龙牙楤木皂苷Ⅳ调控SOCS3/STAT3通路对骨质疏松大鼠骨重建的影响

目的:探讨龙牙楤木皂苷Ⅳ对骨质疏松大鼠骨重建的影响及相关机制。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、龙牙楤木皂苷Ⅳ低、中、高剂量组(25,50,100 mg·kg^(-1))及龙牙楤木皂苷Ⅳ+信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路抑制组(100 mg·kg^(-1)+3.75 mg·kg^(-1)),每组8只。除假手术组外,其余各组大鼠构建骨质疏松大鼠模型。造模后第30天开始,龙牙楤木皂苷Ⅳ各剂量组灌胃给药,假手术组和模型组大鼠给与等体积生理盐水,1次/d,持续8周;STAT3通路抑制组大鼠在灌胃给与龙牙楤木皂苷Ⅳ的同时腹腔注射Stattic(其余组大鼠腹腔注射等量生理盐水),每2 d注射1次,持续8周。测定大鼠血清及骨组织中Runt相关转录子-2(Runx2)、骨形态发生蛋白2(BMP2)、碱性磷酸酶(AKP)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)水平,检测股骨骨密度(BMD),观察股骨组织病理变化,检测骨组织中细胞因子信号负调控因子3(SOCS3)、p-STAT3/STAT3蛋白水平。结果:与模型组相比,龙牙楤木皂苷Ⅳ低、中、高剂量组大鼠血清Runx2、BMP2、AKP水平,骨组织中Runx2、BMP2、AKP、p-STAT3/STAT3蛋白水平及股骨BMD值显著升高(P<0.05),血清RANKL水平及骨组织中RANKL、SOCS3蛋白水平显著降低(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05),股骨组织病理变化得到改善。与龙牙楤木皂苷Ⅳ中、高剂量组相比,龙牙楤木皂苷Ⅳ+STAT3通路抑制组大鼠以上各指标差异有统计学意义(P<0.05),股骨组织病理变化加重。结论:龙牙楤木皂苷Ⅳ可抑制SOCS3表达,激活STAT3通路,抑制骨吸收并促进骨形成,改善骨质疏松大鼠骨重建情况。

龙牙楤木皂苷Ⅳ对原代成骨细胞分化和矿化的影响

目的研究龙牙楤木皂苷Ⅳ(TarasaponinⅣ)对原代成骨细胞的分化及矿化的影响。方法通过消化SD乳鼠颅盖骨,获得原代前成骨细胞,体外诱导培养并鉴定;采用MTT比色法检测TarasaponinⅣ(10、20、30、40、50、60、70、80、90、100μg/mL)作用于前成骨细胞的适宜质量浓度范围;用低、中、高浓度(0.5、5、50μg/mL)TarasaponinⅣ对成骨细胞进行干预,培养4 d后,试剂盒法进行细胞上清中碱性磷酸酶(ALP)活性测定;培养14 d后,按茜素红S染色试剂说明对细胞进行钙化结节染色。结果与对照组比较,TarasaponinⅣ各浓度组均能明显提高前成骨细胞活性(P<0.05、0.01),0～60μg/mL内细胞生存率呈递增趋势。与对照组比较,TarasaponinⅣ低、中、高浓度组细胞上清ALP活性均显著下降(P<0.01),中、高浓度组细胞矿化结节数目显著增多(P<0.01),且均呈剂量相关性。结论 TarasaponinⅣ可以促进前成骨细胞生长,增强成骨细胞矿化过程。

黄毛楤木的化学成分研究Ⅱ

目的对黄毛格木(Aralia decaisneana Hance)的降糖活性成分进行化学研究。方法用大孔树脂和硅胶柱色谱对黄毛楤木的水提液进行分离,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定其结构。结果得到9个齐墩果酸型皂苷类成分,分别是:楤木皂苷Ⅳ(1),楤木皂苷Ⅱ(2),楤木皂苷Ⅻ(3),楤木皂苷ⅪⅤ(4),楤木皂苷ⅩⅥ(5),楤木皂苷Ⅲ(6),黄毛楤木皂苷D(7),楤木皂苷Ⅶ(8),楤木皂苷ⅩⅤ(9)。结论 黄毛楤木皂苷D为一新化合物。

楤木皂苷对大鼠肝纤维化的保护作用

目的:研究楤木皂苷对四氯化碳致大鼠肝纤维化的保护作用及其可能的机制。方法:采用皮下注射四氯化碳致大鼠肝纤维化模型,HE染色观察肝脏组织形态学改变,检测血清肝功能、HA、LN、COI-Ⅲ、COI-Ⅳ的改变。结果:四氯化碳皮下注射可成功复制大鼠肝纤维化模型,楤木皂苷(30 mg/kg、60 mg/kg)可抑制肝脂肪变性和胶原沉积,改善肝功能,降低血清中HA、LN、COI-Ⅲ、COI-Ⅳ的含量。结论:楤木皂苷(30 mg/kg、60 mg/kg)有显著的抗肝纤维化作用,其机制可能与降低血清中HA、LN、COI-Ⅲ、COI-Ⅳ的含量有关。

基于谱-效关系的辽东楤木叶质量评价研究

目的建立辽东楤木Aralia elata叶指纹图谱,并寻找能够反映辽东楤木叶抗肿瘤活性能力的质量评价方法。方法采用70%乙醇和水饱和的正丁醇提取各批次辽东楤木叶总皂苷,运用HPLC-ELSD测试分析皂苷并建立指纹图谱,MTT法测试楤木叶总皂苷和单体皂苷对人肺腺癌A549细胞、人肝癌SMMC-7221细胞、人结肠癌HT-29细胞的抑制作用,用灰色关联法分析指纹图谱峰与抗肿瘤作用之间的关系。结果建立了含有28个共有峰的辽东楤木叶HPLC-ELSD指纹图谱,各批次图谱与共有模式图谱间相似度在0.850以上,指认并归属其中5个峰成分。各批次楤木叶总皂苷抗肿瘤作用的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)为7.39~79.13 mg/L,其中,黑龙江凤凰山7月的样品抗肿瘤效果最佳。谱-效相关性表明28个共有峰成分与抗肿瘤活性的关联度为0.4692~0.8103,其中10个成分与抗肿瘤活性间的关联度大于0.70,8个成分与抗肿瘤活性间的关联度小于0.60。图谱中有2个峰成分在各批次药材中含量都相当大,但谱-效关联度却很小。5个已知的峰成分中,楤木皂苷TTP和楤木皂苷Ⅴ抗肿瘤作用的IC50均小于190 mg/L,楤木皂苷Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ抗肿瘤作用的IC50均大于200 mg/L。结论辽东楤木叶HPLC指纹图谱及抗肿瘤相关性分析可以为辽东楤木叶的质量评价提供参考。若从已知的5种楤木皂苷中挑选质量控制成分,楤木皂苷TTP和Ⅴ要优于楤木皂苷Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ。