重组植物硫化激动素PSK-α融合蛋白诱导表达条件的优化

植物硫化激动素(phytosulfokine-α,PSK-α)是植物体内一种小分子肽类生长调节因子,具有促进细胞增殖等多种生物活性。但由于其在植物体内的含量极低,难以满足PSK-α研究和应用的需要。笔者在前期构建PSK-α原核型表达载体的基础上,研究了影响融合蛋白表达的因素,优化了培养条件,并运用谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)亲和柱层析对融合蛋白进行了分离纯化。通过单因素和正交试验的结果表明:培养温度、诱导剂浓度、诱导剂加入时机和诱导时间均对融合蛋白的表达量和表达形式有很大影响;在诱导温度20℃,扩大培养150 min(菌液培养至OD600值约0.8止)后加入诱导剂1.0 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropy-β-D-thiogalactoside,IPTG),诱导培养时间8 h条件下,可以获得最多的可溶性融合蛋白GST-PSK-α表达量。