Ca^(2+)/CaM在植物血凝素促淋巴细胞分裂中的分子调节机理 (一)Ca^(2+)对PHA有丝分裂原活性的影响

实验材料为小鼠脾淋巴细胞,应用MTT微量自动比色法判断细胞分裂状况,观察植物血凝素(PHA)的促脾淋巴细胞分裂活性和Ca^(2+)的影响。结果发现,加Ca^(2+)的最大刺激组的吸光度(A)值比对照组(未加Ca^(2+)的PHA组)提高了35.4％(两组A值分别为0.390和0.288),Ca^(2+)的最大刺激浓度为4％葡萄糖酸钙。结果表明Ca^(2+)参与细胞增殖的调节,并有增强PHA的有丝分裂原活性的作用。

植物血凝素(PHA)对小鼠骨髓粒—单祖细胞增殖的影响

用体外琼脂培养法研究了PHA对小鼠骨髓CFU-GM的影响,结果表明,小鼠经腹腔注射PHA后,对小鼠CFU-GM产率和自杀率的影响随PHA的剂量不同而异,20～40mg/kg的PHA能明显提高CFU-GM的产率,其作用时间维持3天,剂量大于50mg/kg,可抑制CFU-GM产率。PHA组自杀率较对照组明显提高,提示适量的PHA在体内可促进小鼠CFU-GM的增殖,使更多的CFU-GM由Go期进入S期。将PHA直接加入无CSF的培养体系中,未见集落生长。此项结果提示PHA可能通过间接机制而非直接作用于CFU-GM。

植物血凝素(PHA)对小鼠骨髓粒—巨噬祖细胞的保护作用

以体外半固体琼脂培养方法,观察了PHA对小鼠骨髓CFU—GM的保护作用.结果显示 小鼠经腹腔往射PHA后,对小鼠CFU—GM的自杀率有明显提高,提示适量的PHA在体内可以促进小鼠CFU—GM增殖.使更多的CFU—GM由Go进入S期.我们发现4mg/kg三尖杉酯碱(Ha)明显抑制小鼠CFU—GM增殖,若先用PHA(30mg/kg处理小鼠,则可对抗上述剂量的Ha,使CFU—GM产率维持于对照组水平.提示PHA能有效地保护粒-巨噬系免受Ha的损害,

植物血凝素PHA与猪瘟细胞源苗联合应用免疫效果观察

探讨猪瘟活疫苗和PHA联合使用对猪免疫效果的影响。选取30日龄健康仔猪60头,随机分成5组(A、B、C、D、E组,组均12头),每组仔猪注射猪瘟细胞源苗1头份,B、C、D、E为试验组,分别同时肌肉注射低剂量(B组0.05 mg/kg)、中剂量(C组0.1 mg/kg)、高剂量(D组0.2 mg/kg)、超高剂量(E组0.4 mg/kg)PHA,A组为对照组。结果高剂量PHA组(D组0.2 mg/kg)与其他组比较,免疫效果最佳,抗体转阳率与4倍增长率分别比对照组高出8.34%、16.67%;D组平均抗体滴度为1∶169.81,离散度为1∶64-1∶256,而对照组平均抗体滴度1∶47.91,离散度为1∶16-1∶256,两者比较差异极显著(P<0.01)。

麻风患者植物血凝素(PHA)皮肤反应观察

PHA是一种非特异性皮试抗原。Schrek等于1963年首先报道用PHA皮内注射引起的反应可解释为迟发超敏反应。以后,国内外有许多学者将PHA皮试用于临床测定细胞免疫功能。笔者应用PHA皮内试验对不同类型的麻风病人进行了皮肤反应观察。

低温对黑斑侧褶蛙变态和植物血凝素反应的影响

温度是影响两栖动物变态发育时长的主要环境因素之一,高温可促进蝌蚪生长发育,缩短变态时长,低温则延迟发育进程,延长变态时长[1-5]。黑斑侧褶蛙(Pelophylax nigromaculatus)是有重要经济价值的两栖动物,也是稻蛙综合种养的主要蛙种之一[6]。变态前后,蝌蚪的规格、对植物血凝素(PHA-P)的反应,受高温[3-5]。

