不同产地和不同采收期辽东楤木叶中两种皂苷的含量测定

目的:测定并比较不同产地和不同采收期辽东楤木叶中3-O-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)-β-D-葡萄吡喃糖基-齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(楤木皂苷TTP)和3-O-[β-D-葡萄吡喃糖基(1→2)]-[β-D-葡萄吡喃糖基(1→3)]-β-D-葡萄吡喃糖基-齐墩果酸-28-O-β-D-葡萄吡喃糖酯(楤木皂苷V)的含量。方法:采用高效液相色谱蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法,使用Diamonsil C_(18)(2)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(31∶69),流速1.0 m L·min^(-1),柱温30℃,蒸发光散射检测器漂移管温度110℃,载气(N2),流速3.2 m L·min^(-1)。结果:楤木皂苷TTP和楤木皂苷V分别在进样量0.51~2.55μg和0.50~4.00μg线性关系良好,相关系数分别为0.999 8和0.999 2。结果表明,不同产地和不同采收期辽东楤木叶中楤木皂苷TTP和楤木皂苷V的含量有所差异,可能与辽东楤木分布区域、生长季节及叶片生理状态有关,由实验结果可以看出,两种皂苷类成分大多在7,8月的含量相对较高,部分地区9月含量较高。结论:该方法简单、快捷、准确,可以同时测定辽东楤木叶中楤木皂苷TTP和楤木皂苷V的含量,为辽东楤木叶质量控制提供实验依据。

基于谱-效关系的辽东楤木叶质量评价研究

目的建立辽东楤木Aralia elata叶指纹图谱,并寻找能够反映辽东楤木叶抗肿瘤活性能力的质量评价方法。方法采用70%乙醇和水饱和的正丁醇提取各批次辽东楤木叶总皂苷,运用HPLC-ELSD测试分析皂苷并建立指纹图谱,MTT法测试楤木叶总皂苷和单体皂苷对人肺腺癌A549细胞、人肝癌SMMC-7221细胞、人结肠癌HT-29细胞的抑制作用,用灰色关联法分析指纹图谱峰与抗肿瘤作用之间的关系。结果建立了含有28个共有峰的辽东楤木叶HPLC-ELSD指纹图谱,各批次图谱与共有模式图谱间相似度在0.850以上,指认并归属其中5个峰成分。各批次楤木叶总皂苷抗肿瘤作用的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)为7.39~79.13 mg/L,其中,黑龙江凤凰山7月的样品抗肿瘤效果最佳。谱-效相关性表明28个共有峰成分与抗肿瘤活性的关联度为0.4692~0.8103,其中10个成分与抗肿瘤活性间的关联度大于0.70,8个成分与抗肿瘤活性间的关联度小于0.60。图谱中有2个峰成分在各批次药材中含量都相当大,但谱-效关联度却很小。5个已知的峰成分中,楤木皂苷TTP和楤木皂苷Ⅴ抗肿瘤作用的IC50均小于190 mg/L,楤木皂苷Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ抗肿瘤作用的IC50均大于200 mg/L。结论辽东楤木叶HPLC指纹图谱及抗肿瘤相关性分析可以为辽东楤木叶的质量评价提供参考。若从已知的5种楤木皂苷中挑选质量控制成分,楤木皂苷TTP和Ⅴ要优于楤木皂苷Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ。