低分子肝素及胚胎植入前非整倍体检测对不明原因复发性流产患者妊娠结局的影响

目的:比较行胚胎植入前非整倍体检测(PGT-A)助孕和未行PGT-A助孕的不明原因复发性流产(URSA)患者应用低分子肝素(LMWH)后临床结局的差异。方法:回顾分析2016年1月1日至2022年5月17日URSA患者于郑州大学第三附属医院生殖医学科首次移植冷冻囊胚共1158个周期的临床资料,按移植前是否行PGT-A分为PGT-A组(行PGT-A+ICSI,315例)和非PGT-A组(行IVF/ICSI,843例),再根据移植日是否使用LMWH分为肝素组和非肝素组,为调整混杂因素进行1∶5倾向性评分匹配(PSM),对PSM后患者数据进行分析,比较两组患者种植率、临床妊娠率、流产率、早期流产率、活产率及单胎活产围产结局的差异。对非PGT-A组和PGT-A组PSM前数据、肝素PGT-A组和肝素非PGT-A组临床妊娠结局进行多因素logistic回归分析。结果:非PGT-A组中,肝素组和非肝素组的不孕年限差异有统计学意义(P<0.05),种植率(33.8%vs 32.1%,P=0.610)、临床妊娠率(45.4%vs 43.8%,P=0.733)、流产率(28.0%vs 28.4%,P=0.958)、早期流产率(23.8%vs 25.4%,P=0.797)、活产率(31.9%vs 30.1%,P=0.671)比较差异无统计学意义(P>0.05)。PGT-A组中,肝素组和非肝素组的女方体质量指数(BMI)比较差异有统计学意义(P<0.05),种植率(59.8%vs 57.6%,P=0.763)、临床妊娠率(59.4%vs 57.6%,P=0.806)、流产率(20.4%vs 14.7%,P=0.448)、早期流产率(16.4%vs 14.7%,P=0.803)、活产率(46.9%vs 49.2%,P=0.752)比较差异无统计学意义(P>0.05)。非PGT-A组中,肝素组和非肝素组内获得单胎活产患者的围产期结局比较差异均无统计学意义(P>0.05);PGT-A组中,肝素组较非肝素组小于胎龄儿(10.3%vs 0.8%,P=0.023),差异有统计学意义(P<0.05),余获得单胎活产患者的围产期结局差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:行PGT-A助孕和未行PGT-A助孕的URSA患者应用LMWH并不能改善其妊娠结局,且行PGT-A助孕应用LMWH患者的围产期小于胎龄儿发生风险显著升高。

胚胎植入前非整倍体检测:囊胚形态学评分有指导作用吗?

目的评价囊胚形态学评分在PGT-A周期中的指导作用。方法回顾性分析2019年1~12月在本中心行PGT-A检查的474枚囊胚的形态学评分及相关临床资料,按照活检时间不同分为D5组(204枚)和D6组(270枚),比较不同囊胚评级与整倍体率及活产率的关系;又将244枚BB级囊胚按照不同囊胚扩张程度分为<4期、4期和>4期3组,比较D5或D6活检时不同囊胚扩张程度对整倍体率和活产率的影响。结果474枚囊胚中,D5活检囊胚中,一般囊胚的整倍体率显著高于较差囊胚(56.59%vs.37.50%,P=0.025);D6活检囊胚中,一般囊胚的整倍体率亦显著高于较差囊胚(58.26%vs.37.24%,P=0.005)。通过PGT-A获得233枚整倍体胚胎,移植126枚,移植D5、D6各不同评级囊胚的活产率均无显著性差异(P>0.05)。244枚BB级囊胚中,D5活检的各扩张程度囊胚整倍体率无显著性差异(P>0.05);D6活检的扩张程度<4期囊胚整倍体率显著低于4期囊胚(25.00%vs.62.20%,P=0.026)。移植的72枚BB级整倍体囊胚中,移植D5、D6不同扩张程度囊胚亚组间活产率均无显著性差异(P>0.05)。结论对发育速度较慢(D6囊胚)、扩张程度<4期的较差囊胚[内细胞团(ICM)和滋养外胚层细胞(TE)评级低于BB级]进行PGT-A检测更具意义。经PGT-A筛查获得的整倍体胚胎,建议优先选择发育速度较快(D5囊胚)的整倍体胚胎进行移植。

