槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷对阿霉素致体外心肌细胞损伤的保护作用

目的观察槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷对阿霉素(ADR)致心肌细胞损伤的保护作用及机制。方法实验选用出生24 h内的Wistar大鼠6只,雌雄不限,分离心肌细胞。采用纯化培养的心肌细胞建立ADR损伤模型,实验分为6组:空白对照组(正常细胞培养,加入等数量的MEM培养基,不加入任何药物)、二甲基亚砜(DMSO)对照组(加入含DMSO浓度为5μg/ml的MEM培养液)、ADR损伤组(加AOR浓度为1μg/ml的MEM培养液)、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷保护组(分别为低剂量12.5μg/ml、中剂量25μg/ml、高剂量50μg/ml槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷保护组)。分组给药后孵育24 h。显微镜下观察心肌细胞形态,MTT法测定心肌细胞存活率,应用试剂盒分别检测样品中乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果与ADR损伤组比较,低、中、高剂量保护组均可使心肌细胞存活率增高(P<0.01),LOH活性降低(P<0.01或P<0.05),NO活性降低(P<0.01),SOD活性增强(P<0.01)。结论 12.5~50μg/ml槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷均能减轻ADR对心肌细胞损伤,具有明显的心肌细胞保护作用,其机制可能与其抗氧化作用有关。

槲皮素-3-O-葡萄糖苷抑制α-乳白蛋白非酶糖基化机制分析

以牛α-乳白蛋白(bovineα-lactalbumin,α-La)和果糖为非酶糖基化模型,分析槲皮素-3-O-葡萄糖苷(quercetin-3-O-β-D-glucuronide,Q3G)对α-La非酶糖基化过程中果糖胺和5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)形成及游离氨基含量和褐变度的影响,然后结合分子对接和质谱鉴定技术进一步揭示其对非酶糖基化的抑制机理。结果表明:Q3G能显著减轻糖基化过程中的褐变程度,增加游离氨基含量,抑制果糖胺和5-HMF的形成,延缓糖基化反应的进程,且Q3G添加量为2 mmol/L时效果最好。分子对接结果表明Q3G可通过氢键、范德华力和疏水相互作用与α-La的活性氨基酸残基进行结合,影响α-La和果糖的糖基化反应,缓解糖基化反应的进程。同时,超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道离子阱串联质谱分析也发现Q3G屏蔽了糖基化的潜在活性位点Lys93和Lys108,且新增糖基化位点Lys98的糖基化活性较弱,可达到抑制非酶糖基化的作用。本研究可为Q3G作为潜在抗糖基化剂的开发提供理论基础。

RP-HPLC法测定香椿叶中槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷

目的 建立测定中药香椿叶中槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷的反相高效液相色谱法.方法 采用Waters XBridge Shield RP18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1％甲酸水溶液（20∶80）,体积流量为1.0mL/min,检测波长为254 nm,柱温为40℃.结果 在以上色谱条件下,供试品溶液中的槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷与干扰成分完全分离,其在5.260～105.2 mg/mL范围内线性关系良好（r2 =0.999 1）,重复性实验RSD=1.96％（n=6）,平均加样回收率为99.3％～104.1％ （n=3）,RSD为4.23％ ～4.78％.结论 6个产地香椿叶中槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷的量分别为0.826％±0.025％（山西运城）、0.271％ ±0.006％（河南西平）、0.459％ ±0.016％（河南焦作）、0.222％±0.006％（四川简阳）、0.808％ ±0.019％（山东西牟）和0.293％±0.008％（江苏镇江）.

HPLC法测定田基黄中槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷的含量

目的建立田基黄中槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷的含量测定方法，为田基黄药材的质量控制和综合开发利用提供一定的科学依据。方法采用HPLC法。色谱柱为Hypersil C18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为体积分数0．04％的乙腈-磷酸水（体积比77：23），流速为1．0mL·min^-1，检测波长为371nm，柱温为35℃。结果槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷质量浓度在3．12～99．84mg·L^-1（r=0．9998，n=6）内与峰面积呈良好的线性关系；平均回收率为99．1％（RSD=1．5％，n=9）。结论该方法简便、快速、精密度好，可用于田基黄的质量控制。

HPLC同时测定鸭跖草提取物中咖啡酸、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷和异荭草素的含量

采用高效液相色谱法同时测定鸭跖草提取物中咖啡酸、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷和异荭草素的含量。色谱条件为:色谱柱为Phenomenex C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,以甲醇(A)-体积分数0.1%甲酸水(B)梯度洗脱:0~17 min,22%A^42%A;17~28 min,42%A^56%A;28~40 min,56%A^90%A,检测波长为350 nm,流速为1 m L/min,柱温为35℃。咖啡酸、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷和异荭草素分别在2.16~86.4 mg/L、6.445~257.8 mg/L和3.293~131.7 mg/L范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.36%,99.42%和98.00%。该方法准确、可靠、重复性好,可用于鸭跖草提取物的质量评价与控制。

银合欢叶成分槲皮素-3-O-鼠李糖甙的FT-IR和FT-Raman光谱

本文对银合欢叶中的成分槲皮素 - 3- O-鼠李糖甙进行了红外和拉曼光谱的测定 。

槲皮素-3-O-芹菜糖基芦丁糖苷对新生大鼠海马神经前体细胞增殖的影响

目的探讨一种新型抗抑郁剂槲皮素-3-O-芹菜糖基芦丁糖苷（代号：CTN-986）对神经前体细胞增殖的影响。方法分离培养新生大鼠海马神经前体细胞，运用免疫细胞化学的方法对所培养的细胞特性进行鉴定。用MTT法和^3H-胸腺嘧啶核苷参入法分别观察CTN0986对新生大鼠海马神经前体细胞增殖的影响，并初步探讨其作用机制。结果所培养的细胞具有神经前体细胞的特性，药物研究发现，氟西汀和CTN-986（2～250μmol·L^-1）作用4d，可以促进神经前体细胞的增殖；同时给予5-HT1A、受体特异性拮抗剂WAY-100635（0．1μmol·L-1）可以对抗CTN-986诱导的促神经前体细胞的增殖。结论CTN-986可以促进海马神经前体细胞的增殖，并且该作用的发挥与激活5-HT1A受体关系密切。

槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷对游离脂肪酸诱导HepG2细胞脂肪变性的作用

探讨槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(quercetin-3-O-β-D-glucuronide,Q3GA)对游离脂肪酸诱导的人源肝癌细胞HepG2细胞脂质蓄积的甘油三酯调节和氧化应激的作用及其可能的相关机制。采用油红染色检测Q3GA对游离脂肪酸诱导的HepG2细胞中脂滴含量的影响,并同时检测其对甘油三酯和胆固醇的作用。DCFH-DA法检测Q3GA对HepG2细胞脂质蓄积引起的活性氧(ROS)的变化;硫代巴比妥酸法和黄嘌呤氧化酶法分别测定丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。RT-PCR分析脂肪酸氧化相关的基因过氧化物酶体增殖物受体(PPARα)、肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT1A)、中链酰基辅酶A脱氢酶(MCAD)、细胞色素P450 4A11(CYP4A11)、乙酰辅酶A氧化酶(ACO)的表达情况。实验结果显示,Q3GA可剂量依赖性降低FFA诱导的Hep G2细胞脂质蓄积和甘油三酯的含量,但未降低胆固醇的含量。同时可改善脂肪酸氧化引起ROS,MDA的升高以及SOD的降低。另外,Q3GA在一定浓度下可上调脂肪酸β氧化相关基因PPARα、CPT1A、MCAD的表达,而对CYP4A11和ACO的表达没有促进作用。综上所述,Q3GA可抵抗脂肪酸氧化引发肝细胞的氧化应激损伤,保护HepG2细胞,降低游离脂肪酸诱导HepG2细胞脂质蓄积和甘油三酯的含量,其调节机制可能与其对HepG2细胞中游离脂肪酸氧化有关。

