植物转基因技术和方法概述

从技术原理和方法进展着手 ,综述了植物转基因的不同方法。植物基因转化方法主要包括载体介导的转化和直接基因转移 ,着重阐述了植物转基因方法的机制以及各种方法的适用范围、应用实例和进展 ;比较了相互的优缺点。相比之下 ,农杆菌介导方法具有明显优势。

植物转基因方法及进展

本文从技术原理和方法进展着手，着重在土壤农杆菌系统、植物病毒系统和DNA直接导入法中阐述了植物转基因载体的选择和构建；以及各种方法的适用范围、应用上的例子和进展，并且比较了相互的优缺点。另外，本文还探讨了转导入植物细胞的外源基因的组织方式及其转录表达效率。

植物转基因产品检测方法的评价

对植物转基因产品进行检测包括筛选、鉴定和定量三个步骤。定性PCR和Southern印迹是筛选的常用方法。由于假阴性或假阳性结果的存在 ,外源基因类型的鉴定需要结合使用针对转入的外源基因的特异性引物。竞争定量PCR ,实时PCR和酶联免疫分析可以确定转基因成分含量。本文进一步讨论了各种检测方法的优缺点、灵敏度以及适用范围。并且认为 ,在比较分析的基础上 ,使用国际公认的检测方法 ,根据目的和条件的不同 。

DNA甲基化与植物转基因沉默研究进展

基因沉默现象已成为转基因植物商品化生产的严重阻碍。本文就DNA甲基化的作用机制及由其引起转基因沉默的研究作了简要综述。另外 ,结合基因表达的抑制因素 ,对如何消除DNA甲基化 ,促使外源基因高效表达的策略进行了初步探讨。

植物转基因技术及其应用

介绍了植物转基因技术的定义及主要方法 ,综述了目前我国植物转基因技术应用的主要领域及进展 ,并对植物转基因产品的安全性和规范管理做了解释和说明。

植物转基因沉默及其克服方法研究进展

转基因沉默可分为转录水平的基因沉默和转录后水平的基因沉默 ,前者是因为启动子失活 ,不能起始。而后者是因为 m RNA被降解 ,或 m RNA的加工被干扰。其原因包括多种因素 ,如转基因的拷贝数和构型 ,基因的甲基化 ,异染色质化 ,RNA依赖的 RNA聚合酶等 ,涉及 DNA— DNA,DNA— RNA,RNA— RNA三种核酸相互作用。克服转基因沉默的方法包括对外源基因进行改造 ,采用具有特殊功能的启动子与增强子 ,构建细胞核骨架附着区载体 ,以及筛选单拷贝转基因子代植株。

植物转基因技术产业化规律探寻

20世纪80年代初发展起来的植物转基因技术,作为植物基因工程的核心技术,可精确改造植物,显著提高作物产量和抗逆性、改良品质性状等,同时能够极大地降低农业生产的成本,缓解不断恶化的农业生态环境,将成为21世纪解决食物安全、

植物转基因技术(一)

植物转基因技术(gene transfer)也称遗传转化技术(genetic transformation),是植物基因工程的一个重要组成部分;它通常是指将依据人们一定的需要已经分离、克隆并组建成一定载体形式的外源基因,借助于物理、化学或生物的手段,转入受体植物细胞,实现在新背景下(如细胞、组织、整株水平)表达和遗传的过程。它不仅为基因的表达调控和遗传的研究提供了一个理想的实验体系,更重要的是为植物。

植物转基因技术的过去、现在和未来

植物转基因技术是植物基因功能解析和农作物遗传改良的重要手段之一。首先回顾了植物转基因技术的诞生和发展历程,然后系统介绍了载体、选择标记基因和植物转基因常用的农杆菌介导法的研究进展。最后,结合对拟南芥和谷子转基因的研究分析了目前植物转基因存在的难题,并展望了植物转基因技术未来的发展方向和趋势,以期为植物转基因技术的研究与应用提供借鉴。

利用MPCR方法快速检测植物转基因背景

利用复合PCR(MulyiplexPCR -MPCR)技术对植物的转基因背景进行检测。经过对DNA方法的选择 ,对各种PCR程序的比较以及对引物的修饰 ,建立了一种快速检测植物转基因情况的技术 ;利用该技术对 5个大豆样品 ,6个豆粕样品进实验检测 ,同时利用普通PCR方法对上述样品进行检测 ,两者的结果完全符合。

卡那霉素在植物转基因中的应用及其抗性基因的生物安全性评价

介绍了卡那霉素在转基因植物筛选中的作用机理及其在植物转化过程和转化后代中的应用现状。卡那霉素不仅在植物转化过程中可起到筛选作用 ,而且在转化后代中可通过其对后代进行遗传分析和测定种子纯度 ,同时还可用于后代田间成株的筛选。随着卡那霉素的广泛使用 ,卡那霉素抗性基因的安全性问题日益受到重视。概述了转基因植物的杂草化、卡那霉素抗性基因的水平扩散。