生长激素预处理在胚胎植入前染色体非整倍体检测中的应用研究

目的研究生长激素(GH)预处理对整倍体的改善及妊娠结局的影响。方法前瞻性分析行胚胎植入前染色体非整倍体检测(PGT-A)助孕的134例患者,其中30例行自身对照,104例行组间对照。根据是否添加GH分为GH预处理组和GH非预处理组,GH预处理为促性腺激素(Gn)启动前行4~6周的GH 2 U/d皮下注射,Gn启动日剂量加倍直至扳机日,GH非预处理为未用过GH处理。前次PGT-A周期失败后一年内再次行PGT-A时予GH预处理构成自身对照组。组间对照和自身对照分别比较各组间的基本情况、囊胚情况及助孕结局。结果无论组间对照还是自身对照,GH预处理后的HCG日子宫内膜厚度、卵巢敏感指数(OSI)、获卵数、MII卵数、2PN数、2PN受精率、可利用卵母细胞率、活检囊胚数、整倍体囊胚数、整倍体囊胚率、至少一个整倍体率均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05),GH预处理后的Gn总量、Gn天数、嵌合体囊胚数、嵌合体囊胚率无明显变化,差异均无统计学意义,GH预处理后的种植率、临床妊娠率均有提高,但差异均无统计学意义。结论GH预处理可以明显增加行PGT-A患者的整倍体数和整倍体率,并有改善妊娠结局的趋势。

胚胎植入前非整倍体检测对不明原因复发性流产患者妊娠结局的影响

目的探讨胚胎植入前非整倍体检测(PGT-A)对不明原因复发性流产(URSA)患者妊娠结局及单胎活产围产期结局的影响。方法回顾性收集2019—2021年URSA患者于郑州大学第三附属医院生殖医学科全胚胎冷冻首次移植1枚囊胚共351个周期的临床资料,根据移植前是否行PGT-A分为两组,PGT-A组(160个周期)和对照组(191个周期)进行体外受精/卵胞浆内单精子显微注射(IVF/ICSI),为调整混杂因素将两组患者按1∶1比例进行倾向性评分匹配(PSM),匹配后PGT-A组98个周期和对照组98个周期,比较两组患者妊娠结局及单胎活产围产期结局。结果采用PSM前,PGT-A组女方年龄为(33.6±4.0)岁,低于对照组的(34.5±4.5)岁(P=0.049)。PGT-A组男方年龄为(33.6±4.1)岁,低于对照组的(35.3±5.1)岁(P<0.001)。两组间不孕因素、女方体质指数、不孕年限、自然流产次数、基础卵泡刺激素、移植日子宫内膜厚度及优质囊胚占比差异均有统计学意义(均P<0.05)。采用PSM后,两组间授精方式、不孕因素差异均有统计学意义(均P<0.05),其他差异均无统计学意义(均P>0.05);两组间种植率[63.3%(62个周期)比49.0%(48个周期),P=0.044]、临床妊娠率[63.3%(62个周期)比49.0%(48个周期),P=0.044]、活产率[42.9%(42个周期)比28.6%(28个周期),P=0.037]差异均有统计学意义。PGT-A组与对照组获得单胎活产患者的围产期结局差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论URSA患者行PGT-A助孕与行常规IVF/ICSI助孕相比种植率、临床妊娠率以及活产率提高;PGT-A能改善URSA患者妊娠结局,但并不能改善单胎活产患者的围产期结局。

