椰子蛋白化学结构和热稳定性研究

目的研究椰子全粉中蛋白质的结构和热稳定性,为深度开发椰子蛋白资源提供理论基础。方法采用碱提酸沉法提取椰子全粉中蛋白质,酸水解法结合氨基酸自动分析仪测定氨基酸组成,利用傅里叶变换红外光谱法分析蛋白二级结构,热重分析仪分析蛋白热降解曲线,纳米粒度分析仪研究溶液中蛋白颗粒的Zeta电位和粒径大小。结果椰子蛋白含有18种氨基酸,富含精氨酸和谷氨酸,8种必需氨基酸含量丰富、比例合理,是营养良好的蛋白质来源。椰子蛋白的二级结构以稳定态的β-折叠为主,含量达44.18%,椰子蛋白降解起始温度273.12℃,峰值温度332.91℃,至最终实验设定温度790℃时仍有25.9%残余未热降解完全,60℃时椰子蛋白溶液Zeta电位和粒径与25℃无显著变化。结论椰子蛋白具有良好的营养价值和热稳定性,可为椰子蛋白资源的深度开发和广泛利用提供理论参考。

椰子蛋白分级组分制备及理化性质研究

目的制备椰子蛋白分级组分并研究其理化性质。方法对椰子蛋白进行分级并制备相应组分,测定椰子蛋白分级组分的氨基酸组成、疏水性、游离巯基含量、溶解度、乳化性和起泡性,以评估其功能特性。结果椰子蛋白含有18种氨基酸,富含精氨酸和谷氨酸,必需氨基酸含量丰富、比例合理,是营养良好的蛋白质来源。所有样品在蛋白质的等电点处溶解度最差、起泡性最差而泡沫稳定性却最好。随着pH增加,溶解度整体趋势先降低后增加,乳化能力总体呈现增加的趋势,而较高的pH下表现出更好的乳化稳定性。结论椰子蛋白具有良好的营养价值及优良的溶解度、乳化性及起泡性,可为椰子蛋白在食品加工中的应用提供理论参考。

酶法提取椰子蛋白质及其对亚基的影响

研究酶制剂的种类、用量、提取温度、pH、料液比等因素对椰子蛋白质提取率的影响,通过正交试验研究最佳的提取条件。得到的椰子蛋白质进行SDS-PAGE分析,研究酶法提取对椰子蛋白质亚基组成的影响。结果表明,添加质量分数0.3%的风味蛋白酶的提取效果最好,各因素对提取率影响的次序为:料液比>pH>温度>提取时间,其中,料液比和pH对提取率的影响达到了显著水平;最佳工艺参数为:酶质量分数0.3%、50℃、pH8.5、料液比1∶15和时间2h,在此条件下,椰子蛋白质的提取率为78.28%。SDS-PAGE分析表明,风味蛋白酶对椰子蛋白的酶解作用十分显著,与缓冲溶液提取的椰子蛋白质相比,酶法提取的椰子蛋白质中小分子质量亚基含量很高。

椰子蛋白质研究进展

椰子蛋白质是一种资源丰富,营养价值高,保健功能好的植物蛋白质资源,但目前国内对它的研究报道极少。重点介绍了国内外关于椰子蛋白质的制备、组成、分类、功能特性的研究进展及椰子蛋白在食品工业中的应用情况,以期对椰子蛋白质进一步的开发利用提供帮助。

国内外椰子蛋白质研究新进展

椰子蛋白质是一种资源丰富,营养价值高,保健功能好的植物蛋白质资源,但目前国内对它的研究报道极少。文章重点介绍了国内外关于椰子蛋白质的氨基酸组成、分类、制备、功能特性和保健功能的研究进展以及椰子蛋白在食品工业中的应用情况,以期对椰子蛋白质进一步的开发利用提供帮助。

海南椰子蛋白对小麦面团流变特性影响的研究现状和展望

海南省“十四五”期间计划新增椰子种植面积1.7万hm2,全省椰子加工业总产值达到150亿元。针对椰子深加工及衍生品不足的短板,以椰子粉为原料,分析椰子粉主要组成成分,将椰子粉应用于烘焙食品中,通过椰子蛋白对小麦面团流变特性影响的研究,指导和面、醒发和烘烤工序,在此基础上开发椰子发酵饼干产品,并对饼干的感官品质、质构品质和色泽进行评价。

椰子果肉中蛋白质亚基的组成与含量分析

采用非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和十二烷基硫酸钠-聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离分析椰子果肉中蛋白质主要亚基的组成、分子量和含量。结果表明,用pH7.8的磷酸盐缓冲溶液提取,椰子果肉中蛋白质在浓缩胶浓度为7.5%、分离胶浓度为11.5%的SDS-PAGE凝胶系统中可以得到很好的分离。在海南本地高种椰子的椰子果肉蛋白中含有11条亚基,分子量范围为13.6～64.5 kDa,主要是中、小分子量亚基。非变性凝胶电泳分析表明,高种椰子蛋白中含有5个不同分子量、不同电荷的组分。

椰子分级蛋白制备的研究

通过改良的Osboren法对脱脂椰子粉进行分级提取,得到清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,并对4种椰子蛋白进行氨基酸组成分析和SDS-PAGE电泳分析。在单因素实验基础上,利用正交实验对4种椰子蛋白提取条件进行优化。结果表明,4种椰子蛋白最佳提取工艺条件为:在液料比10∶1、提取时间4 h、提取温度50℃条件下,清蛋白提取率为49. 05%,纯度为57. 1%;在液料比10∶1、提取时间4 h、提取温度50℃条件下,球蛋白提取率为46. 65%,纯度为70. 8%;在液料比10∶1、提取时间5 h、提取温度55℃、乙醇体积分数75%条件下,醇溶蛋白提取率为18. 01%,纯度为32. 7%;在液料比10∶1、提取时间4 h、提取温度50℃、碱溶p H 10. 0条件下,谷蛋白提取率为26. 78%,纯度为70. 4%。椰子清蛋白、球蛋白和谷蛋白中谷氨酸、精氨酸和天冬氨酸的含量明显高于其他氨基酸。除了清蛋白有2条谱带相对分子质量较大,其他3种椰子蛋白相对分子质量都相对较小,整体来说椰子蛋白是一种较为优质的蛋白质。

椰子果肉蛋白亚基的组成及品种间的差异分析

采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法对香水椰子、红矮、黄矮、海南本地高种、马哇、文椰78F1 6个椰子品种的果肉蛋白主要亚基的组成、分子量、含量、分类和命名等进行研究。结果表明,在椰子果肉蛋白中含有11～18条亚基,分子量范围为12~115 kDa,主要是中、小分子量亚基。其中,主要亚基有CSα、CSβ、CSA1、CSA2、CSB1、CSB2、CSδ和CSΔ。CSA1、CSA2为酸性亚基,CSB1和CSB2为碱性亚基;CSα的含量最高,其次,CSδ和CSΔ的含量也较高。方差分析表明,除CSB1外,其余7种亚基的含量在不同品种之间呈极显著性差异。Native-PAGE分析表明,在自然条件下,椰子果肉蛋白质是由5个分子大小不一、带有不同电荷的组分构成的。不同品种椰子果肉蛋白亚基组成的差别可能是不同品种椰子间口感和风味不同的原因之一。

pH、离子强度等因素对椰子分离蛋白溶解性和乳化性的影响

分析椰子分离蛋白(CPI)溶解性、乳化性、乳化稳定性及pH、离子强度和温度对这些功能特性的影响。结果表明,与大豆分离蛋白和棉籽分离蛋白相比,椰子分离蛋白具有较好的溶解性、乳化性、吸油性和吸水性;而pH、离子强度和温度等因素对椰子分离蛋白的溶解性、乳化性和乳化稳定性有显著影响。在等电点附近,椰子分离蛋白表现出最低的溶解性与乳化性;低离子强度可提高椰子分离蛋白的溶解性和乳化性,而高离子强度降低了其溶解性和乳化性;CPI在60℃时有较好的溶解性和乳化性。

椰子分离蛋白起泡性、黏度及其影响因素的研究

分析了椰子分离蛋白(CPI)起泡性、泡沫稳定性、黏度及pH、离子强度、温度和蛋白质浓度对这些功能特性的影响。结果表明,椰子分离蛋白的起泡性和黏度与大豆分离蛋白(SPI)相近;而pH、离子强度、温度等因素对椰子分离蛋白的起泡性和黏度有显著的影响。在等电点(pH4.5)附近,CPI的起泡性和黏度最小,但却表现出最高的泡沫稳定性(91.25%);低离子强度可以提高椰子分离蛋白的起泡性,但高离子强度使CPI的起泡性、泡沫稳定性和黏度都变小;在70℃时CPI的黏度最大;蛋白质浓度变大时,CPI的黏度也显著增大。

椰子分离蛋白质提取工艺的研究

利用磷酸盐缓冲溶液从椰子肉中提取椰子分离蛋白质,采用单因素实验和正交实验研究最佳工艺条件。结果表明,各因素对提取率的影响次序为:料液比>温度>提取时间>pH,其中,料液比对提取率的影响达到了显著水平;最佳工艺参数为:35℃、pH9.5、料液比1∶20、时间120min,在此条件下,椰子分离蛋白质的提取率为76.60%。

