槲皮素硫酸酯钠的合成与精制

目的:为提高槲皮素的水溶性,探讨及改进槲皮素硫酸酯钠的合成和精制方法。方法:以槲皮素和硫酸为原料进行磺化反应制备槲皮素硫酸酯钠,并对产物进行精制和检测。结果:得到了合成及精制产物。结论:合成得到了槲皮素硫酸酯钠,并进行了结构确证。

槲皮素-7,4′-二硫酸酯钠对重组人CK2全酶的抑制作用及动力学分析

目的 观察槲皮素 7,4′ 二硫酸酯钠 (sodiumquercetin 7,4′ disulphate ,SQDS)对重组人CK2全酶的直接作用及酶动力学机制。方法 通过测定转移到CK2底物上的 [γ 3 2 P]ATP的3 2 P放射活度检测不同条件下的重组人CK2全酶的活性。结果 重组人CK2是一种Ca2 +,cAMP和cGMP等第二信使非依赖性蛋白激酶 ,与天然CK2的性质一致。SQDS对重组人CK2全酶有很强的抑制作用 ,IC50 为 4 4μmol·L- 1 ,抑制作用大于已知CK2抑制剂DRB和A3。CK2的动力学研究表明 :SQDS与ATP和酪蛋白分别呈竞争性和非竞争性抑制作用。结论 SQDS是有效的CK2抑制剂 ,对于开发更有效的CK2抑制剂及将SQDS用于临床提供了一定的实验依据。

槲皮素-7-硫酸酯钠体外抗氧化作用

目的探讨槲皮素-7-硫酸酯钠(SQMS)的体外抗氧化活性。方法取小鼠肝组织,匀浆,体外孵育,分光光度法检测不同浓度SQMS(0.10、0.25、0.50 mmol/L)对肝组织中丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响。结果与空白组相比,不同浓度SQMS(0.10、0.25、0.50 mmol/L)均能显著降低肝组织中MDA的含量;中、高浓度SQMS(0.25、0.50 mmol/L)能显著升高肝组织T-AOC;低、中浓度SQMS(0.10、0.25 mmol/L)对肝组织SOD活力有显著升高作用。结论 SQMS具有较强的体外抗脂质过氧化作用及抗氧化能力,其抗氧化可能与提高SOD活力有关。

槲皮素-3-硫酸酯钠的合成、表征及抗肿瘤活性研究

目的:研究槲皮素-3-硫酸酯钠的合成、表征及抗肿瘤活性,并对槲皮素和槲皮素-3-硫酸酯钠的溶解度及其抗肿瘤作用进行对照比较。方法:以芦丁为原料,合成出槲皮素-3-硫酸酯钠,通过元素分析、红外光谱、紫外光谱及核磁共振等,确定其组成结构以及测定其溶解度。同时采用噻唑蓝(MTT)比色法测定槲皮素及磺化产物对HepG2肝癌细胞株的抗肿瘤活性。结果:槲皮素-3-硫酸酯钠在水中溶解度(15℃)是3.391 mg/mL,比槲皮素增大42.6倍。由于水溶性的增强,槲皮素-3-硫酸酯钠高浓度下对HepG2细胞抑制率显著高于槲皮素。结论:槲皮素-3-硫酸酯钠的水溶性提高,抗肿瘤作用明显。

槲皮素-7,4′-二硫酸酯二钠对重组人肌醇磷脂3-激酶p110催化亚基活性的影响

目的观察槲皮素-7,4′-二硫酸酯二钠(SQDS)对重组人肌醇磷脂3-激酶(PI3-K)p110β催化亚基的直接作用。方法通过基因工程技术的方法获得PI3-Kp110β催化亚基,用PtdIns(4,5)P2和[γ-32P]ATP与重组PI3-Kp110β催化亚基一起保温的方法测定PI3-K的活性;32P标记的磷脂用氯仿和甲醇抽提,加闪烁液于液闪计数仪计数。结果SQDS对重组人PI3-Kp110β催化亚基有抑制作用,IC50为14.88μmol/L。结论SQDS是PI3-K的抑制剂。重组人PI3-Kp110β催化亚基可作为一种较为简便地筛选和开发有效的PI3-K抑制剂的分子靶点。