胚胎植入前染色体非整倍体检测在不同适应证中的助孕结局分析

目的 分析胚胎植入前染色体非整倍体检测(PGT-A)在不同适应证中的助孕结局。方法 回顾性分析PGT-A助孕的549对夫妻,按PGT-A适应证分6组,反复妊娠丢失(304例)、反复种植失败(57例)、高龄(38岁及以上,80例)、不良妊娠史(绒毛染色体三体或不良妊娠,24例)、男性因素不育(67例)、性染色体数目异常(17例),比较基本情况、获卵及胚胎活检情况、妊娠结局。结果 各组之间平均年龄、促性腺激素(Gn)使用天数差异有统计学意义(P<0.001)。各组之间平均获卵数、优质胚胎率、嵌合胚胎率、异常胚胎率、胚胎活检正常率及平均卵巢敏感性指数(OSI)差异有统计学意义(P=0.03、P<0.001、P=0.03、P<0.001、P<0.001、P<0.001);高龄组异常胚胎率在6组中最高,平均获卵数、平均OSI及胚胎活检正常率最低。6组每取卵周期临床妊娠率及持续妊娠率、累积妊娠率差异有统计学意义(P<0.001),6组每移植周期临床妊娠率及持续妊娠率、除男性因素不育组外其余5组之间累积妊娠率差异无统计学意义。结论 PGT-A可检出整倍体胚胎移植,提高妊娠效率;高龄人群有正常胚胎移植,也可获得较好的妊娠率,可能缩短其“抱婴回家”时间。同时,PGT-A可大幅提高因男性因素不育人群的妊娠结局。

胚胎植入前遗传学非整倍体检测在高龄和复发性流产患者中的应用

目的探究体外受精胚胎行植入前遗传学非整倍体检测(PGT-A)是否有助于改善高龄和复发性流产(RPL)患者的临床结局。方法本研究回顾性分析总结2017年1月至2019年6月来解放军总医院第六医学中心妇产科辅助生殖中心行PGT-A和未行PGT-A的相关病例。行PGT-A的116例患者共132个单囊胚冻融移植周期,其中高龄(≥35岁)患者74例,共完成85个冻融移植周期;RPL患者66例,共完成78个冻融移植周期。未行PGT-A的202例患者共216个单囊胚冻融移植周期,其中高龄(≥35岁)患者119例,共完成124个冻融移植周期;PRL患者23例,共完成32个冻融移植周期。根据女方年龄分为年龄≥38岁,年龄35~37岁,年龄<35岁3组。结果在年龄≥38岁组中,PGT-A可显著提高患者的临床妊娠率(P<0.01)和活产率(P<0.01),流产率有所下降但无统计学差异(P>0.05)。PGT-A并不能改善35~37岁和年龄<35岁组的临床结局。在RPL患者中,行PGT-A可降低早期流产率(P<0.05)和生化妊娠损失率(P<0.05),临床妊娠率和活产率有所升高但差异无统计学意义(P>0.05)。结论辅助生殖技术中,PGT-A有改善年龄大于38岁高龄患者妊娠结局的潜力,并能够降低RPL患者的早期流产率,减少妊娠损失。

不同授精方式的冷冻囊胚行植入前遗传学筛查的临床结局比较

目的:比较IVF和ICSI两种授精方式产生的冻胚活检结果、妊娠结局及其对后代的影响。方法:根据冷冻囊胚授精方式将患者分为IVF组和ICSI组,比较两组囊胚冷冻复苏后的存活率、遗传学检测结果、妊娠及子代出生结局。结果:IVF组的平均年龄显著高于ICSI组,差异有统计学意义[(35.53±4.23)岁vs(33.95±3.75)岁,P=0.003]。IVF组和ICSI组的解冻后囊胚存活率(第一次解冻存活率:98.86%vs 98.74%,P=0.77;第二次解冻存活率:99.18%vs 100%,P=1.000)、囊胚整倍体率(46.45%vs 47.01%,P=0.874)、移植后临床妊娠率(63.07%vs 56.25%,P=0.246)以及活产率(47.87%vs 40.91%,P=0.271)等比较,差异均无统计学意义。IVF组和ICSI组的妊娠期并发症(17.82%vs 27.78%,P=0.203)、围产期并发症(1.98%vs 2.78%,P=0.779)以及新生儿合并症(0.99%vs 5.56%,P=0.108)发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在冻胚活检中,无论是IVF来源的囊胚还是ICSI来源的囊胚,均显示出相似的临床结局。