植物血凝素(PHA)第四次学术座谈会在广州召开

在广东省科委的主持下,植物血凝素(PHA)第四次学术座谈会于1982年2月26日至3月1日在广州市召开。出席这次会议的有来自全国24个省、市、自治区的医院、大专院校、科研等88个单位106位代表。会议共收到一百篇论文。自1973年广州市医药工业研究所从广东菜豆提取PHA以来,全国已有一千多个单位用于实验和临床。PHA作为一种免疫药物日受重视。国内有关的临床报道越来越多。

植物血凝素(PHA)治疗非典型新城疫效果好

近来。随着养鸡业饲养管理水平和疫病防治技术的不断提高，典型新城疫的发生流行已得到明显控制，而非典型新城疫却时有发生．给养鸡业带来了不小的经济损失。2007年入春至今，笔者遇到多起非典型新城疫病例。现将一例非典型新城疫诊治情况报告如下。

121名健康儿童和成人植物血凝素(PHA)皮试的观察

植物血凝素(PHA)在体内能引起迟缓型变态反应。我们对121名健康儿童和成人进行了PHA皮试观察;对豚鼠作了组织学观察。方法是皮内注射67μg/0.1 ml,,分别于0.5、1、2、4、8、12和24小时测量红斑和硬结的直径。结果豚鼠皮试证明,4小时前以皮下水肿为主,8小时后以单核细胞浸润为主。1岁以上各年龄组健康人PHA皮试变异不大。PHA皮试动态观察证明,红斑和硬结直径有近似平行的关系,采用红斑直径作为判断标志。

植物血凝素对鸡免疫功能的影响

选用罗曼蛋公鸡270羽,随机分为9组,连续3次肌肉注射不同剂量植物血凝素(PHA)后,对其血清蛋白、免疫器官指数及新城疫的攻毒保护效果进行检测.结果表明:肌注2.4 mg/kg.bw PHA组与对照组相比,可显著提高鸡的血液生化指标(P<0.05),极显著提高对鸡新城疫的保护率(P<0.01);肌注1.2 mg/kg.bw PHA组与对照组相比,可显著提高胸腺指数和新城疫攻毒保护率(P<0.05).

植物血凝素对兴国红鲤头肾和脾脏的比较组织学研究

PHA注射前后兴国红鲤头肾和脾脏结构基本相同。红鲤头肾有被膜 ,为淋巴样组织 ,由许多血管、血窦和淋巴索组成。脾脏是实质性器官 ,淋巴细胞聚集成团 ,有弥散的胰腺组织渗入。注射PHA后头肾和脾脏内的大淋巴细胞、小淋巴细胞、巨噬细胞以及原始型细胞显著增加 ,而粒细胞数量变化不明显。

不同繁殖状态雌性黑线仓鼠对植物血凝素的反应模式

由植物血凝素(Phytohemagglutinin,PHA)诱导产生的肿胀反应是生态免疫学中被广泛使用的免疫学参数,通过注射部位的肿胀程度大体上可反映细胞介导的免疫和天然免疫的综合变化情况。为探讨小型哺乳动物不同繁殖状态对PHA的反应模式,以非繁殖期、妊娠期、哺乳期和断乳期的雌性黑线仓鼠为研究对象,测定了注射PHA和生理盐水前(0 h)及注射后6 h、12 h和24 h注射部位皮肤组织的增厚程度。结果显示:(1)黑线仓鼠对PHA的反应有两种模式:非繁殖期、妊娠期和断乳期对PHA的反应模式相似,都在注射后6 h最高,12 h和24 h后逐渐下降;哺乳期对PHA的反应在注射后6 h、12 h和24 h接近,彼此间的差异均不显著。(2)哺乳期黑线仓鼠的PHA反应高峰值有下降趋势,但与非繁殖期、妊娠期和断乳期高峰值之间的差异不显著。结果表明,黑线仓鼠在哺乳期对PHA的反应模式不同于其他繁殖阶段,且反应的高峰值被延迟,这对其存活可能有害,但有助于繁殖进程的延续和后代的生长发育。

长爪沙鼠对植物血凝素的反应及能量学代价的性别和季节差异

以野生长爪沙鼠为对象,通过外源注射植物血凝素(Phytohemagglutinin,PHA)和磷酸盐缓冲液,分别测定了夏季和冬季沙鼠注射前、注射24h和48h后体重和静止代谢率(Resting metabolic rate,RMR)的变化,以及48h后沙鼠足增重量和白细胞总数(White blood cell counts,WBCs)的变化,以检测沙鼠的免疫功能和能量代价的性别和季节差异。结果显示:1)注射PHA能显著增加沙鼠足重和白细胞的总数,夏季白细胞的总数高于冬季;2)冬季沙鼠体重高于夏季,雄鼠大于雌鼠,但PHA处理对注射前后沙鼠的体重无影响;3)冬季RMR高于夏季,雄鼠大于雌鼠,但PHA处理对沙鼠的RMR无影响,PHA处理对注射前后沙鼠的RMR也无影响。这些结果表明,长爪沙鼠对PHA的反应具有季节差异,但无性别差异,也没有发现明显的能量学代价,这可能与野外环境条件的大幅度波动(如环境温度和食物条件等)和沙鼠的繁殖状态有关。

人脐血多种细胞因子的含量检测及植物血凝素和脂多糖的影响

目的 :通过检测人脐血血清多种细胞因子含量 ,观察植物血凝素 (PHA)和脂多糖 (LPS)的诱生影响 ,探讨这些细胞因子的免疫功能及移植物抗宿主病 (GVHD)的发病机制。方法 :采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA) ,测定 2 6份正常足月新生儿脐血及 16例正常儿童外周血血清中白细胞介素 4(IL - 4)、IL - 10、肿瘤坏死因子α(TNF -α)、γ干扰素 (IFN -γ)、IL - 12、IL - 15、IL - 18水平 ,以及PHA和LPS刺激后单个核细胞分泌上述细胞因子的诱生水平。结果 :人脐血血清中IL - 4的水平与正常外周血血清水平无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,脐血血清中IL - 12的水平显著高于外周血血清 (P <0 .0 5 ) ,其余 5种细胞因子脐血血清水平均明显低于正常外周血血清水平 (P <0 .0 5 ) ;PHA和LPS刺激后脐血单个核细胞分泌IL - 4、IL - 10、TNF -α、IFN -γ、IL - 12、IL - 15和IL - 18的水平明显低于正常外周血 (P <0 .0 5 ) ,尤以IL - 4、TNF -α、IFN -γ、IL - 15和IL - 18非常明显。结论 :脐血血清中上述细胞因子水平普遍低于正常外周血 ,以及脐血单个核细胞刺激后产生IL - 4、IL - 10、TNF -α、IFN -γ、IL - 12、IL - 15和IL - 18等细胞因子水平的不足 ,表明脐血细胞免疫功能不成熟 。

植物血凝素对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响

试验对植物血凝素在艾维茵雏鸡新城疫疫苗免疫过程中的效果进行了研究。经过雏鸡新城疫母源抗体水平的检测后,选择抗体滴度约为2.5log2的雏鸡90羽,随机分成3组,分别为溶剂对照组、单免组和PHA组。单免组和PHA组分别于7,21d接种Ⅳ系LaSota弱毒疫苗,PHA组还同时肌肉注射植物血凝素0.01mL/只。各组鸡于第1次免疫后的14,21,28,35,42,49和56d测定血液中鸡新城疫特异性抗体水平。结果显示,经2次免疫后PHA组鸡的抗体滴度比单免组和对照组鸡的高,差异显著(P<0.05),说明PHA能显著增强雏鸡对LaSota弱毒苗的免疫反应。

植物血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体介导氧化型低密度脂蛋白对内皮祖细胞存活和功能的影响