植物转基因沉默及控制

植物基因工程的目的就是获取外源基因能够按照设计要求正常表达和稳定遗传的转基因植物。近几年来,广泛报道了转基因植物中存在转基因沉默现象。主要阐述了两种转基因沉默的机理即转录水平的基因沉默和转录后水平的基因沉默,各种机理都涉及DNA DNA,DNA RNA,RNA RNA的相互作用。同时,还讨论一些控制转基因沉默现象的策略,特别是MAR在转基因植物中具有增强基因表达和减少株间差异的作用。

农杆菌T—DNA介导的植物转基因的分子机制

前言 根瘤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)与发根农根菌(A.rhizogenes)同属根瘤菌科,是革兰氏阴性植物病原菌。前者感染植物引起冠瘿病(Crop gall tumour),冠瘿病用含有抗生素的培养基培养与除菌。可无限增殖;后者感染植物诱发出许多不定根,把不定根培养在上述培养基上也可迅速生长,多次分枝成毛状称毛状根(hairy root)。农杆菌感染机理很复杂。其感染作用起始于受伤的植物细胞分泌的大量化学物质时期。受伤植物细胞分泌的酚分子诱导农杆菌怀有的Ti质粒或Ri质粒上的基因活化,尔后农杆菌紧附植物细胞并把Ti质粒或Ri质粒上一部分DNA(称作T—DNA,tranfer DNA)转移到植物染色体上。T.DNA共价整合后编译合成的新的低分量的代谢物,称为冠瘿碱。

SAR与植物转基因沉默的消除

随着转基因技术在各个应用领域的深入和发展，转基因沉默现象已引起越来越多的人关注。转基因沉默主要发生在转录或转录后水平，涉及核酸的三种相互作用，即：ＤＮＡ－ＤＮＡ、ＤＮＡ－ＲＮＡ、ＲＮＡ－ＲＮＡ。这是植物基因表达调控的具体表现之一，也是外源基因插入后生物体的一种自我保护。ＳＡＲ协同转基因进行转化，可以消弱宿主ＤＮＡ对外源基因的不利影响。实验证明，在稳定整合的转基因植物中，ＳＡＲ提高了整体表达水平，并降低了不同转化体之间的差异。这是消除植物转基因沉默的一条有效途径。

植物转基因的非孟德尔遗传

多年的植物基因转化实践表明,外源基因在植物体内的遗传行为十分复杂。本文对转基因植物中外源基因的基本整合方式和遗传类型进行了介绍,并重点讨论了植物转基因的非孟德尔遗传现象及其影响因素,分别从受体植物的遗传背景、配子的存活能力、染色体异常、转基因沉默及转化时采用的方法和策略等方面对造成植物转基因发生非孟德尔遗传的可能原因进行了阐释。对转基因植物遗传规律,特别是非孟德尔遗传现象的研究和阐释,将为改进植物基因转化策略,提高转基因在实践中的应用价值提供理论指导。

新型Bt杀虫蛋白:VIP杀虫的机理与植物转基因应用

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)是目前应用最多的生物杀虫剂。它能够产生多种杀虫因子,其中最主要是杀虫晶体蛋白(insecticidal crystal proteins,ICP)和营养期杀虫蛋白(vegetative insecticidal protein,VIP)。VIP在Bt营养期生长阶段开始分泌,它们不形成蛋白晶体,和ICP在进化上没有同源性。VIP的杀虫活性很高,达到了纳克级水平,为一类新型杀虫蛋白,被认为是第二代生物杀虫剂。VIP根据蛋白质序列同源性主要分为三类:VIP1、VIP2和VIP3。VIP1和VIP2共同构成二元毒素对鞘翅目萤叶甲科昆虫具有特异性毒杀作用,VIP3对鳞翅目害虫具有很高的杀虫活性。由于VIP对一些可能对ICP产生抗性的害虫具有高效的毒杀作用,而且害虫对ICP和VIP产生交互抗性的几率也很小,因此转VIP植物研究受到了科学家的青睐,并已有不少成功的报道和专利。目前为止,已经利用VIP3构建了转基因水稻、转基因玉米、转基因棉花等多种转基因作物。

耐盐性植物转基因工程的研究进展

随着分子生物学的迅速发展,已经发现了一系列与植物盐胁迫相关的基因。根据这些基因产物的作用,可以分为两大类:效应分子基因和调控分子基因。根据近年来采用基因工程方法提高植物耐盐性的策略和研究进展进行了概述,同时探讨了目前还存在的一些问题。