龙牙楤木总皂苷通过调控AMPK/Nrf2信号抑制缺氧/复氧诱导的心肌细胞铁死亡

目的:探究龙牙楤木总皂苷对AMPK/Nrf2信号通路的影响。方法:将人心肌细胞AC16进行体外培养,分为空白对照组、缺氧/复氧模型组、铁离子螯合剂对照组,铁离子螯合剂组、龙牙楤木总皂苷低(0.02μg/mL)浓度组、龙牙楤木总皂苷中(0.1μg/mL)浓度组、龙牙楤木总皂苷高(0.5μg/mL)浓度组,丹参滴丸(50μg/mL)阳性对照组,AMPK抑制剂Compound C(5μg/mL)+龙牙楤木总皂苷(0.5μg/mL)组,Nrf2抑制剂ML385(2μg/mL)+龙牙楤木总皂苷(0.5μg/mL)组。MTT法检测细胞存活率;试剂盒检测细胞内Fe^(2+)、ROS水平;免疫荧光法检测脂质过氧化物及GPX4、ACSL4蛋白表达;qRT-PCR检测GPX4、ACSL4 mRNA表达,Western Blot检测GPX4、ACSL4、p-AMPK、Nrf2蛋白表达;结果:与空白对照组比较,模型组细胞存活率、GPX4 mRNA表达显著降低,Fe^(2+)含量、ROS和脂质过氧化水平、ACSL4 mRNA表达显著升高,p-AMPK、Nrf2蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,铁离子螯合剂组细胞存活率、GPX4 mRNA表达显著升高,Fe^(2+)、ROS、脂质过氧化水平及ACSL4 mRNA表达显著降低(P<0.01);龙牙楤木总皂苷各组和丹参滴丸组细胞存活率及GPX4、p-AMPK、Nrf2蛋白表达显著升高,心肌细胞中Fe^(2+)、ROS、脂质过氧化水平及ACSL4蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。与龙牙楤木总皂苷组比较,Compound C+龙牙楤木总皂苷组和ML385+龙牙楤木总皂苷组细胞存活率显著降低,Fe^(2+)含量显著升高,Nrf2蛋白表达显著降低,Compound C+龙牙楤木总皂苷组ROS和脂质过氧化水平显著升高,p-AMPK蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:龙牙楤木总皂苷可通过激活AMPK/Nrf2信号通路,抑制H/R诱导的心肌细胞铁死亡。

龙牙楤木总皂苷通过调控miR-149-5p对高糖诱导的MIN6细胞损伤的影响及机制

目的探讨龙牙楤木总皂苷(Aralosides)通过调控miR-149-5p对高糖诱导的MIN6细胞损伤的影响及机制研究。方法体外培养小鼠胰岛素瘤细胞MIN6,采用浓度为25 mmol/L葡萄糖诱导建立细胞模型,将细胞分为对照(Control)组、高糖(HG)组、高糖+龙牙楤木总皂苷低、中、高剂量(HG+Aralosides-L、HG+Aralosides-M、HG+Aralosides-H)组、高糖+miR-NC(HG+miR-NC)组、高糖+miR-149-5p(HG+miR-149-5p)组、高糖+龙牙楤木总皂+anti-miR-NC(HG+Aralosides+anti-miR-NC)组和高糖+龙牙楤木总皂+anti-miR-149-5p(HG+Aralosides+anti-miR-149-5p)组。通过CCK8检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;定量反转录(qRT)-聚合酶链反应(PCR)检测miR-149-5p表达。结果与Control组相比,HG组明显降低细胞活力、Bcl-2蛋白表达、SOD活性、GSH-Px活性、miR-149-5p表达,增加细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量(均P<0.05)。与HG组相比,HG+Aralosides-L组、HG+Aralosides-M组、HG+Aralosides-H组明显增加细胞活力、Bcl-2蛋白表达、SOD活性、GSH-Px活性、miR-149-5p表达,明显降低细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量(均P<0.05)。与HG+miR-NC组相比,HG+miR-149-5p组明显增加细胞活力、Bcl-2蛋白表达、SOD活性、GSH-Px活性、miR-149-5p表达,明显降低细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量(均P<0.05)。与HG+Aralosides+anti-miR-NC组相比,HG+Aralosides+anti-miR-149-5p组明显降低细胞活力、Bcl-2蛋白表达、SOD活性、GSH-Px活性、miR-149-5p表达,明显增加细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量(均P<0.05)。结论龙牙楤木总皂苷通过调控miR-149-5p减缓高糖诱导的MIN6细胞的凋亡和氧化应激,并促进细胞的增殖。

