胡桃楸树皮提取物对SMMC-7721、MCF-7和A549肿瘤细胞的抑制作用及其机制

目的:观察胡桃楸树皮提取物(JMME)对SMMC-7721、MCF-7和A549 3种肿瘤细胞的生长抑制作用,确定其抑瘤的药用价值,通过检测JMME诱导肿瘤细胞凋亡、抑制端粒酶活性变化阐述其抑瘤机制。方法:分别以25、50、100、200、400和800 mg.L-1JMME作用于体外培养的SMMC-7721、MCF-7和A549肿瘤细胞72 h,采用MTT法检测生长抑制率;以200 mg.L-1JMME作用于体外培养的SMMC-7721、MCF-7和A549,于倒置显微镜下观察细胞形态学变化;琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡;PCR-ELISA法检测端粒酶活性。结果:不同浓度JMME(25、50、100、200、400和800 mg.L-1)对SMMC-7721的细胞生长抑制率(%)分别为13.06、21.77、29.88、41.74、69.82和78.08;对MCF-7的抑制率(%)为24.91、38.63、49.72、61.84、65.69和81.28;对A549的抑制率(%)为12.32、26.21、41.65、55.38、62.87和80.13;与对照组比较,JMME各浓度作用的3种肿瘤细胞的生长抑制率均升高(P<0.05),抑制率随JMME对SMMC、MCF-7和A549细胞的浓度的增加而增高(P<0.05)。JMME对SMMC、MCF-7和A549细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为211.21、111.07和176.20 mg.L-1,对MCF-7的IC50小于其他两种瘤细胞株。经不同浓度JMME作用单位视野内细胞数量明显减少,细胞间隙增大,细胞体积明显缩小,细胞失去原有的形态,胞体皱缩变圆,出现膜发泡现象,对照组无此变化。提取DNA进行琼脂糖凝胶电泳,见DNA Ladder,表明3种肿瘤细胞经不同浓度JMME作用后出现不同程度凋亡。3种肿瘤细胞与阴性对照组比较端粒酶活性升高,而经过JMME作用后端粒酶活性均受到了抑制,抑制率分别为42.86%、73.30%和58.78%。结论:胡桃楸树皮提取物在体外有抗肿瘤活性,其机制可能与其诱导肿瘤细胞凋亡?抑制端粒酶活性有关。

减压蒸馏法提取核桃楸树皮中的胡桃醌

胡桃醌(5-羟基-1,4-萘醌)是从核桃楸中提取分离出来的一种萘醌类活性物质。研究采用超声波辅助浸提和减压蒸馏等方法,从核桃楸树皮中提取制得胡桃醌产品,产品得率0.09%。分别用FT-IR表征了产品的有机官能团、用GC-MS分析了产品的化学组成和产品中胡桃醌的相对含量(GC含量达96.42%)、通过1HNMR确认了产品的胡桃醌结构。本研究提供了一种从核桃楸树皮中简便快捷地提取制得高纯度的胡桃醌产品的方法。

分光光度法测定核桃楸树皮中胡桃醌的含量

采用超声波辅助浸提法与减压蒸馏法提取核桃楸树皮中的胡桃醌,用分光光度法测定核桃楸树皮中胡桃醌的含量,并利用GC-MS联用技术对样品液的化学组成进行分析。研究结果表明:检测波长为426nm,核桃楸树皮中的胡桃醌含量为0.0933%,重复性良好;核桃楸树皮样品液在放置10h内稳定性良好;加样回收率为99.6%;GC-MS分析核桃楸树皮样品液中胡桃醌相对含量达到96.42%。

核桃楸树皮乙醇提取物的杀虫活性

采用常规提取法浸提桃楸树皮的杀虫活性成分。研究结果表明,用质量分数95％乙醇浸提核桃楸树皮,其提取物对舞毒蛾及甘蓝夜蛾幼虫均有较强的胃毒作用和触杀作用。对舞毒蛾的触杀作用强于胃毒作用,对甘蓝夜蛾的触杀作用和胃毒作用无显著差异。施药时间≥4 d、药液浓度≥10 g／L时,对舞毒蛾、甘蓝夜蛾的触杀作用及胃毒作用的平均校正死亡率均超过50％。同时,对舞毒蛾和甘蓝夜蛾的触杀作用及胃毒作用分别进行了校正死亡率-施药浓度毒力分析和死亡率-施药时间毒力分析。

核桃楸树皮提取物抗肿瘤及免疫调节作用的研究

研究核桃楸树皮提取物（HT）的抗肿瘤及免疫调节作用．建立荷瘤小鼠模型，检测HT抑瘤率及对免疫器官、腹腔巨噬细胞吞噬功能、T淋巴细胞增殖、血清IL一2、TNF-α水平以及机体免疫功能的影响；建立小鼠免疫功能低下模型，检测HT对外周血细胞的影响．实验表明HT具有明显的抑瘤作用，高剂量组抑瘤率达54．6％，可显著提高荷瘤小鼠胸腺及脾脏系数、巨噬细胞吞噬功能、T淋巴细胞增殖、IL-2及TNF-α的表达以及延长游泳及耐缺氧时间，并能升高免疫抑制小鼠的白细胞（p＜0．050～0．001）．HT可有效抑制肿瘤增殖并调节机体的免疫功能．

梓白皮、桑白皮和楸树皮对H_2O_2致损的L-O2肝细胞的保护作用

目的研究梓白皮、楸树皮和桑白皮对体外H2O2致损肝细胞的保护作用及其机制。方法采用H2O2(100μmol/L)体外诱导L-O2肝细胞损伤,CCK-8法检测细胞活性,检测细胞上清中天门冬氨酸转换酶(AST)、丙氨酸氨基转换酶(ALT),超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,ELISA法检测细胞中TNF-α和IL-1水平,流式细胞术检测细胞周期。结果 H2O2可以改变L-O2细胞的形态结构,抑制其活性;促进细胞代偿性增殖;提高细胞AST、ALT和TNF-α、IL-1的水平;降低细胞SOD活性。而梓白皮、楸树皮和桑白皮可拮抗H2O2对细胞的损伤。结论梓白皮、楸树皮和桑白皮对H2O2致损的LO2肝细胞有保护作用。

核桃楸树皮乙醇提取物的成分分析

采用常规提取法浸提核桃楸树皮的活性成分,采用GC-MS联用技术对核桃楸树皮乙醇提取物中氯仿萃取物和乙酸乙酯萃取物的化学组成和各成分进行分析。结果表明,核桃楸树皮乙醇提取物中氯仿萃取物的主要活性成分分别为:5-羟基-1,4-萘醌(胡桃醌,质量分数36.65%),4-羟基-2-甲氧基肉桂醛,2,3-二氢苯并呋喃,香草醛,2-甲氧基-4-乙烯基苯酚。核桃楸树皮乙醇提取物中乙酸乙酯萃取物的主要活性成分分别为:1,2,3-苯三醇(质量分数42.31%),5-羟基-1,4-萘醌(胡桃醌,质量分数12.33%),7-甲氧基-1-四氢萘酮(质量分数11.26%),5-羟甲基-2-呋喃醛,3,4-二氢-6,7-二羟基-1(2H)-萘酮,4-羟基-2-甲氧基肉桂醛,D-阿洛糖。

核桃楸树皮中胡桃醌提取工艺优化

以核桃楸树皮为试材,采用正交实验的方法对核桃楸树皮进行提取,并用HPLC技术对其化学成分进行检测,应用标准曲线法计算胡桃醌的含量。结果表明:从核桃楸树皮中提取胡桃醌的最佳工艺料液比1∶12g/mL,乙醇浓度95%,回流提取2次,每次回流50min。

核桃楸树皮水提物对BALb/c荷瘤小鼠免疫细胞因子影响的实验研究

目的探讨核桃楸树皮水提物对BALb/c荷瘤小鼠治疗作用及对免疫细胞因子水平的影响。方法采用细胞培养,小鼠移植瘤实验,药物瘤体治疗、免疫细胞因子ELISA检测等方法。结果小鼠移植瘤模型构建成功。在瘤体治疗后,小鼠平均脾重比高、中、低用药组显著高于对照组。在免疫细胞因子的分析中,各实验组动物血清IL-2、IL-10的水平无显著性差异,而高剂量用药组荷瘤小鼠血清IL-10水平显著降低,并且具备剂量-效应关系。结论在肿瘤进展过程中,达至一定剂量的核桃楸树皮水提物具有调节机体免疫功能作用,显著降低血清中IL-10水平为其中一途径。