大剂量维生素C对DNA损伤及槲皮素-7-硫酸酯钠的保护作用

目的探讨大剂量维生素C(VC)对小牛胸腺DNA损伤及槲皮素-7-硫酸酯钠的保护作用。方法小牛胸腺DNA用VC(0.1、0.25及0.50 mmol/L)预处理和用不同剂量槲皮素、槲皮素-7-硫酸酯钠(0.1、0.25、0.50 mmol/L)与VC(0.50 mmol/L)以不同方式处理(预处理、同时处理),采用琼脂糖凝胶电泳技术检测分析DNA电泳条带及用分光光度法检测分析DNA浓度变化情况。结果低剂量VC组DNA条带及DNA浓度没有明显变化;中高剂量VC组DNA条带明显拖尾,DNA浓度显著升高;各浓度槲皮素-7-硫酸酯钠不同处理组DNA条带拖尾现象较VC损伤组均减弱,小牛胸腺DNA条带变亮,DNA浓度也有明显下降。结论大剂量VC能直接损伤小牛胸腺DNA,槲皮素-7-硫酸酯钠对大剂量VC诱导的DNA损伤有保护作用,且呈明显浓度依赖关系。

槲皮素-7-硫酸酯钠盐对血栓形成的影响

目的:研究槲皮素-7-硫酸酯钠盐(SQMS)对血栓形成、全血血小板聚集和血小板释放一氧化氮(NO)的影响。方法:用血栓生成仪观察大鼠颈动脉血栓形成情况;小鼠尾静脉注射胶原蛋白-肾上腺素混合诱导剂造成瘫痪模型,观察15min后小鼠瘫痪或死亡数;全血与药物孵育5min,然后用凝血酶或ADP作用1min,用全血血小板聚集仪观察全血血小板聚集情况;血小板悬液与药物孵育5min,然后用凝血酶作用1min,用NIKON TE2000-E荧光倒置显微镜观测血小板聚集情况;用硝酸还原酶法观察血小板释放NO情况。结果:SQMS 10mg/kg和20mg/kg抑制大鼠颈总动脉血栓形成,其抑制率分别为72%和92%;SQMS 20mg/kg和40mg/kg对混合诱导剂造成小鼠瘫痪或死亡有抑制作用,其抑制率分别为70%和80%;SQMS 160、320和640μmol/L抑制凝血酶和ADP诱导的全血血小板聚集,其抑制率分别为24%、76%5、7%和26%5、6%、38%;荧光倒置显微镜观测到血小板聚集的抑制作用随浓度的加大而增强;SQMS 80、160、320和640μmol/L对凝血酶诱导血小板释放NO有加强作用,NO的增加率分别是55%、118%、219%和394%。结论:SQMS对血栓形成有抑制作用,其作用机理与其抑制全血血小板聚集和增加血小板释放NO有关。

槲皮素-7-硫酸酯钠体内外抑制亚硝胺合成的研究

为改善槲皮素的水溶性,将其制成硫酸酯钠盐,在模拟人体胃液(pH3.0,37℃)的条件下,通过测定N-二甲基亚硝胺(NDMA)的阻断率、NO2-的形成量和清除率,研究槲皮素-7-硫酸酯钠体外对亚硝化反应的抑制活性;以血清谷丙转氨酶为测定指标,通过动物试验考察槲皮素-7-硫酸酯钠体内对亚硝胺合成的阻断作用。结果表明:槲皮素-7-硫酸酯钠可明显阻断亚硝胺的化学合成,其最大阻断率为85.71%;对亚硝酸钠具有较好的清除活性,最大清除率为75.25%;其对硝酸盐还原酶还原NO3-为NO2-的抑制率达52.9%。体内阻断亚硝胺合成试验中,槲皮素-7-硫酸酯钠组血清谷丙转氨酶显著低于对照组(P<0.01)。

槲皮素-7-硫酸酯钠对H_2O_2所致DNA氧化损伤的保护作用

目的:探讨槲皮素-7-硫酸酯钠的体外抗氧化活性及对DNA氧化损伤的保护作用。方法:通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基(.DPPH)、羟自由基(OH.)和超氧阴离子自由基(O2-·)清除实验评价槲皮素-7-硫酸酯钠的体外抗氧化活性;采用紫外扫描法、凝胶电泳技术观察槲皮素-7-硫酸酯钠对H2O2所致DNA氧化损伤的保护作用。结果:自由基清除实验结果显示,槲皮素-7-硫酸酯钠能有效清除.DPPH、·OH和O2-·自由基,其清除能力较维生素C(VC)及槲皮素都强,且呈浓度依赖性。DNA氧化损伤保护实验结果显示,H2O2可致小牛胸腺DNA出现断裂梯带和浓度下降,槲皮素-7-硫酸酯钠预处理可抑制H2O2所致的小牛胸腺DNA断裂及浓度下降,且有浓度依赖性。结论:槲皮素-7-硫酸酯钠体外有较强的抗氧化能力,并对H2O2所致的DNA氧化损伤有保护作用。