山慈菇活性成分微波提取工艺优化、指纹图谱与抗植物病菌活性分析

本文综合运用单因素和Box-Behnken响应面试验,以山慈菇提取率和其中3种主要化学成分:双[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯-2-葡萄糖苷(dactylorhin A)、双[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(militarine)和秋水仙碱的含量为综合权重指标,对其微波提取工艺进行考察。同时,利用高效液相色谱技术建立13批不同产地山慈菇的指纹图谱,明确其主要成分含量分布情况。最后,运用滤纸片扩散法,对制备的山慈菇提取物进行抗菌活性评价。结果表明:山慈菇的最佳微波提取工艺条件:乙醇浓度55%、料液比1:30 g/mL、提取时间17 min。在此条件下,山慈菇的提取率为12.83%。指纹图谱结果表明,山慈菇中3种化学成分的含量分布趋势一致,其中militarine为13批山慈菇中的共有化学成分,而dactylorhin A和秋水仙碱分别在1个产地样品中未检出,表明不同产地山慈菇中主要化学成分分布具有差异性。抗菌实验结果显示,山慈菇提取物对胶孢炭疽菌、辣椒疫霉菌、灰葡萄孢菌、茄链格孢菌、荧光假单胞菌、水稻白叶枯菌和禾谷镰孢菌均没有显示抗菌活性(抑菌圈小于6 mm),对雷尔氏菌具有较好的抑制活性(抑菌圈8.5 mm),表现出一定的抗菌选择性。本研究确定了微波提取山慈菇的最佳工艺,建立的山慈菇中3种成分同步含量分析方法稳定可行,研究结果可为山慈菇药材的质量标准建立和综合开发利用提供参考。

黑曲霉孢子粉粗提物对两种植物病菌的抑制作用

黑曲霉是集安全和具有许多活性强大酶系等诸多优点于一身的优良工业发酵用菌种。研究分离得到一株黑曲霉（Aspergillus niger）xj，为充分开发利用这一真菌资源，利用50g含有1×109CFU／g、5×109CFU／g、15×109CFU／g黑曲霉孢子的干燥孢子体粉末提取出三种不同的浸膏，并在筛选最佳接种量和最佳培养时长的基础上对这3种浸膏进行抑菌试验，发现这3种浸膏对青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum）根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）这两种常见植物病菌均体现了良好的抑制效果，且抑制率均〉92．02％。

红色警报! 在番茄中发现植物病菌如何瘫痪植物的入侵警报系统

新的研究侧重于由病原体引起细菌性斑点病的番茄植株，这种细菌入侵导致了树叶和果实的黑色病变，而严重感染甚至会引起大量损失。研究人员认为，了解更多关于该细菌感染植物的分子机理，就有可能找到新的方法对抗它们，而不再需要杀虫剂。

植物病菌对杀菌剂的抗性问题

病菌对杀菌剂抗性的发展和为害 微生物对杀生药剂的抗性大约有30年的历史,发生最早的是细菌对医药(如磺胺和抗菌素)的抗性。1950年后,发生害虫对杀虫剂的抗性。防治植物病害的药剂过去长期使用多作用部位的保护性杀菌剂,在生产中未曾因抗性的发展而使防治失败的。但自1970年内吸杀菌剂发展以来,抗药性问题已成为农业植病防治和杀菌剂研制工业的紧迫问题。

不同分子量壳多糖对植物病菌的拮抗作用及其诱导提高寄主植物抗病性

采用固体培养基体外抑菌法研究了分子量为1002、2350、5060的三种壳多糖对22种植物病原菌的拮抗作用。结果表明:三种壳多糖对供试植物病原菌有不同程度的抑制作用,随壳多糖浓度的增加对不同病原菌的抑制作用增强,壳多糖的分子量对植物病菌的抑制作用没有显著影响。壳多糖对活体植株染病的防治效果与壳多糖的使用次数呈正相关,水溶性壳多糖(分子量为2350)对活体植株染病的防治效果最好。壳多糖可诱导植物产生与抗病有关的过氧化物酶和β-1,3葡聚糖酶,而这些酶的产生随着处理次数的增加依次增加,分子量为2350的壳多糖诱导作用最佳,可使过氧化物酶活性增加4倍以上,β-1,3葡聚糖酶活性增加2倍以上。