核桃楸树皮不同成分对人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响

目的观察核桃楸树皮提取物的不同有效成分对人胃癌细胞株SGC-7901细胞增殖的影响。方法采用层流分离法从核桃楸树皮提取物中分离出6种单体化合物,每种药物设4个不同浓度,以噻唑蓝比色方法检测6种核桃楸树皮化合物对胃癌细胞增殖的抑制作用,并以光学显微镜观察药物作用后的细胞形态学变化。结果 6种核桃楸树皮化合物均具有细胞毒作用,对人胃癌细胞SGC-7901具有抑制作用,其中化合物1、化合物2和化合物6对人胃癌细胞SGC-7901的抑制呈时效和量效关系,药物作用后细胞形态有明显变化。结论体外实验显示三种核桃楸树皮提取物的有效成分对人胃癌细胞SGC-7901具有抑制作用,并呈时效和量效关系。

核桃楸树皮化学成分及药物活性研究进展

核桃楸树皮是取自胡桃科胡桃属植物核桃楸(也叫胡桃楸,山核桃),经干制得到,其主要成分有醌类,黄酮类,酚类,挥发油以及苷类等。核桃楸树皮提取成分具有抗氧化,抗肿瘤,抗炎症,抗HIV,抗寄生虫等活性。对其活性成分的进一步研究将有助于新型药物的开发。

核桃楸树皮总黄酮提取方法及工艺研究

对核桃楸树皮总黄酮提取方法及相关影响因素进行探讨。以总黄酮含量为指标,分别考察常规提取法、超声波提取法、回流提取法、索氏提取法对提取率的影响,以及溶剂的种类、浓度与温度对提取率的影响。结果表明,超声波提取法的总黄酮提取率最高;使用60%乙醇在60℃时的总黄酮提取率最高。

核桃楸树皮中胡桃醌提取方法及其工艺研究

对核桃楸树皮中胡桃醌的提取方法及相关影响因素进行探讨。以胡桃醌含量为指标,分别考察冷浸法、超声波提取法、回流提取法对提取率的影响,以及液料比、超声时间对提取率的影响,并对提取方法(A)、液料比(B)和提取时间(C)三因素设计正交试验。结果表明,影响胡桃醌提取率的主次因素为A>B>C,即提取方法>液料比>提取时间,最佳提取工艺为A2B3C1,即使用超声法,在液料比为12∶1时,提取20 min。

核桃楸树皮的化学成分及其抗氧化活性研究

采用小鼠实验的方法,对核桃楸树皮的化学成分及其抗氧化活性进行了研究。在控制X线照射与给药两个条件的基础上,观察小鼠肝组织H2O2与MDA含量情况。得出结论:X线照射会导致小鼠机体出现氧化损伤,核桃楸树皮中,以黄酮类化合物为主的化学成分,具有较高的抗氧化活性,可对机体的氧化产生抑制作用,降低机体H2O2以及MDA含量,内在抗癌及抗肿瘤等方面,具有较好的使用前景。

刺楸树皮中总皂苷的提取工艺优化及其抑菌活性

对刺楸树皮中总皂苷的提取工艺进行优化,并评价其抑菌活性。选用乙醇回流法,以刺楸树皮为原料,总皂苷得率为评价指标,考察提取时间、提取温度、乙醇体积分数、料液比对总皂苷得率的影响。在单因素试验基础上,利用响应面分析法优化刺楸树皮中总皂苷的提取工艺。结果表明:最佳提取条件为提取温度70℃、提取时间1.5 h、乙醇体积分数70%、料液比1∶15(g∶mL)。该条件下刺楸树皮总皂苷得率为3.33%。抑菌试验结果表明,刺楸树皮中总皂苷对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、酵母菌均有抑制作用,且在1.0 mg/mL的质量浓度下对细菌的抑制作用更强。

