基于UPLC指纹图谱结合色度值的槐花炮制前后变化规律研究

目的分析槐花炮制前后UPLC指纹图谱与色度值的差异及动态变化规律,为槐花生品、炒槐花、槐花炭的鉴别及炮制工艺研究提供参考。方法建立槐花炮制前后样品的UPLC指纹图谱,采用分光测色仪测定色度值,结合相似度评价、单因素方差分析、聚类分析、主成分分析以及正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)等方法,研究槐花生品、炒槐花、槐花炭的差异性,同时分析槐花炮制过程中指纹图谱与色度值的动态变化规律。结果槐花炮制前后指纹图谱和色度值差异明显。槐花生品、炒槐花、槐花炭分别标定了15、16、14个共有峰,指认了峰2、峰3、峰8、峰9、峰10、峰11、峰14、峰15分别为5-羟甲基糠醛、原儿茶酸、芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、水仙苷、槲皮素、山柰素,其中峰1和峰2(5-羟甲基糠醛)为炮制后新增的特征峰,峰17则在炮制后缺失;槐花炮制前后色度值发生明显变化,其中槐花炭的色度值L^(*)、b^(*)、E^(*)远低于槐花生品和炒槐花,炒槐花的色度值a^(*)稍高于槐花生品和槐花炭,依据色度值可区分槐花生品、炒槐花和槐花炭样品;聚类分析和主成分分析均可将槐花生品、炒槐花和槐花炭进行区分;OPLS-DA结果表明,芦丁和槲皮素是槐花生品、炒槐花、槐花炭主要的差异成分(VIP值>1)。槐花生品在炮制46 min内,峰1~峰16的峰面积/称样量/1000比值均呈现先增大后减小的规律,峰17则呈现一直减小的规律。以饮片色泽为评价指标,炒制温度为160℃时,炒槐花、槐花炭的炒制时间应分别以4~6、14~18 min为宜。结论建立的UPLC指纹图谱和色度值的测定方法可为槐花生品、炒槐花、槐花炭的鉴别以及炮制工艺研究提供参考。