‘圣剑’洋桔梗植株高频再生体系建立及卡那霉素敏感性测定

洋桔梗是国际上十分流行的盆花和切花种类。以洋桔梗‘圣剑’无菌苗叶片为外植体,研究了6-BA与NAA不同浓度组合对其不定芽再生的影响,并分别比较了不同浓度IBA和NAA诱导其生根的效果,测定了该品种在不定芽再生时对卡那霉素(Km)的敏感性。结果表明:MS+0.5 mg·L-16-BA+0.01 mg·L-1NAA为不定芽再生最适培养基,不定芽再生率达91%;1/2 MS+0.2 mg·L-1IBA为不定根再生的最适培养基,生根率达89%;抑制叶片不定芽再生的Km最低浓度为25 mg·L-1。建立了‘圣剑’洋桔梗植株高频再生体系,并确定了其对卡那霉素的敏感性,为该品种的基因工程研究奠定了基础。

韭菜组织培养高频植株再生体系的研究

通过对韭菜组织培养过程中激素配比、外植体、基因型、苗龄及生根条件的研究 ,建立了一次性诱导成芽的高频植株再生体系。适于愈伤组织和不定芽分化的最佳培养基为MS +NAA 1mg/L +BA2mg/L ,在此分化培养基上 91 1、 91 8、保定红根、寿光马蔺韭和兰州小韭根尖培养的芽分化频率分别为78.7%、 83.7%、 81.9%、 76 .7%和 73.3% ,平均出芽数分别为 40 .1、 46 .7、 36 .3、 35 .4和 44 .5个 ,苗龄为 7～ 10d的根尖最适于组织培养。随苗龄增加 ,芽的分化频率呈下降趋势。无任何激素的MS0培养基最适于不定芽的生根 ,生根率达 10 0 % ,平均根数 14.5条。卡那霉素 (Km)对植株再生有很强的抑制作用 ,在Km为 2 0mg/L时就完全抑制愈伤组织和不定芽的发生 ;羧苄青霉素 (Carb)和噻孢霉素 (Cef)也抑制韭菜根尖培养的植株再生 ,Cef的抑制作用更加显著 ,Carb 5 0 0mg/L或Cef 30 0mg/L完全抑制不定芽的再生 ;Timentin对愈伤组织和芽的分化影响不大 ,抑制性主要表现在出芽数随浓度升高而降低。当Timentin浓度为 5 0 0mg/L时 ,平均出芽数仍可达到 2 3.8个 ,为对照的 49.4%。

野葛高频植株再生体系相关因子的优化

对野葛高频植株再生体系相关因子进行优化,结果表明,野葛带芽茎段再生体系的最佳消毒方式为70%酒精处理30s后用0.1%HgCl2处理15min;最佳培养基为MS+NAA 0.5mg/L+6-BA 5.0mg/L;最佳培养条件为:蔗糖浓度30g/L,pH 6.0,液体培养,培养温度25℃,光照培养。