不同植冰温度下冷冻液的结晶变化及其对小鼠胚胎冷冻的效果

采用程序化冷冻方法 ,对不同植冰温度下几种冷冻液的结晶变化进行了分析 ,并比较了其对小鼠胚胎的冷冻效果。结果表明 ,- 5 .0℃植冰时 ,3种冷冻液 PEF、PGF和 PEGF只有部分结晶 ;当植冰温度为 - 5 .5℃时 ,PEF和 PEGF完全结晶时间为 1 0 min,PGF在 1 5 m in尚未完全结晶 ;- 6 .0℃植冰时 ,3种冷冻液完全结晶时间分别为 8,1 0和 1 0 min;- 6 .5℃植冰后完全结晶时间分别为 5 ,8和 5 min。将小鼠胚胎载入上述 3种冷冻液 ,- 5 .5℃植冰冷冻解冻后 ,囊胚孵化发育率分别为 81 .7% ,6 8.5 %和 87.5 % ,- 6 .0℃植冰时发育率分别为 80 % ,76 .5 %和 90 .9% ,- 6 .5℃植冰后的发育率分别为 1 0 % ,1 3.3%和 38.4 %。据此得出 ,在 - 5 .5或 - 6 .0℃时植冰 ,以

不同冷冻保护液和不同植冰温度对小鼠胚胎冷冻效果的影响

超排处理76只昆明小白鼠，将出现阴道栓的45只小白鼠进行冲卵，得到420枚胚胎。从中选用395枚胚胎，用不同的冷冻保护液进行常规冷冻。结果表明，在－6℃植冰后平衡10min，用FM液(PBS、BSA、海藻糖和乙二醇组成的冷冻液)冷冻的效果最佳，解冻后的胚胎发育率早期桑椹胚为90％、致密桑椹胚为100％，这与在－7℃植冰冷冻后的发育率相比差异显著(P<0.05)

脱水时间及植冰温度对冷冻羊卵巢组织卵泡活性的影响

目的检测不同脱水时间及植冰温度对慢速程序冷冻羊卵巢组织卵泡活性的影响。方法羊卵巢组织制备成1 mm×5 mm×5 mm的卵巢皮质片,应用不同的脱水时间(20、40及60 min)及植冰温度(-5℃、-7℃和-9℃)进行慢速程序冷冻,采用中性红染色评价卵泡活力,组织学检测原始卵泡形态正常率,异体移植检测卵泡的存活情况。结果对照组卵泡存活率均高于各实验组(P<0.05)。Ⅱc与Ⅲc组卵泡活力均高于其余各实验组(P<0.05)。Ⅰc组卵泡存活率高于Ⅰa组及Ⅰb组,但差异无统计学意义(P>0.05)。对照组形态正常原始卵泡比例高于各实验组(P<0.05);Ⅱc组与Ⅲc组形态正常原始卵泡比例高于其余各实验组(P<0.05)。Ⅰc组形态正常原始卵泡比例高于Ⅰa组及Ⅰb组,但差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅱc组的移植物回收数及卵泡密度高于其余各实验组。结论 40 min脱水时间、-9℃植冰温度是最适宜的羊卵巢组织慢速程序冷冻方案。