毛鱼藤废渣中抗植物病菌及抗肿瘤活性物质

从毛鱼藤废渣中追踪分离生物活性物质。结合抗植物病毒、抗肿瘤活性筛选,采用减压硅胶柱层析和反复SephadexLH-20柱层析法追踪分离毛鱼藤废渣活性化学成分,通过理化常数测定和波谱解析进行结构鉴定。结果表明:自毛鱼藤废渣中追踪获得2种化合物,其中鱼藤酮在10 mg/L对葡萄白腐病菌作用最强,抑制率为61.1%;羟基鱼藤素对大肠癌HCT-8细胞、人肝癌BEL-7402细胞、人卵巢癌A2780细胞有很强的抑制作用。毛鱼藤废渣中具有抗植物病毒、抗肿瘤活性化合物属首次报道。

一株拮抗细菌的鉴定及对植物炭疽病菌作用效果测定

采用形态特征观察、生理生化特性测定以及16S rDNA、gyrB基因序列测定,确定1株从核桃林地土壤中分离获得拮抗细菌菌株SDF-005的分类地位,并测定了该菌株对5种植物炭疽病的抑菌活性以及对核桃炭疽病的林间防治效果。经鉴定,该菌株为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens。SDF-005对5种植物炭疽病菌丝生长均具有较强的抑制作用,抑菌带直径均在12 mm以上,菌丝生长抑制率达75%以上,其中对葡萄炭疽病抑制作用最强,抑菌带直径为19.33mm,菌丝生长抑制率为83.06%。SDF-005对炭疽病菌的抑制作用主要表现为对菌丝的影响,SDF-005的各种代谢产物破坏病原菌菌丝壁结构,引起菌丝膨大、畸变、扭曲、菌丝壁消解。15亿/g SDF-005可湿性粉剂2个处理浓度田间防治核桃炭疽病效果均达75%以上。

挥发性物质对植物致病菌的熏蒸作用研究进展

挥发性物质分子量小,化合物种类复杂,具有的熏蒸抑菌作用是其特殊的生物学功能之一,受到世界各国学者的关注。本文对挥发性物质的种类、抑菌活性及检测鉴定方法进行了概述,着重评述了植物(精油)和微生物产生的挥发性物质的抑菌作用及其研究进展,从挥发性物质中筛选出具有抑菌作用的单体化合物是新的研究方向。

壳聚糖对6株植物枯萎病菌的室内抑菌活性测定

以6株植物枯萎病菌为实验材料,测定了不同含量壳聚糖对植物枯萎病菌抑菌活性的影响。结果表明:壳聚糖对6种植物枯萎病菌都有抑制作用,经壳聚糖处理后,植物枯萎病菌的形态出现畸变。在一定含量范围内,随着壳聚糖含量的增加,抑制作用增强,且在壳聚糖的φ=0.4%时,对6种植物枯萎病菌的菌丝生长、产孢量以及孢子萌发的抑制作用均达到最大;但是随着壳聚糖含量的继续增加,其抑制作用反而下降,这可能与高含量时壳聚糖分子之间通过氢键自相聚集造成有效含量的下降有关。

黄芩水提取物对植物软腐病菌的抑制作用研究

通过打孔法和倍比稀释法研究黄芩水提取物对植物软腐病菌的体外抑菌效果,利用分析检测系统细胞主要内容物的渗漏问题来检测采用黄芩水提取液对供试菌细胞膜和细胞壁的破坏能力。研究可知:黄芩水提取物能有效抑制植物软腐病菌的活性,破坏植物软腐病菌的细胞壁和细胞膜,为黄芩的临床应用提供理论基础。

滇重楼根茎腐病的致病菌分离鉴定及致病性研究

目的探究滇重楼根茎腐病的致病菌类型及致病性。方法采用微生物学方法及18S rRNA测序技术对滇重楼根茎腐病的致病菌进行分离鉴定,并通过离体回接法对分离鉴定的植物致病菌进行致病性验证。结果从根茎腐病的滇重楼植物样品中分离鉴定出7株镰孢菌属致病真菌,包含5株尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum和2株腐皮镰刀菌Fusarium solani,分离鉴定的7株真菌均具有一定的致病性。结论镰孢菌属尖孢镰刀菌和腐皮镰刀菌真菌是滇重楼根茎腐病的主要致病菌,对有效防治有重要参考价值。

