楮实子含药血清对成骨细胞功能的影响

目的 研究楮实子对体外培养的成骨细胞增殖、分化及其功能的影响,为楮实子在骨代谢疾病中的应用提供实验依据。方法 采用酶消化法培养大鼠成骨细胞,MTT比色法检测不同浓度(5%、10%和20%)楮实子含药血清对细胞增殖的影响,并据此选择最佳浓度进行后续实验;以AKP试剂盒检测成骨细胞AKP活性、以茜素红染色检测成骨细胞形成矿化结节数量;Western blot法检测成骨细胞功能指标基因如成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX)、I型胶原(collagen type I, Coll-I)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)、骨桥蛋白(osteopontin, OPN)、骨保护素(osteoprotegerin, OPG)和骨钙素(osteocalcin, OCN)等蛋白的表达水平。结果 楮实子含药血清可显著促进成骨细胞增殖(P<0.01)、提高AKP分泌水平(P<0.01)、促进矿化结节形成(P <0.01),并显著上调OSX、Coll-I、ALP、OPN和OPG等成骨功能指标相关基因的蛋白表达(P<0.05)。结论 楮实子含药血清能提高成骨细胞功能,具有较好的促成骨活性。

楮实子预处理对对乙酰氨基酚致L02细胞损伤的保护作用

目的探讨楮实子对对乙酰氨基酚(APAP)引起的L02细胞损伤的保护作用。方法CCK-8法测定不同浓度(0.1、0.3、1.0、3.0、10.0 mg/ml)楮实子水提物溶液对正常L02细胞的存活率。L02细胞APAP染毒后,取对数生长期的L02细胞,分为正常组、APAP组(40 mmol/L)、楮实子组(1 mg/ml),采用CCK-8法测定细胞存活率,采用DCFA-DH法测定细胞内活性氧(ROS)水平。Hoechst 33258染色观察细胞凋亡;罗丹明123染色检测L02细胞内线粒体膜电位表达情况。Western blot法检测细胞JNK、p-JNK、78GRP78、CHOP的表达水平。结果与0.1 mg/ml楮实子水提物比较,0.3、1.0、3.0、10.0 mg/ml楮实子水提物细胞活性降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与正常组比较,APAP组细胞存活率下降,细胞凋亡平均荧光强度值升高(P<0.05);与APAP组比较,1 mg/ml楮实子水提物细胞存活率升高,细胞凋亡平均荧光强度值降低(P<0.05)。APAP组ROS荧光强度值高于正常组,差异有高度统计学意义(P<0.01);楮实子组ROS荧光强度值低于APAP组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。APAP组线粒体膜电位平均荧光强度值低于正常组,差异有高度统计学意义(P<0.01);楮实子组线粒体膜电位平均荧光强度值高于APAP组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。各组JNK蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与正常组比较,APAP组p-JNK、GRP78、CHOP蛋白表达水平升高(P<0.01);与APAP组比较,楮实子组p-JNK、GRP78、CHOP蛋白表达水平降低(P<0.01)。结论楮实子可能通过抑制JNK活化,修复线粒体膜通透性,抑制内质网应激,减少ROS含量,抑制细胞凋亡,发挥保护APAP致L02细胞损伤的作用。

楮实子对肝星状细胞增殖、凋亡及TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路的影响

目的 探究楮实子对肝星状细胞(HSC)增殖、凋亡及Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)/肿瘤坏死因子-α(TNF-α)信号通路的影响。方法 体外培养大鼠肝星状细胞系(HSC-T6),正常培养细胞作为空白组;使用转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激细胞24 h后,分别添加不同质量浓度(0、1、5、10 g/L)的楮实子培养细胞,依次作为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。MTT法、Annexin V-FITC/PI双染法检测楮实子对HSC-T6细胞增殖、凋亡的影响;ELISA法检测HSC-T6细胞上清液中TNF-α、白细胞介素-6(IL-6)含量;Western blotting法检测HSC-T6细胞中TLR4、NF-κB、TNF-α蛋白表达。结果 楮实子可抑制活化的HSC-T6细胞增殖,促进其凋亡,且呈质量浓度依赖性(P<0.05);楮实子可降低活化的HSC-T6细胞上清液中TNF-α、IL-6水平,下调细胞中TLR4、NF-κB、TNF-α蛋白水平,并均呈质量浓度依赖性(P<0.05)。结论 楮实子可抑制HSC-T6细胞增殖,促进HSC-T6细胞凋亡,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路激活有关。