春柴胡中槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷的单体制备与含量测定研究

目的分离制备春柴胡中特征化学成分并建立含量测定方法。方法采用聚酰胺柱色谱,制备薄层色谱,SephadexLH-20柱色谱分离纯化,利用波谱技术(LC-MS,UV,1H-NMR)进行结构鉴定;采用高效液相色谱法分析,色谱柱KromasilC18(4.6mm×250mm,5μm),流动相甲醇-0.5%醋酸(43∶57,V/V),检测波长365nm。结果从春柴胡正丁醇萃取部位分离得到一化合物,鉴定为槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷;槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷的线性范围为4.375～140μg.ml-1,r=0.9998;平均回收率为98.43%,RSD为2.26%(n=6)。结论槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷化合物系首次从该柴胡属植物中分离得到,建立的春柴胡中槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷高效液相色谱含量测定方法,简便、准确可靠,可用于春柴胡药材的质量控制。

槲皮素-3-o-新橙皮糖苷改善L6细胞胰岛素抵抗及其作用机制

目的观察槲皮素-3-o-新橙皮糖苷对L6肌管细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗;脂肪酸消耗以及对PPARα、PPARγ、GLUT4表达量的调节作用及其作用机制。方法以250μmol/L的脂肪酸诱导形成L6肌管细胞胰岛素抵抗模型,以槲皮素-3-o-新橙皮糖苷干预24 h后,葡萄糖氧化酶法检测葡萄糖消耗量,气相色谱法(GC)检测脂肪酸消耗量,Western-blot方法检测细胞中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)以及PPARα、PPARγ的表达量。结果槲皮素-3-o-新橙皮糖苷处理可提高L6细胞对葡萄糖的消耗(P<0.01),降低细胞脂肪酸摄入(P<0.05),上调GLUT4和PPARγ蛋白表达量(分别为P<0.01和P<0.05),但对PPARα的表达量无明显影响。结论槲皮素-3-o-新橙皮糖苷可提高L6细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗量,降低脂肪酸摄入,调节PPARγ、GLUT4的表达,这些可能是受试物缓解胰岛素抵抗的机制之一。

应用微乳液相色谱法测定大鼠脑脊液中槲皮素-3-O-槐糖苷含量研究

目的:建立测定大鼠脑脊液中槲皮素-3-O-槐糖苷含量微乳液相色谱方法,并将其用于大鼠体内药代动力学的研究。方法:采用微乳液相色谱法分别测定给药后不同时间点大鼠脑脊液中的药物浓度,并研究其药代动力学参数。结果:最佳微乳流动相组成为:2.0%Genapol X-080-2.5%正丁醇-1.5%乙酸乙酯-0.3%三乙胺-93.7%水溶液(p H 5.0)。大鼠脑脊液中槲皮素-3-O-槐糖苷在浓度0.1~10.0μg·m L^(-1)内线性关系良好(r=0.998 4),最低定量浓度(S/N=10)为0.1μg·m L^(-1),日内和日间RSD均小于4.9%,平均加样回收率为96.3%,RSD为5.1%。槲皮素-3-O-槐糖苷脑内药代动力学模型符合二室模型。分布和消除相半衰期分别为7.3 min和28.7 min。药-时曲线下面积(AUC)为804.37μg·min^(-1)·m L^(-1)。表观分布容积(V_d)为0.325μg·m L^(-1)。平均驻留时间(MRT)为25.8 min。结论:本微乳液相色谱法已成功的用于测定大鼠脑脊液中槲皮素-3-O-槐糖苷含量的测定及药代动力学研究。

HPLC法测定杠板归中槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸及槲皮素的含量

建立了高效液相色谱法同时测定杠板归中槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸和槲皮素含量的方法。采用Lichrosher 5-C18色谱柱,以甲醇-0.05%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1 mL/min,紫外检测波长为258 nm,柱温为25℃,2种化合物在30 min内均得到较好分离。槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸和槲皮素的线性范围分别为0.037 6～3.920 0 mg和0.004 2～0.440 0 mg,检出限和定量下限分别为2.509、0.282 ng和6.272、0.702 ng,方法的平均回收率分别为99%和98%。运用该方法对不同产地杠板归药材中的2种黄酮类化合物进行测定,并得出二者含量的比例。方法快速简便,灵敏准确,重现性好,可作为杠板归药材的质量控制方法。