胚胎植入前非整倍体遗传学检测对高龄女性活产率的影响及相关因素分析

目的探讨胚胎植入前非整倍体遗传学检测(preimplantation genetic testing for aneuploidies,PGT-A)对高龄(≥38岁)女性妊娠结局的影响,并分析影响高龄女性PGT-A活产率的相关因素。方法采用回顾性队列研究纳入2019年1月–2023年6月行PGT-A助孕的高龄女性患者首次取卵周期,采用倾向性评分匹配同期行体外受精/卵母细胞浆单精子注射(in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection,IVF/ICSI)助孕的高龄患者首次取卵周期作为对照组(非PGT-A组),PGT-A组与非PGT-A组各纳入193周期,随访至2024年1月,其中2019年1月–2022年10月间进行的取卵周期均完成活产随访。比较两组间临床妊娠结局,主要结局指标为每取卵周期累积活产率,次要结局指标为每取卵周期累积临床妊娠率、自然流产率。纳入PGT-A组完成活产随访的145周期,采用二元logistic回归分析和受试者工作特征(ROC)曲线分析影响其活产率的相关因素。结果两组完成活产随访周期分别为:PGT-A组145周期、非PGT-A组161周期,PGT-A组每取卵周期累积活产率为25.52%(37/145),非PGT-A组为28.50%(46/161),两组差异无统计学意义。两组各193取卵周期中,PGT-A组有53周期、非PGT-A组有72周期获得临床妊娠,每取卵周期累积临床妊娠率差异有统计学意义(27.46%vs.37.31%,P<0.05)。临床妊娠中,PGT-A组自然流产率低于非PGT-A组,差异有统计学意义(7.55%vs.25.00%,P<0.05)。接受PGT-A助孕的高龄女性,女性年龄[比值比(OR)=0.786,95%置信区间(CI):0.635~0.973]、窦卵泡数量(antral follicle count,AFC)(OR=1.110,95%CI:1.013~1.216)与活产结局相关,随女性年龄增加及AFC减少,获得活产的概率下降,当女性年龄≥42岁或AFC≤8个,行PGT-A助孕预期活产结局差。结论PGT-A不影响高龄女性每取卵周期累积活产率,但可有效减少由于非整倍体胚胎所致植入失败及自然流产风险。对接受PGT-A助孕的高龄女性,年龄及AFC是影响活产结局的重要因素。

外源性促性腺激素用量对胚胎非整倍体率的影响

目的探讨外源性促性腺激素(Gn)用量对胚胎非整倍体率的影响。方法回顾性分析2016年1月至2019年6月在本中心基于二代测序技术的植入前非整倍体检测(PGT-A)周期患者的临床资料。根据年龄分为<37岁组、37~40岁组和>40岁组,并根据Gn累积使用量分为Gn<1500 U组(A组)、1500 U≤Gn≤3000 U组(B组)和Gn>3000 U组(C组),比较不同年龄组间以及同年龄组内三种Gn用量间的胚胎非整倍体率。结果三个年龄组胚胎非整倍体率分别为43.6%、61.0%、73.7%,组间有显著性差异(P<0.01);三个年龄组内,不同Gn用量组间的囊胚非整倍体率均无显著差异(P均>0.05)。结论在PGT-A周期中,年龄越大胚胎非整倍率越高;外源性Gn用量对胚胎非整倍体率无明显影响。

胚胎植入前非整倍体遗传学检测在中国东北地区高龄复发性流产患者中的应用价值

目的探讨胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)在高龄复发性流产(RSA)患者中的临床应用价值。方法收集2017年5月-2019年2月在沈阳市妇婴医院生殖中心行PGT-A助孕的RSA患者,根据年龄将患者分为A组(年龄>35岁)、Y组(年龄≤35岁)、A-SET组(行单囊胚解冻移植且未行PGT-A助孕的年龄>35岁的患者)及Y-SET组(行单囊胚解冻移植且未行PGT-A助孕的年龄≤35岁的患者)。分析行PGT-A患者胚胎的染色体非整倍性情况及各组患者胚胎移植后的临床结局。结果A组256枚胚胎扩增成功,染色体异常率为67.2%;Y组162枚胚胎扩增成功,染色体异常率为46.9%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。A组h CG阳性率(66.7%vs.42.3%)、临床妊娠率(66.7%vs.34.9%)及活产率(63.3%vs.33.3%)与A-SET组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);A组h CG阳性率(66.7%vs.60.6%)、临床妊娠率(66.7%vs.53.1%)及活产率(63.3%vs.51.2%)与Y-SET组比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论为获得整倍体胚胎和良好的临床结局,建议高龄女性在行体外受精-胚胎移植时结合PGT-A。