楮实子生物碱的细胞毒作用研究

目的:对楮实子总生物碱抗肿瘤细胞的活性进行探讨。方法:分别用MTT及集落形成法考察楮实子中提得的总生物碱对Hela、BEL-7402、A375、SMM1990、Saos-2细胞株的细胞毒作用。结果:当药物浓度在10μg/L以下,抑制作用不明显。随着药物浓度的升至50μg/L时,药物对肿瘤细胞生长的抑制作用较明显,MTT法测得抑制率在20%以上,集落形成法测得抑制率在30%以上。而当药物浓度达到100μg/L时,楮实子总生物碱显示出较为显著的肿瘤细胞抑制作用,两种方法的细胞生长抑制率分别在50%和60%以上。结论:楮实子中总生物碱有较强的细胞毒作用。

楮实子的氨基酸及脂肪油成分分析

使用氨基酸自动分析仪对楮实子的游离与结合氨基酸进行分析 ,用气相色谱 -质谱联用仪分析测定其脂肪酸成分。结果发现楮实子含有 14种以上的氨基酸 ,主要为谷氨酸、精氨酸等。油中的脂肪酸组成主要为亚油酸以及棕榈酸、硬脂酸等 ,其中不饱和脂肪酸十八碳 - 8,11-二烯酸占总脂肪酸的 83.6 2 %。该结果表明 ,楮实子含有丰富的氨基酸与不饱和脂肪酸 。

楮实子红色素体外抗氧化作用研究

目的:探讨楮实子红色素(Fructus B roussonetiaHaem atochrom e,FBH)体外抗氧化作用。方法:采用H2O2和Fe2+系统产生羟基自由基,NADH-PMS-NBT系统产生超氧阴离子自由基,并观察了FBH对羟基自由基及超氧阴离子自由基清除效果以及对H2O2诱导小鼠红细胞溶血的抑制和对肝组织匀浆自氧化终产物MDA及VC-Fe2+系统引起的线粒体的形态改变的抑制作用。结果:FBH能显著清除超氧阴离子及羟基自由基,抑制H2O2诱导小鼠红细胞溶血和肝匀浆自氧化,对肝线粒体也有保护作用。结论:FBH有较强的体外抗氧化作用。

中药楮实子及其原植物的本草考证

本文报道中药楮实子及其原植物构树的本草学记载、名称、功效及产地等考证结果。

中药楮实子的临床应用

介绍了中药楮实子近几年来在临床各科的应用情况 。

不同产地楮实子及伪品的近红外漫反射指纹图谱聚类分析

目的:对不同产地楮实子及其伪品进行指纹图谱鉴定分析。方法:用近红外漫反射光谱技术及聚类分析方法对楮实子药材及其伪品进行分析。结果:不同产地楮实子之间指纹图谱存在一定差异,与伪品差异较大。结论:该方法可用于楮实子药材的指纹图谱鉴定,快速方便。不同产地楮实子之间的差异与药材性状有一定关联。

楮实子对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠免疫功能的影响

目的:研究楮实子对环磷酰胺模型小鼠免疫功能的影响。方法:以环磷酰胺制备小鼠免疫低下模型并结合体外药理实验,测定灌胃给药后小鼠体内巨噬细胞吞噬率、血清溶血素抗体水平,并观察植物血凝素诱导T淋巴细胞的增殖反应。采用含药血清体外培养小鼠腹腔巨噬细胞,MTT法考察巨噬细胞的活性,并观察体外培养的巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数。结果:楮实子提高免疫抑制小鼠碳粒廓清率,促进血清溶血素形成。结论:楮实子有提高免疫抑制小鼠免疫功能的作用,但未显示出促进T淋巴细胞增殖的作用。

中药楮实子的研究现状与展望

综述了中药楮实子的临床与实验研究进展,楮实子味甘性寒无毒,具有滋肾益阴、清肝明目、利水消肿等功效,临床可用于治疗老年痴呆症、不孕症、肝损伤、眼部疾病、腹腔积液等病,现代研究发现楮实子含有丰富的氨基酸、脂肪酸、红色素、生物碱、矿物质、多糖等化学成分,具有抗氧化、增加免疫、降血脂、抗肿瘤、保护肝功能等作用。指出楮实子不仅具有补益作用,还有祛邪作用,但其药效成分及其作用机制尚不完全明确,有待进一步深入研究,为寻找有效的单体、开发新药提供依据。

