβRⅡ-H3122组、LV-shRNA-GP-H3122组,测定两组细胞的侵袭能力。结果ⅠA期与ⅢA期肺腺癌组织的TGFβRⅡmRNA相对表达量差异无统计学意义(P>0. 05)。LV-shRNA-TGFβRⅡ-H3122组通过Transwell的细胞数多于LV-shRNA-GP-H3122组(P <0. 05)。结论 TGFβRⅡmRNA在早期与中晚期EML4-ALK阳性肺腺癌组织中的表达无明显差异,但沉默TGFβRⅡ基因后EML4-ALK阳性肺腺癌细胞侵袭性明显增强。

阿司匹林调节miR-340-5p/HMGB1/TLR4通路对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响

目的探讨阿司匹林(Asp)通过调节微RNA-340-5p(miR-340-5p)/高迁移率族蛋白1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)通路对大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的影响。方法将雄性SD大鼠分为假手术(Sham)组(开胸不结扎)、I/R组(构建I/R损伤模型)、Asp预处理(I/R+Asp)组(Asp预处理7 d+造模)、I/R+Asp+in-miR-340-5p组[Asp预处理7 d+提前转染miR-340-5p抑制物+造模]和I/R+Asp+HMGB1组(Asp预处理7 d+提前转染过表达HMGB1+造模),每组20只。检测各组大鼠心肌损伤指标(乳酸脱氢酶、肌酸激酶同工酶MB、心肌肌钙蛋白Ⅰ)、炎症和氧化应激指标(髓过氧化物酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、丙二醛)水平,观察其心肌组织病理改变,检测其心肌梗死面积、细胞凋亡情况以及心肌组织中miR-540-5p和HMGB1、TLR4蛋白的表达情况;以大鼠心肌细胞H9C2为对象,考察miR-340-5p与HMGB1的靶向关系。结果Asp预处理可显著抑制I/R损伤模型大鼠血清心肌损伤指标水平的升高,可减轻炎症反应、抑制氧化应激反应、缩小心肌梗死面积并减少细胞凋亡,可显著上调miR-340-5p的表达并下调HMGB1、TLR4蛋白的表达(P<0.05);抑制miR-340-5p或过表达HMGB1均可逆转Asp的上述保护作用(P<0.05)。细胞实验结果显示,miR-340-5p可靶向负调控HMGB1的表达(P<0.05)。结论Asp可通过调节miR-340-5p/HMGB1/TLR4通路来减轻大鼠炎症反应和氧化应激,减少心肌组织中的细胞凋亡,进而发挥对心肌I/R损伤的保护作用。

EML4-ALK融合基因异形及其相关耐药性的研究进展

肺癌的发病率及病死率较高,以年轻非吸烟女性易患为特点,其中肺腺癌占非小细胞肺癌的50%以上。由棘皮动物微管相关蛋白样4(EML4)和间变淋巴瘤激酶(ALK)融合成的EML4-ALK是肺腺癌最具有特点的致癌基因。随着对分子学认识的加深,目前发现了约17种EML4-ALK融合异形,不同的融合异形具有不同的分子结构,结构的差异决定着融合异形的作用,目前关于不同融合异形是否会影响分子靶向药物疗效的研究较少,且结论尚不统一。

山东地区非小细胞肺癌分子靶向治疗驱动基因表达情况及临床特征分析

背景与目的分子生物学靶向治疗已逐渐成为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的一个重要治疗手段,本研究通过分析山东地区NSCLC多种驱动基因表达情况及临床病理特征,为筛选分子靶向治疗目标人群提供理论依据。方法采用荧光探针PCR法检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、棘皮动物微管相关蛋白4-间变性淋巴瘤激酶(echinoderm microtubule-associated protein-like 4-anaplastic lymphoma kinase,EML4-ALK)、肉瘤致癌因子-受体酪氨酸激酶(ROS proto-oncogene 1,receptor tyrosine kinase,ROS1)、鼠类肉瘤病毒癌基因(Kirsten rat sarcoma viral oncgene,KRAS)基因表达情况,回顾性分析阳性病例的临床病理特征。结果 EGFR基因突变阳性率为36.70%,主要为19、21外显子突变,突变人群主要为女性、腺癌、不吸烟患者,组间差异有统计学意义。EML4-ALK融合基因重排阳性率为9.37%。人群特征主要为60岁以下不吸烟人群,组间差异有统计学意义,基因突变与病理类型和性别间无明显差异。ROS1融合基因重排阳性率为3.67%,均为60岁以下患者,组间差异有统计学意义。23份病例标本开展KRAS基因检测,阳性标本数2例,阳性率为8.70%。2份阳性标本均为60岁以上病例,男女各占1例,病理类型均为腺癌,均无吸烟史。此外,未发现有两种基因同时突变的病例。结论 EGFR、EML4-ALK、ROS1、KARS基因在NSCLC患者中存在较高的突变率,且具有不同的人群特征,在选择靶向治疗人群中具有重要意义。

分子靶向治疗在非小细胞肺癌中的研究进展

肺癌以发病率高、死亡率高、5年生存率低位居全球癌症死亡原因的首位，而非小细胞肺癌占肺癌的80％～90％［1］，其中腺癌约占38％［2］，已超过鳞癌成为最常见的病理类型。迄今为止非小细胞肺癌最有效的根治方式是外科手术，然而约3／4患者初诊时已处于癌症晚期，失去了外科手术的机会。因此，含铂两药化疗是标准一线治疗方案，但其仅能使晚期非小细胞肺癌患者死亡率下降26％～32％，5年生存率＜1％［3］。