基于囊胚期活检的胚胎植入前非整倍体遗传学检测对高龄女性母婴结局的影响

目的探讨基于囊胚期活检的胚胎植入前非整倍体遗传学检测(preimplantation genetic testing for aneuploidies,PGT-A)对高龄女性妊娠结局及子代健康的影响。方法采用回顾性队列研究,选取2016年1月至2018年12月期间在北京大学第三医院妇产科生殖医学中心采用卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)后行PGT-A(记为PGT-A组)或单纯ICSI(记为对照组)助孕、年龄≥35岁、单囊胚解冻移植的患者。同时根据年龄进一步分为35~37岁亚组和≥38岁亚组。主要结局为活产,次要结局包括人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)阳性、临床妊娠、妊娠丢失、妊娠期糖尿病、妊娠期高血压、胎龄、早产、剖宫产、低出生体质量儿、巨大儿、小于胎龄儿及大于胎龄儿等。结果对于高龄患者,PGT-A组的活产率显著高于对照组[38.0%(89/234)比26.8%(237/885),OR(95%CI)=1.49(1.13~1.97),P=0.047],其流产率显著低于对照组[17.6%(19/108)比29.0%(116/443),OR(95%CI)=0.45(0.24~0.85),P=0.013]。≥38岁亚组患者PGT-A组的活产率[OR(95%CI)=3.01(1.67~5.44),P<0.001]、hCG阳性率[OR(95%CI)=2.08(1.25~3.47),P=0.005]、临床妊娠率[OR(95%CI)=2.39(1.40~4.07),P=0.001]均显著高于对照组,且PGT-A组的流产率显著低于对照组[OR(95%CI)=0.34(0.13~0.85),P=0.022];而35~37岁亚组患者,其妊娠结局在两组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。高龄女性的产科并发症及其新生儿结局发生情况在PGT-A组和对照组间差异均无统计学意义(均P>0.05),根据年龄进行的亚组分析也得出了一致结论。结论基于囊胚期活检的PGT-A可显著提高≥38岁患者在单囊胚解冻移植周期中的hCG阳性率、临床妊娠率及活产率,并显著降低流产率,但并未显示PGT-A对35~37岁患者的妊娠结局有改善效果。此外,PGT-A的使用并不会增加高龄女性产科并发症及其新生儿不良结局的发生风险。

胚胎植入前非整倍体遗传学检测在Y染色体AZFc微缺失不育患者助孕治疗中的作用

目的探讨胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)在Y染色体AZFc微缺失不育患者助孕治疗中的作用。方法本研究为回顾性研究,选取2015年11月至2020年12月北部战区总医院生殖医学科收治的56例Y染色体AZFc微缺失导致不育且选择体外受精-胚胎移植(IVF-ET)技术进行助孕治疗的男性患者,年龄(34.22±4.15)岁,年龄范围为26~43岁;配偶年龄(32.93±3.91)岁,年龄范围为27~41岁。充分沟通后,根据患者意愿将所有患者分为PGT-A组(n=31)与形态学组(n=25),PGT-A组患者对胚胎活检标本进行高通量测序,根据染色体结果选择胚胎进行移植;形态学组患者根据形态学观测结果选择胚胎进行移植。比较两组患者配偶移植情况、临床妊娠率、移植周期活产率、抱婴夫妻占比及单胚活产率。结果形态学组22例患者进入移植周期,共进行29个移植周期,移植54枚胚胎,14个移植周期获得临床妊娠,10个移植周期获得活胎分娩,男胎6例,女胎5例(含双胞胎1例);PGT-A组21例患者进入移植周期,共进行21个移植周期,移植21枚胚胎,18个移植周期获得临床妊娠,15个移植周期获得活胎分娩,男胎1例,女胎15例(含双胞胎1例);形态学组移植周期数及移植胚胎数量均高于PGT-A组,差异有统计学意义(P<0.05)。PGT-A组临床妊娠率[85.7%(18/21)]、抱婴夫妻占比[48.4%(15/31)]及单胚活产率[71.4%(15/21)]均高于形态学组[48.3%(14/29)、40.0%(10/25)、18.5%(10/54)],差异有统计学意义(P<0.05)。结论PGT-A能在显著减少移植次数的情况下帮助患者获得无生育风险的后代,且不降低患者的抱婴率。