楮实子化学成分及药理作用研究进展

楮实子为桑科植物构树Broussonetia papyrifera（L．）Vent．的干燥成熟果实，秋季果实成熟时采收，洗净，晒干，除去灰白色膜状宿萼及杂质。楮实子的药用始于《名医别录》，被载为上品，味甘，性寒，无毒，后历年版《中华人民共和国药典》（一部）均有记载。楮实子在全国大部分地区有分布，主产于河南、湖北、湖南、山西、甘肃等地。楮实子具有补肾清肝、明目、利尿的功效，多用于腰膝酸软、虚劳骨蒸、头晕目眩、目生翳膜、水肿胀满等症。笔者现对近年来楮实子化学成分和药理作用的研究进行综述。

楮实子化学成分研究

目的:对楮实子的化学成分进行研究。方法:楮实子80%乙醇提取物经硅胶柱反复层析纯化,利用理化常数和波谱数据鉴定化学结构。结果:从正丁醇部位分离得到6个化合物,分别鉴定为异两面针碱(1)、白屈菜红碱(2)、薯蓣皂苷元3-O-β-D-吡喃葡萄糖(3)、蔗糖(4)、β-谷甾醇(5)和岩藻甾醇(6)。结论:6个化合物均为首次从楮实子中分离得到。

响应面法提取楮实子多糖研究

楮实子是具有广阔应用前景的传统中药材。利用水提醇沉法获得了楮实子多糖,研究了提取次数、温度、时间、及液料比等因素对楮实子多糖提取效果的影响,在单因素基础上,进行响应面分析实验,结果表明,楮实子多糖的最佳提取条件为:液料比20,水浴浸提时间30 min,温度为75℃,提取次数为3次,在此条件下楮实子多糖的提取率为3.45%。

楮实子油的超临界CO_2萃取工艺研究及其GC分析

应用超临界CO2萃取技术,研究了楮实子油的提取工艺,通过正交试验着重探讨了萃取温度、压强和时间对楮实子油萃取率的影响,得出最佳萃取工艺条件:萃取温度40℃、压强30MPa、萃取时间2h。用气相色谱(GC)对其进行成分分析,得知楮实子油中含有大量的不饱和脂肪酸,含量达88.16%,油中主要成分是亚油酸,含量达到81.53%。

楮实子中总皂苷含量测定

目的:建立楮实子总皂苷的含量测定方法。方法:以薯蓣皂苷为对照品,采用分光光度法,高氯酸显色,在407nm处测定吸光度,计算楮实子中总皂苷的含量。结果:薯蓣皂苷的质量浓度在8.04～40.20μg.mL-1与吸光度呈良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为99.8%(n=9),RSD=2.01%;楮实子中总皂苷平均含量为0.48%(n=10),RSD=1.88%。结论:建立了楮实子中总皂苷含量测定方法,此方法简便、准确,稳定性、重现性好,可用于楮实子的质量控制。

楮实子总生物碱抗肿瘤作用初步研究

目的研究楮实子总生物碱的抗肿瘤作用。方法建立小鼠H22,S180,ESC肿瘤模型,从整体水平上观察楮实子总生物碱对肿瘤生长的影响。结果60 mg/kg楮实子总生物碱对3种肿瘤小鼠的抑瘤率均在40%以上。结论楮实子总生物碱有一定的抗肿瘤活性。

楮实子油的化学成分及含量分析

The constituents of oil from Broussonetia papyrifera (L.)Vent. fruits were analyzed qualitatively and quantitatively by means of GC-MS-COMPUTER DATABASE system. 27 compounds from the oil were identified. Among them, linoleic acid,methyl palmitate,oleic acid and linoleic acid ester were major constituents, which relative contents were 63.982%,20.914%,4.263% and 3.505% respectively.And the absolute content of linoleic acid was determined (51.26%) by GC external standard method. Analyzed key physical constants related to its quality standard, the results indicated that relative density, refraction and pH were 0.911 7-0.914 0,1.473 1-1.473 5 and 5.50-5.78 respectively.

中药楮实子滋补强壮作用机理研究

为探讨中药楮实子的滋补强壮作用机理，本文通过小鼠游泳实验、缺氧条件下生存时间实验表明楮实子油、楮实子果汁及醇提物均有较好的抗疲劳、耐缺氧作用。对于小鼠脾系数和胸腺系数也有不同程度的影响。提示楮实子是具有开发潜力的保健中药。

楮实子油精提前后脂肪酸的GC-MS分析比较

首次采用皂化、水解和冷冻等方法纯化楮实子油中的不饱和脂肪酸,确定较好的皂化条件为:碱含量为原油重的35%,温度为80~90℃;冷冻处理的最佳条件为:加5倍楮实子油重的丙酮溶解后,置入-8^-10℃保持48 h,去掉饱和脂肪酸,可使不饱和脂肪酸的含量由65%提高到88%。