基于PI3K/Akt信号通路探讨龙牙楤木总皂苷抗心肌缺血再灌注损伤的机制

目的基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路探讨龙牙楤木总皂苷抗心肌缺血再灌注损伤的机制。方法将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、龙牙楤木总皂苷组、LY29004组、LY29004+龙牙楤木总皂苷组,每组10只。除假手术组外,其余组利用Langendorff离体心脏灌流装置,通过结扎左冠状动脉前降支30 min、复灌75 min的方法构建离体大鼠心脏再灌注模型。模型组采用K-H液恒速灌流;龙牙楤木总皂苷组和LY29004组分别采用含5 mg/L龙牙楤木总皂苷的K-H液和含15μmol/L LY29004的K-H液恒速灌流;LY29004+龙牙楤木总皂苷组先给予含15μmol/L LY29004的K-H液灌流15 min,再以含5 mg/L龙牙楤木总皂苷的K-H液灌流60 min。采用Western blot法检测心肌组织中PI3K/Akt信号通路相关蛋白[Akt、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、糖原合酶激酶3β(GSK-3β)、磷酸化糖原合酶激酶3β(p-GSK-3β)]表达情况,免疫组化法检测心肌组织中凋亡相关蛋白[半胱氨酸天门冬氨酸酶3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)、Bcl-2关联蛋白X(Bax)]表达情况,HE染色观察心肌组织病理形态。结果模型组、龙牙楤木总皂苷组、LY29004组、LY29004+龙牙楤木总皂苷组Akt、p-Akt、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白相对表达量和Caspase-3、Bax蛋白阳性表达面积均明显高于假手术组(P均<0.05),Bcl-2阳性表达面积均明显低于假手术组(P均<0.05);龙牙楤木总皂苷组Akt、p-Akt、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白相对表达量和Bcl-2阳性表达面积均明显高于模型组、LY29004组和LY29004+龙牙楤木总皂苷组(P均<0.05),Caspase-3、Bax蛋白阳性表达面积均明显低于模型组、LY29004组和LY29004+龙牙楤木总皂苷组(P均<0.05)。假手术组心肌细胞排列有序,未见变性、坏死及炎性细胞浸润;模型组大量心肌细胞变性、坏死及炎性细胞浸润;龙牙楤木总皂苷组心肌细胞轻度肿胀,少量细胞变性、坏死,少量炎性细胞浸润;LY29004+龙牙楤木总皂苷组大量心肌细胞坏死和炎性细胞浸润。结论龙牙楤木总皂苷可能通过激活PI3K/Akt信号通路,上调抗凋亡蛋白表达和下调促凋亡蛋白表达而减轻心肌缺血再灌注损伤。

龙牙楤木总皂苷对缺氧/再给氧心肌细胞损伤的保护作用

目的探讨龙牙楤木总皂苷(As)对培养心肌细胞缺氧/再给氧损伤的保护作用及其机制。方法取体外培养的乳大鼠心肌细胞建立缺氧/再给氧心肌细胞损伤模型,实验分为5组空白对照组;模型组(A/R组),缺氧6h再给氧3h;3个As给药组,缺氧6h再给氧3h,并于缺氧及再给氧开始时分别加入终浓度为1.25、2.5、5.0mg.L-1的As,观察As对细胞上清液中缺氧及再给氧后LDH、CK漏出量、MDA含量、SOD活性的影响。用MTT法检测As对缺氧再给氧损伤心肌细胞线粒体的保护作用。结果As可抑制缺氧及再给氧后LDH、CK漏出量,降低MDA含量,提高SOD活性,升高OD570吸光度值。结论As对培养心肌细胞的缺氧再给氧损伤具有保护作用,提示其作用机制与增强细胞抗氧化作用,减少自由基及脂质过氧化物导致的细胞膜损伤有关。