下一代测序技术在高龄女性的胚胎植入前非整倍体遗传学检测中的应用

本研究以微阵列比较基因组杂交(array comparative genomic hybridization, aCGH)平台为参照,旨在探究基于下一代测序(next-generation sequencing, NGS)的胚胎植入前遗传学非整倍体检测(preimplantation genetic testing for aneuploidies, PGT-A)对高龄不育患者辅助生殖临床结局的影响.本文回顾性分析了上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院2016年6月至2019年3月行PGT-A的104对夫妇的临床资料,共纳入125个移植周期,其中正常胚胎移植周期为107个,嵌合体胚胎移植周期为18个.主要结果指标包括正常囊胚检出率和嵌合体囊胚检出率,以及临床妊娠率、流产率和活产率.研究结果表明,与a CGH平台相比, NGS的嵌合胚胎的检出率显著提高,且部分嵌合体胚胎移植获得了健康胎儿.对于移植检测结果为正常的胚胎,基于NGS的PGT-A和基于aCGH的PGT-A对高龄女性辅助生殖的临床妊娠率、流产率和活产率的影响无显著差异.

内膜准备方案对PGT-A患者首次整倍体单囊胚移植妊娠结局及产科结局的影响

目的探讨不同内膜准备方案对胚胎植入前非整倍体检测(preimplantation genetic testing for aneuploidies,PGT-A)后整倍体单囊胚移植妊娠结局及产科结局的影响。方法回顾性分析2015年9月至2021年7月期间于郑州大学第一附属医院生殖医学中心行PGT-A助孕后整倍体单囊胚移植患者的临床资料,根据内膜准备方案分为自然周期组(n=80)和激素替代周期组(n=259),比较两组患者妊娠结局及产科结局的差异,并通过二元logistic回归探究影响PGT-A患者妊娠结局及产科结局的影响因素,再将年龄分层进一步探究不同内膜准备方案的妊娠结局。结果与自然周期组相比,激素替代周期组优质囊胚率显著升高,但活产率降低、流产率升高(P<0.05),两组临床妊娠率比较差异无统计学意义(P>0.05)。激素替代周期剖宫产率和巨大儿发生率高于自然周期组,低体重儿发生率低于自然周期组,但差异无统计学意义(P>0.05)。二元logistic回归显示:女方年龄是流产的独立影响因素,女方年龄和囊胚发育天数是活产的独立影响因素(P<0.05),内膜准备方案并不是妊娠及产科结局的影响因素(P>0.05)。进一步分析结果显示:35岁以上患者,自然周期组的活产率显著高于激素替代周期组,而流产率显著低于激素替代周期组(P<0.05)。结论内膜准备方案并不影响PGT-A助孕后整倍体单囊胚移植患者的妊娠结局及产科结局。但在高龄患者中,采用自然周期方案可获得更高的活产率、更低的流产率。

胚胎植入前非整倍体遗传学检测患者血清抗苗勒管激素水平与囊胚整倍体率的相关性研究

目的分析卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)后进行胚胎植入前非整倍体遗传学检测(preimplantation genetic testing for aneuploidies,PGT-A)的患者中,其血清抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)水平对囊胚整倍体率及整倍体胚胎数量的影响。方法采用回顾性队列研究,收集2018年1月1日至2020年12月31日期间于北京大学第三医院生殖医学中心行ICSI并进行PGT-A的504例患者的临床资料。根据促排卵治疗前血清AMH水平,将研究对象分为低AMH组(AMH<1.00μg/L,85例)与正常AMH组(AMH≥1.00μg/L,419例)。采用倾向评分匹配方法,基于年龄、体质量指数(body mass index,BMI)、复发性流产病史、促排卵方案进行1∶1匹配(卡钳值=0.02),匹配后比较两组患者(每组各82例)的囊胚整倍体率及整倍体囊胚数量。应用受试者工作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线评估AMH水平对PGT-A周期存在至少一个整倍体胚胎的预测作用。结果①低AMH组胚胎整倍体率[50.0%(0,100.0%)]及整倍体胚胎数[1(0,1)个]显著低于正常AMH组[60.0%(33.3%,100.0%),P=0.025;1(1,2)个,P<0.001]。②匹配后低AMH组和正常AMH组患者的胚胎整倍体率分别为50.0%(0,100.0%)、50.0%(19.2%,100.0%),组间差异无统计学意义(P=0.265),低AMH组患者的整倍体囊胚数[1(0,1)个]低于正常AMH组[1(1,2)个,P=0.004],低AMH组中至少存在一个整倍体囊胚的周期比例[57.3%(47/82)]显著低于正常AMH组[76.8%(63/82),P=0.008]。③共378个(75.0%)周期得到至少一个可移植整倍体胚胎。AMH与年龄联合预测存在至少一个整倍体胚胎的曲线下面积(area under the curve,AUC,0.78)较单一指标年龄的AUC值更优(0.75,P=0.024)。结论在调整年龄、BMI、复发性流产病史、促排卵方案等因素的影响下,血清AMH水平与PGT-A囊胚整倍体率无关。年龄结合血清AMH可用于预测每促排卵周期存在至少一个整倍体胚胎的可能性。