槲皮素-3-O-槐糖苷在正常和脑缺血再灌注大鼠体内的药代动力学研究

目的:研究槲皮素-3-O-槐糖苷在正常和脑缺血再灌注大鼠体内的药代动力学规律。方法:正常及脑缺血再灌注大鼠静脉注射槲皮素-3-O-槐糖苷20mg/kg后,用高效液相色谱法分别测定给药后不同时间点2组大鼠的血药浓度,并对其药代动力学参数进行研究。结果:2组的药代动力学模型符合二室模型,其分布相、消除相半衰期分别为12.7、242.3 min和27.3、634.5min;血药浓度-时间曲线下面积(AUC)分别为3.49μg/(h·ml)和6.25μg/(h·ml);表观分布容积(Vd)分别为149.7L/kg和433.5L/kg;平均驻留时间(MRT)分别为33.8min和41.3min。结论:槲皮素-3-O-槐糖苷在脑缺血再灌注状态下,血药浓度-时间曲线下面积显著增加,表观分布容积减小,分布相和消除相半衰期都显著延长。提示脑缺血损伤可改变槲皮素-3-O-槐糖苷体内药代动力学行为。

HPLC同时测定鹿衔草提取物中香草酸、金丝桃苷、槲皮素-3-O-呋喃阿拉伯糖苷、槲皮素和梅笠草素的含量

目的:建立HPLC同时测定鹿衔草提取物中香草酸、金丝桃苷、槲皮素-3-O-呋喃阿拉伯糖苷、槲皮素和梅笠草素的含量。方法:色谱柱:Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,流动相:乙腈-0.1%醋酸水,梯度洗脱;柱温:35℃,流速:1.0 ml·min^-1,检测波长:255 nm。结果:香草酸、金丝桃苷、槲皮素-3-O-呋喃阿拉伯糖苷、槲皮素和梅笠草素分别在3.71~148.40μg·ml^-1(r=0.999 9)、5.92~236.70μg·ml^-1(r=0.999 8)、3.36~134.25μg·ml^-1(r=0.999 8)、3.94~157.80μg·ml^-1(r=0.999 9)和3.10~124.15μg·ml^-1(r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.01%、98.80%、98.48%、98.71%和98.62%,RSD分别为0.95%、1.15%、1.36%、0.94%和1.02%(n=6)。结论:该方法快捷简便、准确性及重复性均良好,可用于鹿衔草提取物及相关制剂质量的评价和控制。

四种天然槲皮素-3-糖苷的合成

以芦丁为原料,经苄基化、酸水解得到关键中间体3',4',7-O-三苄基槲皮素(3),3与相应的1-溴代乙酰糖在四丁基溴化铵催化下在氯仿-0.25mol?L-1K2CO3溶液中缩合成相应的糖苷,脱去保护基得天然槲皮素3-糖苷类化合物1a～1d.其结构经IR,1HNMR,MS及元素分析确证.

HPLC法测定维药恰麻古中槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量

目的：建立 HPLC 法测定维药恰麻古中槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量。方法采用 HPLC 法测定新疆阿克苏、吐鲁番、伊犁地区维药恰麻古槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量，色谱条件：KromasilC18柱（200 mm＆#215;4．6 mm，5μm）；流动相：乙腈-0．5％冰醋酸水溶液（25∶75，v/v）；检测波长：257 nm；流速：1．0 mL/min；柱温：30℃。结果恰麻古中槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷在0．0105～0．2100 mg/mL 浓度范围内呈良好的线性关系（r ＝0．9997），平均加样回收率为99．1％，RSD 为2．4％（n ＝9），新疆阿克苏、吐鲁番、伊犁产地恰麻古中槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量分别为0．702、0．334、0．524 mg/g。结论 HPLC 法简单可行，重复性好，可作为恰麻古质量评价的方法之一。