龙牙楤木总皂苷对H_2O_2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的研究龙牙楤木总皂苷(AS)对H2O2诱导乳鼠心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法分次消化法分离原代培养的乳鼠心肌细胞,建立H2O2诱导心肌细胞损伤模型;MTT法检测不同浓度AS对细胞保护作用的量效、时效关系;倒置显微镜下观察AS对细胞形态学和细胞搏动频率的影响;试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)的漏出量及丙二醛(MDA)含量,检测过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力。结果不同浓度H2O2处理心肌细胞2 h,100～400μmol.L-1对心肌细胞具有明显的损伤作用,呈剂量依赖性;LDH漏出量增加,MDA含量升高,SOD、CAT、GSH-Px活力明显降低。而12.5～25 mg.L-1AS预处理8、12 h可明显地减轻损伤,有效保护心肌细胞。明显减少LDH的漏出,降低MDA含量,提高SOD、CAT、GSH-Px活力;12.5～25 mg.L-1 AS于给药后4h明显减慢心肌细胞的搏动频率,并呈剂量依赖性,表明在该剂量范围内AS具有明显的负性频率效应。结论 AS对H2O2致心肌细胞氧化损伤具有明显的保护作用,呈时间、剂量依赖性。其作用机制可能与其清除自由基,提高心肌细胞的抗氧酶活力有关;同时提示AS的心肌保护作用可能与其减少心肌做功、降低心肌耗氧量、增加心肌细胞稳定性有关。

楤木总皂苷对S_(180)小鼠肿瘤生长及免疫细胞功能的影响

目的:研究楤木总皂苷的体内抗肿瘤活性及对荷瘤小鼠免疫细胞功能的影响。方法:以小鼠肉瘤细胞S180为移植性肿瘤模型,观察对小鼠肿瘤生长的影响;采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验、淋巴细胞转化试验和迟发型超敏反应观察对荷瘤小鼠免疫细胞功能的影响。结果:楤木总皂苷400 mg/kg对S180的肿瘤生长有一定的抑制作用,抑瘤率达33.63%;楤木总皂苷200、400 mg/kg能增强S180小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力、提高T淋巴细胞的转化率和促进DTH反应(P<0.05或P<0.01),且呈现出较好的量效关系。结论:楤木总皂苷具有一定的体内抗肿瘤活性,且能增强荷瘤小鼠的免疫细胞功能。

楤木总皂苷减轻实验性2型糖尿病大鼠氧化损伤作用的研究

目的观察楤木总皂苷对实验性2型糖尿病大鼠机体氧化损伤的影响。方法采用高脂高糖饮食辅以小剂量腹腔注射链脲佐菌素(streptozocin,STZ)复制大鼠实验性2型糖尿病模型。将30只SD大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,楤木总皂苷高、中、低剂量组(给药量分别为250.0、125.0、62.5 mg.kg-1)和阳性药物对照组,每组5只。对大鼠血清及肝脏、肌肉、脂肪组织中的氧化损伤指标丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)进行测定,光镜下观察各组大鼠胰腺病理形态学变化。结果楤木总皂苷能显著改善2型糖尿病大鼠机体的氧化损伤且有较好的剂量效应依赖关系。楤木总皂苷中、高剂量组大鼠与模型组大鼠相比,血清及肝脏、肌肉、脂肪组织中的MDA浓度显著下降(P<0.05,除肌肉组织),SOD活性显著上升(P<0.05),AGEs水平显著下降(P<0.05),胰腺病理形态明显改善。结论楤木总皂苷能减轻实验性2型糖尿病大鼠机体的氧化损伤,从而保护STZ所致大鼠胰腺损伤。