胚胎植入前非整倍体遗传学检测对军队不孕不育夫妇辅助生殖临床结局影响研究

目的探讨胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)对军队不孕不育夫妇辅助生殖临床结局的影响。方法回顾性分析北部战区总医院自2018年1月至2021年12月收治的接受辅助生殖技术治疗的509对不孕不育官兵夫妇中女性患者的临床资料。将未行PGT-A且未进行鲜胚移植的269例患者纳入A组,将行PGT-A的240例患者纳入B组;再将B组除去78例染色体异常患者后剩余的162例患者以年龄为依据进行分组,分为年龄<35岁组、35~37岁组及年龄≥38岁组。比较B组不同年龄患者的胚胎染色体整倍体率,A组和B组不同年龄患者的临床结局,A组和B组复发性流产患者的临床结局,以及B组各类染色体异常患者的整倍体率、临床结局。结果年龄<35岁组整倍体率明显高于年龄≥38岁组,差异有统计学意义(P<0.05)。在年龄<35岁年龄段和35~37岁年龄段,A组和B组临床妊娠率、活产率、早期流产率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);在年龄≥38岁年龄段,A组临床妊娠率和活产率低于B组,早期流产率高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。A组和B组复发性流产患者平均年龄、临床妊娠率、活产率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);B组复发性流产患者早期流产率低于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。B组各类染色体异常整倍体率比较,差异有统计学意义(P<0.05),临床妊娠率、活产率、早期流产率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论对于军队不孕不育夫妇,PGT-A可有效改善高龄患者妊娠结局,避免因染色体非整倍体性增加而导致的自然流产,降低复发性流产患者的早期流产率,提高活产率。

3种单细胞全基因组扩增方法对1~4 Mb拷贝数变异检测性能的研究

目的比较3种单细胞全基因组扩增(WGA)法(SurePlex、MALBAC和MDA)对1~4 Mb拷贝数变异(CNV)的检测性能,为胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)选择最佳方法提供依据。方法采用3种含有已知1~4 Mb CNV的细胞系,分别以上述3种方法进行WGA扩增,对扩增产物统一采用Veriseq构建PGT-A测序文库,illumina-NextSeq550测序平台进行测序,最后采用嘉宝仁和公司的PGXCould生信平台进行信息学分析。对比各方法的PGT-A分析结果,综合评估其性能。结果3种方法均可获得足够的WGA产物,并成功构建测序文库。扩增产物浓度中,MDA>SurePlex>MALBAC,差异有统计学意义(P<0.05);建库产物浓度中,MDA>MALBAC>SurePlex,差异有统计学意义(P<0.05);3种方法测序获得有效reads平均值在10 M以上,且原始数据与基因组的比对率也均超过97%。基因组比对率、已覆盖基因组比例、SD值比较,MDA>MALBAC>SurePlex,差异有统计学意义(P<0.05)。冗余序列比例的比较,SurePlex>MALBAC>MDA,差异有统计学意义(P<0.05)。MDA法可辨识出3.59 Mb(GM24312)左右的CNV,而对于2.5 Mb(GM13325)及1.3 Mb(GM25372)很难辨识。其他两种WGA方法结果理想。结论SurePlex和MALBAC均可用于1~4 Mb的CNV检测,且Sureplex法性能更优,但MDA法检测1~4 MbCNV存在一定风险。