棉花枯萎病菌产角质酶的连续诱导

角质酶(EC3.1.1.74)是水解酶,可以降解角质产生脂肪酸,属于α/β水解酶,也可以水解甘油三酯等化合物。角质酶的应用十分广泛,但菌株对角质酶的表达量非常有限,因此提高角质酶表达量的研究具有广泛的理论与实践意义。角质酶是一种诱导酶,角质的存在能激活产该酶病菌的角质酶基因,诱导其高效转录表达。本实验经过角质诱导及诱导强度的变化,真菌的角质酶基因转录量大大增加,而未经过角质诱导的真菌角质酶基因转录量非常少。本研究中诱导棉花枯萎病菌的产酶量最高可以达到29.46U/mL,比未诱导的提高至4倍。

文冠果果壳提取物对植物病原菌的抑菌活性

[目的]揭示文冠果果壳提取物的抑菌活性以及产生抑菌活性的成分种类,为已废弃的文冠果果壳制备植物源杀菌剂提供理论依据。[方法]使用乙醇/水(75%)、乙酸乙酯、石油醚对文冠果果壳进行溶剂提取;对提取物中活性成分进行分析,并通过逐步回归分析法研究提取物中可能的抑菌成分。[结果]乙醇/水(75%)提取物中单宁、酚类、皂苷的含量最高,石油醚提取物中最低。乙醇/水(75%)和乙酸乙酯提取物中类黄酮的含量相似,但都远大于石油醚提取物。当提取物浓度为2 g·L-1,48 h处理后,乙醇/水(75%)、乙酸乙酯和石油醚提取物对苹果轮纹病菌(Botryosphaeria berengeriana)的抑制率分别为95%、71%和39%,对葡萄根腐病菌(Fusarium oxysporum)的抑制率为75%、59%和24%,对山核桃根腐病菌(Fusarium spp.)的抑制率为78%、39%和35%,对番茄枯萎病菌(Fusarium oxysporumf.sp.lycopersici)的抑制率为100%、28%和4%,对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)的抑制率为93%、58%和9%,对梨黑斑病菌(Alternaria alternata)的抑制率为89%、36%和33%。逐步回归分析结果表明:单宁是苹果轮纹病菌和番茄枯萎病菌的主导影响因子(P<0.01);皂苷为梨黑斑病菌(P<0.05)和山核桃根腐病菌(P<0.01)的主导影响因子;类黄酮为葡萄根腐病菌的主导影响因子(P<0.05)。[结论]文冠果果壳乙醇提取物具有较强的抑菌活性,其中富含的单宁和皂苷为多数植物病原菌的影响因子。

多肽抗生素apidaecin对一些植物致病细菌的抗菌活性及对烟草原生质体毒性的研究

以多肽抗生素 Shiva- I为对照 ,利用平板抑菌圈法测定了多肽抗生素 apidaecin对我国一些重要植物致病细菌的抗菌活性。发现 apidaecin对供试棒状杆菌属、黄单胞菌属的菌株没有活性 ,但是对供试假单胞菌属、欧文氏菌属和土壤杆菌属菌株的抗菌活性比 Shiva- I强 2～ 5倍 ,其最小抑菌浓度一般在 0 .4～ 5 .9μmol/L之间。apidaecin C-末端酰胺化后 ,抗菌活性略有升高。Shiva- I对烟草原生质体的最小抑制浓度为 86 .2μmol/L ,2 0 mmol/L浓度的 apidaecin对烟草原生质体依然没有毒性。