龙芽楤木总皂苷对糖尿病大鼠早期肾病结构改变的保护作用及其机制探讨

目的探讨龙芽楤木总皂苷[total aralosides of aralia elata(Miq)seem,TASAES]对实验性糖尿病(DM)大鼠肾脏功能及结构保护作用的机制。方法应用链脲佐菌素(STZ)复制DM大鼠模型,于8 w时对正常对照组、模型组、不同剂量TASAES治疗组(低、中、高剂量组)DM大鼠进行尿量、肾重体重比、24 h尿微量自蛋白(mALB)测定;RT-PCR技术检测结缔组织生长因子(CTGF)在核酸水平上的转录情况;电镜观察超微结构变化。结果与正常对照组比较,8 w时模型组、低、中、高剂量TASAES组大鼠尿量、相对肾重/体重比、24 h mALB明显增加(P<0.05,P<0.01);与模型组大鼠比较,低、中、高剂量TASAES组大鼠相对肾重/体重比,24 h mALB下降(P<0.05),而血肌酐虽无明显变化,但有上升趋势;与模型组比较,中、高剂量TASAES组CTGF在分子水平表达差异有显著性(P<0.01);电镜显示:模型组肾基底膜增厚,厚薄不均,上皮细胞内线粒体空化,低、中、高剂量TASAES组明显减轻。结论龙芽楤木能有效降低DM大鼠尿微量白蛋白含量;降低CTGF在肾脏的表达;改善肾脏超微结构,防止基底膜增厚,保护肾小球滤过屏障。

龙牙楤木总皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的:观察龙牙楤木总皂苷对缺血再灌注损伤心肌粘附分子sVCAM-1表达及MDA、GSH-PX的影响。方法:可逆性冠脉左前降支结扎缺血45min再灌注6h复制MI/R模型,Wistar雄性大鼠30只,随机分成模型组、龙牙楤木组、波立维组,每组10只。HE染色观察心肌病理学变化,检测血清LDH含量,测定心肌MDA、GSH-PX活性,ELISA法测定血清sVCAM-1的表达。结果:与模型组比较,龙牙楤木总皂苷、波立维均能显著降低缺血再灌注大鼠血清LDH含量,显著升高GSH-PX的活性,升高MDA含量,缺血45min再灌注6h血清sVCAM-1有明显表达,各组之间无统计学差异。结论:龙牙楤木总皂苷对MIRI有保护作用,可能是通过减少MDA含量、升高GSH-PX活力,对抗氧自由基对心肌细胞的毒害作用,减轻心肌细胞的损伤而实现的。

楤木总皂苷对荷瘤小鼠肿瘤生长和细胞因子的影响

目的研究楤木总皂苷对荷瘤小鼠肿瘤生长和细胞因子水平的影响。方法建立小鼠肉瘤S180移植性肿瘤模型,以抑制率为指标观察对肿瘤生长的作用,采用Elisa法测定对荷瘤小鼠细胞因子白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、白介素-12(IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。结果楤木总皂苷400 mg.kg-1对S180的肿瘤生长有一定的抑制作用,抑瘤率达33.63%,且能升高荷瘤小鼠细胞因子IL-2I、L-6I、L-12、TNF-α的水平。结论楤木总皂苷具有一定的体内抗肿瘤活性,其机制可能与升高机体细胞因子水平有关。

辽东楤木总皂苷降血糖作用研究

目的测定辽东楤木总皂苷降血糖活性。方法:辽东楤木总皂苷以120,60,30mg·kg-1剂量连续灌胃给正常小鼠9d;以100,50,25mg·kg-1剂量连续给药四氧嘧啶诱导高血糖家兔4周;以120,60,30mg·kg-1剂量单次给药链脲霉素致高血糖小鼠,并分别于给药后测定血糖值。结果:辽东楤木总皂苷连续给药120,60mg·kg-1两剂量组使受试正常小鼠血糖明显降低;总皂苷连续灌胃给药,可使四氧嘧啶高血糖家兔血糖值明显降低,且随给药时间延长其降糖作用日趋明显,停药后其降糖作用可维持2～4h;单次灌胃给药,三剂量组于给药后2、4h使链脲霉素诱导的高血糖小鼠血糖明显降低,与给药前比较有非常显著或显著差异。结论:辽东楤木总皂苷具有较好的降血糖活性。

