植物过敏反应中的生理生化变化

过敏反应是植物-病原物不亲和互作后发生的一种细胞快速坏死的典型抗病反应。本文介绍过敏反应早期阶段植物体内所发生的电解质流失、磷脂酶活性、钙流动、蛋白质磷酸化、脂氧合酶活性、活性氧产生和防卫基因活化等一系列生理生化反应等方面的研究进展。

HarpinXoo诱发植物过敏反应和抗病性信号传导解析

植物使用不同的信号通路控制对不同类型病原物的抗性。由水杨酸(salicylic acid，SA)、乙烯(ethylene)、茉莉酸(jasmonic acid，JA)介导的信号传导被称为植物抗病防卫基本信号通路。它们之间及与其它信号通路之间通过某些通调因子的作用进行交叉对话，形成复杂的信号传导网络，可以使植物应对不同刺激、快速调动防卫反应。这些因子如何对不同的外源信号作出反应，

与植物超敏反应(HR)相关的细胞编程性死亡

在植物抗病的超敏反应(hypersensitiveresponse,HR)中发生的细胞死亡被证明为一种细胞编程性死亡(programmedcelldeath,PCD),与HR相关的PCD发生一般由R基因 /avr基因的不相容互作引起。离子流(Ca2+ )、活性氧(ROS)、水杨酸(SA)、茉莉酸(JA)等均是PCD发生过程中的重要信号分子;类半胱氨酸蛋白水解酶(caspases likeproteases,CLPs)、线粒体参与PCD过程;液泡在植物PCD中占重要的地位。

产harpin的成团泛菌工程菌的构建

梨火疫病菌（ Ｅｒｗｉｎｉａ ａｍｙｌｏｖｏｒａ） 产生的胞外蛋白ｈａｒｐｉｎ 是引发其非寄主植物过敏反应的因子。ｈａｒｐｉｎ 蛋白还具有诱导植物抗性的功能。成团泛菌（ Ｐａｎｔｏｅａ ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ）３０８Ｒ 对链格胞属（ Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ） 的真菌具有拮抗活性，是一株抗利福霉素的自发突变株，对壮观霉素敏感。本文通过电击转化法将带有梨火疫病菌ｈｒｐ 基因簇的重组质粒ｐＣＰＰ４３０ 导入３０８Ｒ。所得转化子具有ｐＣＰＰ４３０ 的壮观霉素抗药性标记，在番茄上引起过敏反应；从转化子中提取到与ｐＣＰＰ４３０ 大小一样的质粒，其酶切物理图谱也与ｐＣＰＰ４３０ 完全相同；用地高辛标记的ｈａｒｐｉｎ 的结构基因ｈｒｐＮ 为探针对转化子中的质粒进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ 分析，结果在转化子中得到信号明显的杂交片段，而受体菌３０８Ｒ 中未出现杂交信号；提取细菌的外壁的蛋白质进行ＰＡＧＥ 分析，在大约４４ ｋｄ 的位置上３０８Ｒ（ｐＣＰＰ４３０） 比３０８Ｒ 明显多出１ 条带。这些结果表明成团泛菌能够表达梨火疫病菌的ｈｒｐ 基因簇，所产ｈａｒｐｉｎ

苹果火疫解淀粉欧文氏USAW004菌株Harpin_(Ea) USAW004基因的克隆和高效表达

从感染火疫病的苹果幼芽中分离纯化解淀粉欧文氏Erwinia amylovora菌株USAW004.该菌株能引起非寄主植物烟草叶片过敏反应.通过构建USAW004基因组文库和菌落原位杂交方法,从USAW004基因组文库中成功筛选到HarpinEaUSAW004基因的阳性克隆,并将其亚克隆到pBluescript-II SK(+).测定阳性克隆片段核苷酸序列HarpinEaUSAW004基因的orf长度为1 212 bp,转录产物HarpinEaUSAW004由403个氨基酸残基组成.将HarpinEaUSAW004基因克隆到表达载体pET28a(+)的T7启动子下,成功构建了高效表达质粒pT7-HarpinEaUSAW004,在大肠杆菌JM109中,经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导HarpinEaUSAW004基因高效表达,其表达产物可以诱导烟草叶片产生典型过敏反应症状.