囊胚形态与整倍体率及单整倍体囊胚移植妊娠结局的关系

目的基于胚胎植入前非整倍体检测技术(PGT-A),评估囊胚形态学分级与染色体倍性之间的关系,并进一步评估囊胚形态学分级对于预测单整倍体囊胚移植(SEBT)妊娠结局的有效性。方法回顾性分析2016年9月至2019年4月期间在西北妇女儿童医院生殖中心完成囊胚期滋养外胚层细胞活检的PGT-A周期的临床资料,并随访活产情况至2021年3月。根据活检囊胚的Gardner形态学评分将活检囊胚分为优质囊胚组(394枚囊胚)和非优质囊胚组(1191枚囊胚)。比较两组的整倍体率及两组中单整倍体囊胚解冻移植后的妊娠结局。结果PGT-A共完成380个周期,共活检囊胚1585枚,其中优质囊胚394枚,非优质囊胚1191枚。两组的一般资料比较无显著性差异(P>0.05)。优质囊胚组的整倍体率显著高于非优质囊胚组(45.18%vs.37.28%,P<0.05),非整倍体率、嵌合体率及质控不合格率显著低于非优质囊胚组(分别为45.69%vs.49.62%、6.35%vs.8.56%及2.79%vs.4.53%,P<0.05)。两组共解冻移植单整倍体囊胚329个周期,优质囊胚组119个周期,非优质囊胚组210个周期,优质囊胚组的HCG阳性率(78.15%vs.73.81%)、临床妊娠率(76.47%vs.67.62%)及活产率(66.39%vs.57.14%)均略高于非优质囊胚组,流产率(10.08%vs.10.47%)略低于非优质囊胚组,但两组间尚无显著性差异(P>0.05)。结论囊胚形态学评分与囊胚的整倍体率有关,评分为优质的囊胚整倍体率更高。但进行单整倍体囊胚移植时,囊胚形态学评分并不影响妊娠结局。

植入前胚胎的非整倍体性和嵌合性与女性年龄的相关性

目的探讨植入前胚胎的非整倍体性及嵌合性与女性年龄的相关性。方法收集2018年5月-2019年10月在沈阳市妇婴医院生殖中心行胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)助孕的患者,根据年龄将患者分为A组(年龄>35岁)和Y组(年龄≤35岁)。胚胎培养至囊胚期行滋养外胚层细胞活检,PGT-A采用全基因组扩增-下一代测序技术(WGA-NGS),分析胚胎的染色体非整倍体性及嵌合性与女性年龄的关系。结果 A组188枚胚胎扩增成功,其中非整倍体胚胎126枚,嵌合性胚胎16枚;Y组173枚胚胎扩增成功,其中非整倍体胚胎81枚,嵌合性胚胎16枚。两组胚胎在染色体非整倍性上差异有统计学意义(P<0.05),而在嵌合性上差异无统计学意义(P>0.05)。结论植入前胚胎的染色体非整倍体性同女性年龄呈正相关,而嵌合性与女性年龄不相关。

控制性促排期间使用促性腺激素累计用剂量对囊胚整倍体率的影响

目的分析胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)患者行控制性促排期间使用外源性促性腺激素累计用量对于囊胚染色体整倍体率的影响。方法选取2018年10月至2020年7月武汉大学人民医院生殖医学中心诊治的63例PGT-A患者共计69个周期的临床资料进行回顾性分析。统计患者及配偶年龄、促性腺激素累计用量、不孕年限、不良妊娠次数等因素,比较不同因素组间获取囊胚整倍体率是否存在差异。采用二元Logistic回归分析年龄、不良妊娠次数、促性腺激素累计用量等因素与获得囊胚整倍体率的相关性。结果①不同患者年龄组间囊胚整倍体率比较,差异具有统计学意义(χ^(2)=12.031,P=0.001);不同配偶年龄组间囊胚整倍体率比较,差异无统计学意义(χ^(2)=3.552,P=0.059)。②不同不孕年限组间囊胚整倍体率比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.950,P=0.330)。③不同不良妊娠次数组间囊胚整倍体率比较,差异具有统计学意义(χ^(2)=4.986,P=0.026)。将上述相关因素纳入二元Logistic回归分析,结果显示,外源性促性腺激素累计用量与囊胚整倍体呈负性相关(P=0.020,OR=0.999,95%CI为0.998~1.000)。结论大剂量使用促性腺激素是获得胚胎整倍体率偏低的危险因素。