太白楤木总皂苷对无水乙醇致大鼠胃溃疡的预防作用

目的观察太白楤木总皂苷(TSAT)对无水乙醇诱导大鼠胃溃疡的预防作用。方法将36只SD大鼠随机分成空白组、模型组、胃康灵组以及低、中、高剂量TSAT组,每组6只。空白组和模型组大鼠均给予生理盐水灌胃,胃康灵组大鼠给予胃康灵胶囊(0. 5 g/kg)灌胃,低、中、高剂量TSAT组大鼠分别给予3、6、12 g/kg TSAT灌胃。末次给药1 h后,除空白组外,其余各组均予10 ml/kg无水乙醇灌胃造模。1 h后,观察各组大鼠胃黏膜大体形态及组织形态学,检测胃液pH值及胃黏膜组织中H^+-K^+-ATP酶活性。结果模型组大鼠胃黏膜呈深红色,肿胀,纵行皱襞可见条索样出血。各剂量TSAT组大鼠胃黏膜出血及损伤程度较模型组减轻。模型组胃液pH值高于空白组(P <0. 05),胃康灵组、中剂量及高剂量TSAT组胃液pH值均低于模型组(均P <0. 05)。模型组胃黏膜组织H^+-K^+-ATP酶活性低于空白组(P <0. 05),胃康灵组及各剂量TSAT组胃黏膜组织H^+-K^+-ATP酶活性均高于模型组(均P <0. 05)。结论 TSAT对无水乙醇致大鼠胃溃疡具有良好的预防作用,其黏膜保护作用可能与提高壁细胞膜H^+-K^+-ATP酶活性、恢复胃液pH值有关。

太白楤木总皂苷对小鼠急性酒精性肝损伤的干预作用

目的探讨太白楤木总皂苷对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用及其机制。方法将健康昆明小鼠60只随机分为空白组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、阳性对照组(联苯双酯,125mg/kg)、太白楤木总皂苷高、中、低剂量组(400、200、100mg/kg),每组10只,雌雄分开饲养,灌胃给药。除空白组外,其余各组每日上午给予56°北京二锅头(10mg/kg)灌胃,下午给予干预治疗,连续7天。末次给药8h后,检测小鼠肝脏指数,血清及肝组织中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量,肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,HE染色观察肝组织病理改变。结果与模型组比较,太白楤木总皂苷不同浓度治疗组均能够降低酒精性肝损伤小鼠血清及肝组织中ALT、AST水平(P <0. 01),升高肝组织SOD活性(P <0. 01),降低MDA含量(P <0. 05);肝组织HE染色显示,太白楤木总皂苷可明显减轻小鼠肝损伤的病变程度。结论太白楤木总皂苷对急性酒精性肝损伤小鼠具有一定的保护作用,其作用机制可能与对抗自由基生成,抑制氧化应激来实现抑制抗氧化应激有关。

太白楤木总皂苷对白血病细胞增殖的影响

目的:观察太白楤木总皂苷对白血病K562、U937细胞增殖的抑制作用,并探讨其诱导K562细胞早期凋亡的作用机制。方法:体外培养人白血病K562、U937细胞株,按照处理因素的不同分为空白对照组和药物处理组,MTT法检测太白楤木总皂苷对白血病细胞增殖的抑制作用;倒置显微镜下观察K562细胞形态学变化;流式细胞术检测其对K562细胞线粒体膜电位的影响;免疫细胞化学法检测太白楤木总皂苷作用后抗凋亡相关基因BCL-2、BAX在K562细胞中的表达。结果:太白楤木总皂苷对两种白血病细胞株增殖均有较强的抑制作用,呈现时间及剂量依赖关系。倒置显微镜下观察结果与MTT实验结果一致。太白楤木总皂苷能够诱导K562细胞线粒体膜电位下降。经太白楤木总皂苷作用后,BCL-2基因蛋白在K562细胞中的表达减弱,BAX在K562细胞中的表达增强。结论:太白楤木总皂苷能抑制两种白血病细胞株的增殖,其机制可能与诱导白血病细胞早期凋亡相关。

