目的:探讨槐定碱对神经胶质瘤U87细胞增殖和侵袭的抑制作用以及U87细胞DNA拓扑异构酶I(DNA TOP I)、EGFR-酪氨酸激酶(EGFR-TK)、基质金属蛋白酶2(MMP2)和氨肽酶N(APN)活性的影响。方法:将不同浓度槐定碱加入到神经胶质瘤U87细胞株中,利...目的:探讨槐定碱对神经胶质瘤U87细胞增殖和侵袭的抑制作用以及U87细胞DNA拓扑异构酶I(DNA TOP I)、EGFR-酪氨酸激酶(EGFR-TK)、基质金属蛋白酶2(MMP2)和氨肽酶N(APN)活性的影响。方法:将不同浓度槐定碱加入到神经胶质瘤U87细胞株中,利用MTT法测定槐定碱对U87细胞和人脑正常星型胶质HEB细胞生长的抑制作用,酶标仪法检测槐定碱对细胞凋亡蛋白caspase-3活性,采用Transwell小室法分析U87细胞的侵袭能力;采用非放射性NF-κB EMSA试剂盒测定U87细胞中NF-κB表达。结果:随着槐定碱浓度的增加(5、10、25、50、100μmol/L),神经胶质瘤U87细胞生长抑制率不断的增加,但HEB细胞的生长并未受到明显的抑制[(11.23±1.18)%vs(2.43±0.29)%、(22.48±3.21)%vs(3.65±0.42)%、(43.21±4.09)%vs(4.03±0.55)%、(57.31±5.09)%vs(5.21±0.43)%、(77.98±6.98)%vs(7.22±0.78)%,均P<0.05];与空白组比较,槐定碱存在下的U87细胞侵袭能力明显降低[(87.43±7.33)%、(65.12±6.16)%、(50.63±4.56)%、(35.32±4.04)%、(23.46±2.32)%vs(120.32±9.32),均P<0.05]。槐定碱对DNA TOP I、EGFR-TK、APN和MMP-2的半抑制率IC_(50)分别为(22.43±2.21)、(31.25±3.09)、(6.32±0.32)和(8.23±0.63)μmol/L,但U87细胞中凋亡蛋白caspase-3活性呈增强趋势;槐定碱能够下调NF-κB信号的表达。结论:低毒性的槐定碱可能通过降低DNA TOP I、EGFR-TK、APN和MMP-2活性,并下调NF-κB信号通路和激活凋亡caspase-3酶联反应的方式,对神经胶质瘤U87细胞的侵袭、增殖和信号通路产生抑制作用。展开更多
目的探讨槐定碱不同给药方式对内毒素诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞表达CD14、p38 MAPK及i NOS的影响及意义。方法采用LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞建立细胞炎症反应模型;实验细胞分为4组(n=6):空白对照组、LPS组、槐定碱预处理组、槐定碱...目的探讨槐定碱不同给药方式对内毒素诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞表达CD14、p38 MAPK及i NOS的影响及意义。方法采用LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞建立细胞炎症反应模型;实验细胞分为4组(n=6):空白对照组、LPS组、槐定碱预处理组、槐定碱预混合组;分别利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测RAW264.7巨噬细胞CD14、p38、i NOS m RNA表达量及蛋白表达量。结果槐定碱2种给药方式(预处理及预混合)均可显著下调LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞p38、i NOS m RNA及CD14、p-p38、i NOS蛋白表达;槐定碱与LPS预混合可下调LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞CD14 m RNA表达,而槐定碱预处理对CD14 m RNA表达无明显影响。结论槐定碱可能通过调控CD14、p38、i NOS表达与活化发挥抗内毒素效应。展开更多
文摘目的:探讨槐定碱对神经胶质瘤U87细胞增殖和侵袭的抑制作用以及U87细胞DNA拓扑异构酶I(DNA TOP I)、EGFR-酪氨酸激酶(EGFR-TK)、基质金属蛋白酶2(MMP2)和氨肽酶N(APN)活性的影响。方法:将不同浓度槐定碱加入到神经胶质瘤U87细胞株中,利用MTT法测定槐定碱对U87细胞和人脑正常星型胶质HEB细胞生长的抑制作用,酶标仪法检测槐定碱对细胞凋亡蛋白caspase-3活性,采用Transwell小室法分析U87细胞的侵袭能力;采用非放射性NF-κB EMSA试剂盒测定U87细胞中NF-κB表达。结果:随着槐定碱浓度的增加(5、10、25、50、100μmol/L),神经胶质瘤U87细胞生长抑制率不断的增加,但HEB细胞的生长并未受到明显的抑制[(11.23±1.18)%vs(2.43±0.29)%、(22.48±3.21)%vs(3.65±0.42)%、(43.21±4.09)%vs(4.03±0.55)%、(57.31±5.09)%vs(5.21±0.43)%、(77.98±6.98)%vs(7.22±0.78)%,均P<0.05];与空白组比较,槐定碱存在下的U87细胞侵袭能力明显降低[(87.43±7.33)%、(65.12±6.16)%、(50.63±4.56)%、(35.32±4.04)%、(23.46±2.32)%vs(120.32±9.32),均P<0.05]。槐定碱对DNA TOP I、EGFR-TK、APN和MMP-2的半抑制率IC_(50)分别为(22.43±2.21)、(31.25±3.09)、(6.32±0.32)和(8.23±0.63)μmol/L,但U87细胞中凋亡蛋白caspase-3活性呈增强趋势;槐定碱能够下调NF-κB信号的表达。结论:低毒性的槐定碱可能通过降低DNA TOP I、EGFR-TK、APN和MMP-2活性,并下调NF-κB信号通路和激活凋亡caspase-3酶联反应的方式,对神经胶质瘤U87细胞的侵袭、增殖和信号通路产生抑制作用。
文摘目的探讨槐定碱不同给药方式对内毒素诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞表达CD14、p38 MAPK及i NOS的影响及意义。方法采用LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞建立细胞炎症反应模型;实验细胞分为4组(n=6):空白对照组、LPS组、槐定碱预处理组、槐定碱预混合组;分别利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测RAW264.7巨噬细胞CD14、p38、i NOS m RNA表达量及蛋白表达量。结果槐定碱2种给药方式(预处理及预混合)均可显著下调LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞p38、i NOS m RNA及CD14、p-p38、i NOS蛋白表达;槐定碱与LPS预混合可下调LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞CD14 m RNA表达,而槐定碱预处理对CD14 m RNA表达无明显影响。结论槐定碱可能通过调控CD14、p38、i NOS表达与活化发挥抗内毒素效应。