椰子谷蛋白-1功能特性的分析

本实验采用分步提取和膜分离结合的方法从椰肉中提取椰子谷蛋白-1,测定其氨基酸组成,利用SDS-PAGE和柱层析技术分析其分子量分布和亚基组成,利用DSC技术分析其耐热性,然后对谷蛋白-1的乳化性和起泡性进行了分析。结果表明:椰子谷蛋白-1中含有16种氨基酸,天冬氨酸和精氨酸的含量很高,SDS-PAGE表明,椰子谷蛋白-1含有5个亚基,分子量分布在19.6~50.6 k Da之间。DSC扫描结果表明,椰子谷蛋白-1具有较好的热稳定性。功能特性实验表明,椰子谷蛋白-1有良好的乳化稳定性(85.17%±1.41%)和泡沫稳定性(89.15%±5.75%),均优于大豆分离蛋白。该结果表明椰子谷蛋白-1具有开发为乳化稳定剂和泡沫稳定剂的潜力。

椰子球蛋白多肽-亚铁螯合物的制备工艺

为提高椰子加工副产物的利用,对椰子球蛋白进行限制性水解制备多肽,并采用Sephadex G-25凝胶柱层析对多肽进行纯化,然后以椰子球蛋白多肽为原料与亚铁离子反应制备肽-亚铁离子螯合物。重点分析水解度、温度等因素对椰子球蛋白多肽亚铁离子络合能力的影响,并优化制备工艺。结果表明,用碱性蛋白酶结合风味蛋白酶制备的多肽的水解度最高(14.71%),产物的亚铁离子螯合能力也最高(24.66%);Sephadex G-25凝胶柱层析中分离出3个多肽组分,其中组分C的络合能力最高(28.67%);椰子球蛋白多肽C螯合亚铁离子最佳条件是多肽浓度1 mg/mL、40℃、pH 7.0、亚铁离子浓度0.5 mg/mL、时间0.5 h,此时螯合率为30.67%。荧光光谱、红外光谱等分析表明,椰子球蛋白多肽通过氨基、羧基和亚甲基与亚铁离子配位而形成螯合物。研究结果表明,用椰子球蛋白多肽为原料制备肽-亚铁螯合物切实可行,该螯合物可以应用于功能食品中来改善铁营养缺乏。

椰子分离蛋白制备工艺的研究

采用磷酸盐缓冲溶液法从脱脂椰子粉中提取椰子蛋白,在单因素试验的基础上,通过Plackett-Burman试验和响应面分析法对椰子蛋白提取工艺进行优化,结果表明:最优工艺条件为碱溶时间92 mim、碱溶pH 10.0、酸沉时间116 min、酸沉pH 4.5,在该条件下,椰子分离蛋白提取率为83.18%。

市售椰子汁(植物蛋白饮料)中椰子、大豆、花生源性成分鉴定的分子生物学方法

为建立市售椰子汁饮料产品中目的种源成分（椰子）和非目的种源成分（大豆、花生）的分子生物学检测鉴定方法。本研究代表性抽取了6批次市售主流品牌椰子植物蛋白汁饮料,提取各样本DNA,通过扩增基因组ITSⅡ片段验证核酸提取效果。之后利用PCR方法检测了样本中椰子种源成分并同时比较了椰子的稳定持家基因eEF1-α和UBC10扩增效果（Xia et al., 2014）,发现所有检测样本均可检出椰子成分,并且UBC1O基因更适用于椰子汁这类工业化产品的靶向扩增。另利用实时荧光PCR验证大豆、花生等的源性成分引物、探针特异性,发现6个种源间无交叉反应,无非特异性扩增曲线。在实际样本检测中,实时荧光PCR显示6份样本中无花生源性成分检出;3#和6#样本有大豆成分检出,Ct值分别为33.89和38.15,6#样本经重复实验分析无明显差异,表明在2份椰子汁中检出非目的种源—大豆。考虑到6#样本为弱阳性,故采用特异性、灵敏度更好的微滴式数字PCR （dd PCR）检测并验证前期结论,分析显示在实时荧光PCR中有扩增的2份样本中,3#样本检出大豆阳性微滴信号,6#则为阴性,其余4份样本dd PCR与实时荧光PCR一致,均为阴性。本次实验筛选了更适合扩增椰子植物蛋白饮料DNA的靶基因,建立了此类产品中2个种源鉴定的实时荧光PCR方法,并通过先进的dd PCR法对可疑结果进行验证的完整解决方案,最终避免了假阳性结论,判定这6份市售产品中有1份样本存在掺杂使假。这项工作为监管部门提供了有效的监管手段和技术支撑,将有助于进一步规范椰子汁市场和质量安全。

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