龙牙楤木总皂苷对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞线粒体细胞色素C和膜电位的影响及其作用机制

目的:观察龙牙楤木总皂苷、Mito KATP激活剂二氮嗪(DZ)、Mito KATP抑制剂5-羟基癸酸(5-HD)、龙牙+5-HD对大鼠缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)心肌线粒体细胞色素C和膜电位的影响,并探讨龙牙楤木总皂苷在减轻MIRI中的作用及其机制。方法:将60只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(假手术组)、模型组、DZ组、5-HD组、龙牙组和龙牙+5-HD组,每组10只,建立Langendorff离体心脏灌流模型。对照组只穿线不结扎,以改良K-H液持续平衡灌流105分钟;其余5组均穿线结扎冠状动脉停灌30分钟,再分别以改良K-H液、DZ、5-HD、龙牙楤木总皂苷、龙牙+5-HD复灌75分钟(其中龙牙+5-HD组以5-HD复灌15分钟继以龙牙楤木总皂苷复灌60分钟)。提取线粒体,western-blot半定量测定线粒体内细胞色素C水平,荧光酶标仪测线粒体膜电位。结果:龙牙组线粒体细胞色素C释放减少,膜电位较高,与模型组、5-HD组、龙牙+5-HD组相比差异有统计学意义(P<0.05),与DZ组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:龙牙楤木总皂苷在MIRI时起到保护作用,能减少MIRI时细胞色素C的释放,稳定线粒体膜电位,其作用可能与mito KATP的开放有关。

基于NR3C1/p53/SLC7A11通路探讨龙牙楤木总皂苷及其成分楤木皂苷A对缺氧/复氧诱导的心肌细胞铁死亡的影响

目的基于NR3C1/p53/SLC7A11通路观察龙牙楤木总皂苷(As)及其成分楤木皂苷A(As A)对缺氧/复氧(H/R)诱导的AC16心肌细胞铁死亡的影响。方法通过缺氧24 h/复氧12 h建立AC16细胞H/R损伤模型,采用细胞转染法调控NR3C1表达,将细胞分为正常组、H/R组、As组(As+H/R)、As A组(As A+H/R)、过表达空载体组(过表达空载体+H/R)、NR3C1过表达组(NR3C1过表达+H/R)、沉默对照组(si-NC+As+H/R)和NR3C1沉默组(si-NR3C1+As+H/R),分别进行相应干预,荧光探针检测活性氧(ROS)水平,ELISA检测丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量,Western blot检测NR3C1、p53和SLC7A11蛋白表达,免疫荧光染色检测NR3C1和p53蛋白表达。结果与正常组比较,H/R组AC16细胞ROS和MDA水平明显升高,GSH水平明显降低(P<0.05),NR3C1和SLC7A11蛋白表达明显降低,p53蛋白表达明显升高(P<0.05);与H/R组比较,As组、As A组和NR3C1过表达组AC16细胞ROS和MDA水平明显降低,GSH水平明显升高(P<0.05),NR3C1和SLC7A11蛋白表达明显升高,p53蛋白表达明显降低(P<0.05);与过表达空载体组比较,As组和NR3C1过表达组AC16细胞ROS和MDA水平明显降低,GSH水平明显升高(P<0.05),NR3C1和SLC7A11蛋白表达明显升高,p53蛋白表达明显降低(P<0.05);与As组及沉默对照组比较,NR3C1沉默组AC16细胞ROS、MDA水平明显升高,GSH水平明显降低(P<0.05),NR3C1和SLC7A11蛋白表达明显降低,p53蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论As及As A可能通过上调NR3C1、SLC7A11蛋白表达,下调p53蛋白表达,抑制H/R诱导的AC16心肌细胞铁死亡。

