大鼠椎体生长板软骨细胞的改良培养及传代特征

[目的]建立体外培养及鉴定大鼠椎体生长板软骨细胞的方法,观察软骨细胞的传代特征。[方法]采用改良胰酶和Ⅱ型胶原酶序贯消化法对4只1周龄SD大鼠椎体生长板软骨细胞进行体外分离、培养。原代细胞传代后采用细胞HE染色和甲苯胺蓝染色对软骨细胞进行鉴定,采用MTT比色法绘制细胞生长曲线。将细胞传代至第6代,采用倒置相差显微镜观察各代软骨细胞的形态,采用免疫细胞化学染色鉴定各代软骨细胞Ⅱ型胶原的表达。[结果]MTT比色法显示,传3代以前的软骨细胞的生长曲线近似"S"形,从第4 d开始细胞呈对数生长,第9 d达平台期,至第11 d开始出现生长抑制。体外培养的软骨细胞随着传代次数的增加,细胞形态由原代的多角形逐渐变为长梭形。传3代以前的软骨细胞Ⅱ型胶原免疫细胞化学呈强阳性。[结论]本研究所采用的软骨细胞分离和培养方法,能在短时间内获得高纯度的软骨细胞,传3代及以前的细胞具有软骨细胞的特征性表型,增殖较快,这一方法为更深入地从细胞水平研究椎体的纵向生长奠定了基础。

褪黑素在青少年特发性脊柱侧凸发病中作用的研究进展

青少年特发性脊柱侧凸（adolescent idiopathic scoliosis,AIS）是临床上常见的脊柱三维畸形,以女性多见,至今病因不明。目前关于AIS病因学研究有很多假说,主要包括遗传因素、神经系统平衡功能异常、生物力学因素及神经内分泌异常等。