槐花多糖的提取、纯化和抗氧化活性分析

优化槐花多糖的提取工艺,并对分离纯化出的单一多糖组分SJP进行结构表征及抗氧化活性的研究。以粗多糖得率为评价指标,采用单因素结合响应面法探究水提法提取槐花多糖的最佳条件。在最佳条件下提取出的粗多糖通过脱蛋白、透析和Sephadex G-200凝胶柱层析得到纯化多糖组分SJP,采用高效液相色谱(HPLC)法测定其分子量,并对其进行化学成分的测定、刚果红实验和X-射线衍射(XRD)分析。以DPPH·、·OH、ABTS^(+)·清除率和总还原力为指标,探究SJP的抗氧化活性。结果表明,槐花多糖的最佳提取工艺条件为料液比1:20 g/mL,提取时间120 min,醇沉浓度60%,此条件下多糖的实际得率为3.94%。HPLC结果表明SJP是一种分子量为2.32×10^(6)Da的均质多糖。SJP中总糖含量、蛋白质含量和糖醛酸含量分别为93.47%±0.83%、1.62%±0.13%和7.13%±0.51%。刚果红实验表明SJP不含三螺旋结构,XRD结果表明SJP结晶度低,为无定型结构。SJP清除DPPH、OH、ABTS+自由基的IC_(50)值分别为1.09、4.31、1.39 mg/mL,在5 mg/mL浓度下,总还原力为0.57,说明其具有一定的抗氧化活性。综上所述,本研究提取、分离纯化槐花多糖的工艺切实可行,所得多糖纯度较高且具有一定的抗氧化能力。

槐花多糖的提取工艺及抗氧化活性研究

【目的】探讨槐花水溶性多糖提取的工艺条件及其抗氧化活性。【方法】采用四因素三水平正交试验设计,研究了提取温度、时间、次数和料液比等因素对槐花多糖提取率的影响,考察了Sevage法、三氯乙酸法、盐酸法、胰蛋白酶+Sevage法对槐花多糖所含蛋白的脱除效果,并对槐花多糖的还原能力,及清除羟基自由基、超氧阴离子自由基能力进行了研究。【结果】提取槐花多糖的工艺条件为:料液比1∶25,提取温度80℃,提取时间6 h,提取次数4次。槐花多糖的最佳清除蛋白方法为胰蛋白酶+Sevage法,蛋白清除率为85.23%。抗氧化试验结果表明,槐花多糖具有较好的抗氧化活性,是一种效果好、安全性高的新型天然抗氧化物质。【结论】获得了槐花水溶性多糖提取的最佳工艺条件,该工艺下槐花多糖的得率为3.40%。

槐花多糖提取工艺的研究

采用单因素实验和正交试验设计探讨槐花多糖提取工艺条件对提取率的影响,研究了料液比、提取温度、提取时间等因素对槐花多糖提取率的影响。提取槐花多糖的最佳工艺条件为料液比1∶25、提取温度80℃、提取时间6 h,该工艺条件下槐花多糖的提取率为3.10%。

正交实验优选槐花多糖的最佳提取工艺及抑菌活性研究

优选槐花多糖的提取工艺和含量,采用水提法和正交实验法研究了溶媒比、浸提温度和浸提时间3因素对槐花中多糖提取的影响,筛选出优化水平组合:料液比为1:15、浸提温度是95℃、浸提时间是6h,槐花多糖的含量为0.0626g/g,且对金黄葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均有一定的抑菌活性,结果可为进一步研究开发提供依据。

槐花多糖对支气管败血波氏杆菌的免疫增强作用

在兔支气管败血波氏杆菌灭活疫苗中加入不同剂量的槐花多糖,制备兔波氏杆菌槐花多糖灭活苗。选取体质量1kg左右的健康獭兔72只,随机分为6组,其中Ⅰ～Ⅲ组为槐花多糖疫苗组(槐花多糖含量分别为60,40,20g/L),Ⅳ组为兔波氏杆菌蜂胶疫苗对照组,Ⅴ组为无多糖的兔波氏杆菌疫苗对照组,Ⅵ为空白对照组,各组分别于免疫后0,3,7,14,21,28,35,42d采血,用平板凝集试验检测血清抗体效价,全自动血细胞分析仪测定淋巴细胞比率,试剂盒检测血清中IL-2的含量。结果显示,Ⅰ～Ⅳ组各指标均高于Ⅴ组,其中Ⅰ、Ⅳ组显著高于Ⅴ组(P<0.05);Ⅱ组与Ⅲ组总体差异不显著(P>0.05);Ⅳ组总体水平略低于Ⅰ组。由此表明,槐花多糖能提高獭兔对支气管败血波氏杆菌的免疫作用,60g/L剂量的效果最佳,这为开发槐花多糖作为新型免疫佐剂和免疫增强剂奠定了基础。

槐花多糖提取工艺优化及自由基清除活性研究

以秦巴山区野生槐花为试材,以pH 6.0柠檬酸盐酸性缓冲溶液作为浸提溶剂,采用单因素试验结合正交实验方法研究了纤维素酶-超声辅助提取槐花多糖的工艺条件,并考察其对羟基自由基、超氧阴离子自由基和ABTS自由基正离子的清除活性及还原能力。结果表明:槐花多糖的最佳提取工艺为提取温度60℃、提取时间20min、料液比1∶25kg·L^(-1)、纤维素酶10mg·g^(-1),该条件下槐花多糖的提取率为17.1%,槐花多糖对ABTS自由基正离子、羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除IC_(50)值为0.047、0.75、0.87g·L^(-1),优于同浓度条件下天然抗氧化剂维生素C。

鹿藿的化学成分研究

目的研究鹿藿Rhynchosia volubilis的化学成分。方法采用硅胶、ODS、Toyopearl HW-40C、Sephadex LH-20柱色谱以及半制备HPLC等方法进行纯化,根据理化性质及波谱数据对化合物进行结构鉴定。结果从鹿藿石油醚提取物中分离得到13个化合物,分别鉴定为(-)-sigmoidin E(1)、lupinifolin(2)、precatorin B(3)、木豆酮(4)、槐花多糖B(5)、5,3′-二羟基-4′-甲氧基-5′-γ,γ-二甲基烯丙基-2″,2″-二甲基吡喃并[5,6:6,7]异黄烷酮(6)、染料木素(7)、甘草异黄酮A(8)、erylatissin B(9)、neo-bavaisoflavone(10)、羽扇豆醇(11)、桦木醛(12)、穿贝海绵甾醇(13)。化合物1~10均为含异戊烯基的黄酮类,其中化合物1、2为二氢黄酮、3~6为二氢异黄酮、7~10为异黄酮。化合物11~12为羽扇豆烷型三萜,化合物13为甾醇类。结论化合物1、5~6、8~10、12、13均为首次从鹿藿属植物中分离得到,化合物1~3、5~13均为首次从该植物中分离得到。