目的研究植物血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体(LOX-1)是否介导氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)对内皮祖细胞(EPC)的存活及功能产生影响。方法分选脐血CD34+细胞,培养于内皮细胞生长培养基(EGM-2)中。培养14d后,部分EPC与10、25、50μg/ml的oxLDL孵育48h;部分EPC先与LOX-1单克隆抗体(LOX-1 mAb)预处理24h,再与50μg/ml oxLDL孵育48h;对照组不作处理。检测EPC存活率及EPC迁移、黏附和管状结构形成能力,并检测LOX-1的蛋白及mRNA表达。结果oxLDL浓度为25和50μg/ml时,凋亡率分别为(15.8±1.0)%和(18.8±2.0)%,显著高于对照组的(9.0±1.2)%(P<0.05);迁移率分别为(5.7±1.0)%和(5.1±0.8)%,显著低于对照组的(9.5±0.8)%,(P<0.05);黏附细胞数分别为(33±2)和(30±3)个,显著少于对照组的(37±5)个(P<0.05);形成的管状结构分别为(2.9±0.5)和(1.8±0.5)mm,显著短于对照组的(5.0±0.6)mm(P<0.05)。OxLDL可增加LOX-1 mRNA及蛋白的表达,oxLDL浓度为50μg/ml时,LOX-1 mRNA表达由100%增加为(174±39)%,蛋白表达由100%增加为(172±8)%。OxLDL的上述作用能被LOX-1mAb所阻断。结论OxLDL可降低EPC存活,抑制EPC功能,其作用是由LOX-1介导的。

结核感染T细胞斑点试验中结核特异性抗原/植物血凝素比值对肺外结核的诊断价值

目的探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)中结核特异性抗原(TBAg)/植物血凝素(PHA)比值在肺外结核(EPTB)诊断中的应用价值。方法选择2018年1月至2020年1月新乡医学院第一附属医院收治的522例疑诊的EPTB患者为研究对象,根据最终是否诊断为EPTB,将患者分为EPTB组(n=209)和非EPTB组(n=313)。2组患者均行T-SPOT.TB检测,比较2组患者T-SPOT.TB检测结果阳性率、PHA斑点形成细胞(sfc)数、早期分泌靶向抗原6(ESAT-6)sfc数、培养滤液蛋白10(CFP-10)sfc数及TBAg/PHA比值。比较ESAT-6 sfc数、CFP-10 sfc数及TBAg/PHA比值对EPTB的诊断价值。结果EPTB组和非EPTB组患者T-SPOT.TB检测结果阳性率分别为88.5%(185/209)和24.3%(76/313);EPTB组患者T-SPOT.TB检测结果阳性率显著高于非EPTB组(χ^(2)=206.840,P<0.05)。EPTB组患者T-SPOT.TB检测结果中ESAT-6 sfc数、CFP-10 sfc数、TBAg/PHA比值均显著高于非EPTB组,PHA sfc数显著低于非EPTB组(P<0.05)。根据受试者工作特征(ROC)曲线,TBAg/PHA比值诊断EPTB的特异度显著高于ESAT-6 sfc数和CFP-10 sfc数(P<0.05);ESAT-6 sfc数、CFP-10 sfc数、TBAg/PHA比值诊断EPTB的ROC曲线下面积和灵敏度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论TBAg/PHA比值可显著提高T-SPOT.TB诊断EPTB的特异度,在EPTB诊断中具有较好的应用前景。

植物血凝素对杀伤细胞增殖和细胞毒作用影响的研究

目的 :探讨植物血凝素 (PHA)对细胞因子诱导的杀伤细胞 (CIK)增殖和细胞毒作用的影响。方法 :分离健康人外周血单个核细胞 ,用自体血浆培养CIK细胞和PHA先刺激 2 4h的PHA CIK细胞。用甲基四唑盐(MTT)法检测两种细胞对K5 6 2细胞、食管癌细胞和初治急性白血病患者骨髓幼稚细胞的细胞毒作用。结果 :两种细胞体外增殖能力较强 ,且PHA CIK细胞强于CIK细胞 (P <0 .0 5 )。两种细胞对不同靶细胞均有较强的杀伤能力。在效靶比为 2 0∶1、10∶1时 ,PHA CIK细胞比CIK细胞对K5 6 2细胞和初治急性白血病患者骨髓幼稚细胞的杀伤作用强 (P <0 .0 5 )。结论 :PHA增加CIK细胞的增殖能力和抗肿瘤活性 ,可作为生物治疗应用于临床。