核桃楸树皮水提取物抗突变和抑瘤作用研究

目的 研究核桃楸树皮水提取物的抗突变和抑瘤作用。方法以小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠睾丸染色体畸变实验，观察核桃楸树皮水提取物的抗突变作用；以S-180和H-22移植性肿瘤观察其抑瘤效果。结果核桃楸树皮水提取物高、低剂量组和环磷酰胺阳性对照组的微核率分别为17．6‰、25．3．5‰、35．7％。；核桃楸树皮水提取物高、低剂量组和丝裂霉素c阳性对照组的畸变细胞率分别为1．7％、2．3％、4．7％；其它2组与对照组比较差异均有显著性（P〈0．05）。核桃楸树皮水提取物对环磷酰胺诱发的小鼠骨髓细胞微核形成和丝裂霉素c诱发的小鼠睾丸细胞染色体畸变均有明显的抑制效果；对S-180和H-22小鼠移植性肿瘤生长也有明显的抑制作用。结论核桃楸树皮水提取物具有较好的抗突变和抑瘤作用。

野生核桃楸树皮中黄酮类成分的高效液相色谱-质谱法分析

目的:制备和分析野生核桃楸树皮水提物中的黄酮类成分。方法:采用碱溶酸沉法提取核桃楸树皮水提物中的黄酮类化合物,硅胶柱层析法进行分离纯化,采用液相色谱-质谱法(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)检测黄酮类化合物的成分。结果:由色谱图可以看出,保留时间为4.235s和4.955s时物质的相对含量为62.00%和10.63%,为该黄酮类提取物的2个主要成分。由质谱图可以推断,其含有的主要成分为甲氧基黄酮和柚皮素。结论:液相色谱-质谱法对于快速分析野生核桃楸树皮水提物中的黄酮类活性成分具有可行性。

核桃楸树皮乙醇提取物乙酸乙酯相的质谱分析

目的:为进一步开发和利用核桃楸树皮的药用成分提供参考。方法:从核桃楸树皮70%的乙醇回流提取物中,分别经溶剂分级萃取,取乙酸乙酯萃取相,经硅胶柱色谱分离,得到2个条带,收集后进行质谱分析。结果:供试品Ⅰ的2个主要成分的分子量在317和437左右,供试品Ⅱ的3主要成分分子量在303、437和453左右,其中质谱分子量303、317、437的组分在供试品Ⅰ和Ⅱ中均有出现。结论:初步判定两样品中可能含有槲皮素及杨梅苷,另外还可能含新的未知成分,需要做进一步的分离鉴定。

核桃楸树皮提取物的抗肿瘤作用

目的:研究核桃楸树皮提取物的抗肿瘤作用。方法:以超声波辅助及减压蒸馏法浸提核桃楸树皮,用核桃楸树皮提取物对S180肉瘤和H22肝荷瘤小鼠进行体内、体外抑瘤实验,并与空白对照组进行比较。结果:核桃楸树皮提取物在50～200mg.kg-1剂量及25～100mg.L-1质量浓度范围内对S180和H22肝荷瘤小鼠有明显的瘤抑制作用(P<0.01),抑瘤率分别为61.76%～69.85%;65.92%～73.18%;A570分别为1.5～1.08;1.6～1.01,且与剂量和浓度呈正相关。结论:核桃楸树皮提取物具有显著的抗肿瘤作用。

核桃楸树皮提取物对志贺氏菌抑菌效果研究

目的:观察核桃楸树皮提取物对志贺氏菌的抑菌效果。方法:采用两倍稀释法和纸片琼脂扩散法考察桃楸树皮提取物对志贺氏菌的抑菌作用。结果:核桃楸树皮提取物对痢疾志贺氏Ⅰ型菌、痢疾志贺氏Ⅱ型菌、鲍氏志贺Ⅰ型菌、宋内氏志贺菌均为0.0313g/mL,福氏志贺Ⅱ型菌为0.0625g/mL。结论:核桃楸树皮提取物对志贺氏菌均有良好的抑菌作用,各菌对药物的敏感强弱顺序为:宋内氏志贺菌>鲍氏志贺Ⅰ型菌>痢疾志贺Ⅰ型菌>痢疾志贺菌Ⅱ型菌>福氏志贺Ⅱ型菌。