太白楤木总皂苷对肝纤维化大鼠Smads4基因表达的影响

目的:观察太白楤木总皂苷对肝纤维化大鼠Smads4基因表达的影响。方法:CCl4诱导大鼠肝纤维化,以太白楤木总皂苷水溶液干预性治疗,Masson染色观察肝组织胶原沉积,ELISA法检测大鼠血清TGFβ1水平,原位杂交(in situ hybridization,ISH)和免疫组化(immunohistochemistry,IH)检测大鼠肝组织Smads4表达情况。结果:太白楤木总皂苷干预性治疗使肝纤维化大鼠血清TGFβ1水平明显下降[(51.2±18.6)vs(86.9±22.8)mg/L,P<0.05],肝脏胶原占肝组织面积比例减少;治疗组大鼠肝脏Smads4蛋白表达阳性率降低为(0.024±0.007)[模型组(0.135±0.086),P<0.01],Smads4 mRNA阳性率降低为(0.229±0.019)[模型组(0.723±0.090),P<0.01]。结论:太白楤木总皂苷可显著降低肝纤维化大鼠血清TGFβ1水平,减少肝胶原沉积,抑制肝脏Smads4表达,从而减弱了由TGFβ1介导的肝纤维化信号,可能是其发挥抗肝纤维化作用的分子机制之一。

太白楤木总皂苷对胃癌SGC-7901细胞体外抑制作用研究

目的探讨太白楤木总皂苷对人胃癌SGC-7901细胞增殖的抑制作用。方法体外培养人胃癌SGC-7901细胞株,按照不同处理因素分为对照组和药物处理组,MTT法检测太白楤木总皂苷对SGC-7901细胞的增殖抑制作用;倒置显微镜下观察细胞形态学变化。结果太白楤木总皂苷处理组药物浓度>250 ug/mL时,随给药浓度增加,SGC-7901细胞的增殖抑制率增加,细胞数量减少,与对照组比较有统计学意义(P<0.05),呈现浓度依赖性。形态学观察发现随给药浓度增加,皱缩、变圆、脱壁、死亡细胞逐渐增多,与MTT结果相一致。结论太白楤木总皂苷对人胃癌SGC-7901具有增殖抑制作用。

太白楤木总皂苷对K562细胞增殖抑制及其作用机制的研究

目的以人慢性髓系白血病细胞株K562细胞为模型,研究太白楤木的体外抗肿瘤活性及其作用机制。方法MTT法检测太白楤木总皂苷对K562细胞的增殖抑制作用;单细胞凝胶电泳检测K562细胞DNA损伤;流式细胞术检测K562细胞细胞周期的改变。结果太白楤木总皂苷对K562细胞增殖具有抑制作用,并呈时间-剂量依赖性;能显著诱导K562细胞DNA损伤;促进凋亡的发生;细胞周期阻滞于S期。结论太白楤木总皂苷能抑制K562细胞的增殖,诱导凋亡发生,其机制可能与通过诱导K562细胞DNA损伤来改变细胞周期时相的分布有关。

星点设计-效应面法优化太白楤木总皂苷磷脂复合物制备工艺

目的:采用星点设计-效应面法优化太白楤木总皂苷磷脂复合物(TSAT-PC)的制备工艺,并对其理化性质进行研究。方法:采用溶剂挥发法制备TSAT-PC,单因素试验考察反应溶剂、反应时间、反应温度、投料比、药物浓度对复合率的影响,星点设计-效应面法优化制备工艺,并对形成的磷脂复合物进行理化性质研究。结果:最佳制备工艺条件:反应溶剂反应时间1 h、反应温度45℃、大豆磷脂(SL)与TSAT的投料比3∶1、药物浓度16 mg/m L,复合率可达97.23%,与预测值偏差<5%;IR验证了磷脂复合物的形成,其在正辛醇中的溶解度有了较大提高。结论:采用星点设计-效应面法成功制备了TSAT-PC,改善了脂溶性,为中药制剂的进一步开发利用提供了参考。