天然植物源性化妆品中致病微生物同步快速检测方法的建立

【目的】建立天然植物化妆品中3种动植物源致病菌的快速、敏感、特异的多重PCR诊断检验方法。【方法】设计肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)、铜绿假单胞杆菌(Pseudomonas aeruginosa)和地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformisin)3种菌的特异性PCR引物,通过单一、双重及三重PCR反应检测。【结果】种动植物源致病菌的单一、双重和三重PCR均成功扩增出目的片断,没有非特异性扩增。通过对人工感染膏状染发剂的PCR检测进行灵敏度验证,得出三种菌检出限:Klebsiella pneumoniae为4.5×10 CFU/m L;Pseudomonas aeruginosa为6×102CFU/m L;Bacillus licheniformisin为1×10 CFU/m L。【结论】建立的多重PCR反应系统具有较好的特异性和灵敏性,为天然植物型化妆品中常见致病菌的检测提供了快速、简便、可靠的方法。

瑞香狼毒地上部分抑菌活性研究

为探究瑞香狼毒地上部分的抑菌活性,采用溶剂提取法提取茎叶中的抑菌活性成分,测定提取物对17种植物病菌的生物活性,筛选出活性成分部位与生物农药复配,测定对水稻纹枯病菌的抑制活性。结果表明,石油醚、乙酸乙酯、乙醇3种溶剂提取物均表现出不同程度的抑菌活性,其中乙酸乙酯提取物抑菌种类最多,其次为石油醚提取物。乙酸乙酯提取物主要对水稻纹枯病菌、番茄灰霉病菌、桃褐腐病菌、稻瘟病菌、马铃薯晚疫病菌有明显抑制效果,EC50分别是95.06、586.99、12.64、202.97、139.49mg/L;石油醚提取物对桃褐腐病菌和番茄灰霉病菌的EC50分别是10.28、311.95mg/L;95%小檗碱硫酸盐与乙酸乙酯提取物不同比例复配对水稻纹枯病菌的EC50为137.86~176.60mg/L,除1︰3、1︰5质量配比对水稻纹枯病菌的作用效果呈相加作用,其余配比均呈增效作用。研究表明,瑞香狼毒地上部分具有抑菌活性,具备开发为植物源农药的潜力。

萝卜溶菌酶抑菌效果的初步研究

研究了萝卜溶菌酶对白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆等３种革兰氏阳性菌和变形菌、大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏杆菌、多杀巴斯德氏杆菌、雏白痢沙门氏菌、产气杆菌等６种革兰氏阴性菌及酿酒酵母、总状毛霉、黑根霉、黑曲霉、青霉等５种真菌的抑菌效果。同时还研究了萝卜溶菌酶对白菜软腐病菌、柑橘溃疡病菌、番茄青枯病菌、水稻细条病菌、水稻白叶枯病菌及烟草青枯病菌等６种植物病原细菌的抑菌效果。实验证明：萝卜溶菌酶对上述参试的菌种都有不同程度的抑菌作用，表明萝卜溶菌酶的抑菌谱较鸡蛋清溶菌酶更为广泛。

几种二氮氧化喹恶啉甲醛新衍生物的合成及其抑菌活性的研究

合成了 5种二氮氧化喹恶啉甲醛的新衍生物并用HNMR谱和元素分析对其结构进行了表征。用新的化合物对

海绵微生物的分离培养及一种活性代谢产物的初步研究

研究海绵来源真菌Aspergillus repens发酵产物中的活性代谢产物。分离培养微生物进行活性筛选,采用活性追踪的方法、利用色谱手段分离获得单体化合物,根据波谱分析及其理化性质确定其结构,利用SRB评价单体化合物的抗肿瘤活性,利用纸片法测定单体化合物的抗植物病菌活性。获得1个萘并吡喃酮化合物,其结构鉴定为3,4-二氢-9,10-二羟基-7-甲氧基-3-甲基-1H-萘并[2,3c]吡喃-1-酮(Semivioxanthin)。该化合物对肿瘤细胞A-549、HL-60和BEL-7402有一定抑制作用,对植物致病菌作用较强。海绵微生物代谢产物是发现活性物质重要资源,值得深入研究。

农药安全使用常识

农药具有杀死植物病菌、害虫、杂草、鼠等有害生物,保护和调节植物生长,对确保农业增产起着重要的作用。同时农药又是有毒性的物品,少数是剧毒、高毒危险品。如果使用不当,管理不严,可能会造成人畜中毒甚至死亡,对植物产生药害,污染环境和食品等。