无尾果中槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷含量测定研究

目的:研究无尾果中槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷含量测定方法。方法:使用高效液相色谱法,色谱柱C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-水(15∶85);流速1.0 mL/min;检测波长360 nm;柱温35℃;进样量10μL。结果:采用高效液相色谱方法测定无尾果中槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷的含量,线性范围、重复性、稳定性和加样回收率等方法学验证项目均在合格范围内。结论:建立了高效液相色谱法测定槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷含量,方法简便、准确可靠、稳定性及重复性良好,可用于无尾果的质量控制。

HPLC法测定金钱草中紫云英苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚和异鼠李素

目的建立HPLC-UV法测定金钱草中紫云英苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚和异鼠李素。方法采用Eclipse XDB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),流动相为甲醇–0.4%磷酸水,梯度洗脱,检测波长360 nm,体积流量0.5 mL/min,柱温30℃,进样量10μL。结果紫云英苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚、异鼠李素分别在22.10~176.80、21.14~169.12、17.40~174.00、51.12~408.96、23.30~186.40μg/mL呈现良好线性关系(R^(2)>0.9991);平均加样回收率分别为99.50%、100.39%、99.93%、105.58%、98.96%,RSD值分别为1.07%、1.44%、0.57%、0.24%、0.65%(n=6)。结论方法的重复性好,操作简单,结果准确,可以用来控制金钱草药材及其制剂的质量。

高效液相色谱-质谱法测定血浆中槲皮素及其主要代谢产物

目的建立人口服槲皮素后血浆中槲皮素及其部分代谢产物定量测定的方法。方法血浆样品经甲酸酸化,乙腈沉蛋白,乙腈及甲醇提取后,提取液浓缩至干,流动相溶解后进样。WATERS BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm 1.7μm);流动相A为1%甲酸水溶液,B为1%甲酸乙腈溶液,柱温40℃,体积流量0.4 mL/min;电喷雾离子源,四级杆质谱检测器,选择离子监控模式,检测离子质荷比为301.1(槲皮素),477.1(槲皮素-3-O-葡萄糖苷酸),463.2(槲皮素-3-O-葡萄糖苷),491.2(异鼠李素-3-O-葡萄糖苷酸),269.1(芹菜素)。结果槲皮素,槲皮素-3-O-葡萄糖苷酸,槲皮素-3-O-葡萄糖苷,异鼠李素-3-O-葡萄糖苷酸的线性范围为5～1 280μg/L;槲皮素-3-O-葡萄糖苷酸,槲皮素-3-O-葡萄糖苷和异鼠李素-3-O-葡萄糖苷酸的日间、日内相对标准差均小于6%;相对回收率97.54%～104.03%,提取回收率73.28%～81.32%。结论本方法快速、简便、准确,可有效地测定出人血浆中槲皮素及其主要代谢产物,为进行含槲皮素中药及其复方的药动学研究以及血样浓度检测提供参考。

异鼠李素和异鼠李素-3-O-葡萄糖苷的抗氧化活性分析

槲皮素类化合物是众多黄酮类中活性最高的化合物之一,在医药方面有很强的药效功效。本研究选取两种槲皮素类黄酮化合物异鼠李素和异鼠李素-3-O-葡萄糖苷作为目标化合物,运用Gaussian 09软件密度泛函(DFT)方法从分子总能量、OH解离焓(BDE)的理论表征、前线分子轨道及其轨道能级、原子的净电荷布居等方面研究异鼠李素和异鼠李素-3-O-葡萄糖苷的抗氧化活性。结果表明,异鼠李素活性大于异鼠李素-3-O-葡萄糖苷,两类分子4'位的酚羟基失去氢之后对抗氧化活性的整体影响是最大的,酚羟基在这个位置上就具有较明显的高活性特征,分子中引入的糖苷不参与前线分子轨道的形成,不具有消除自由基活性的作用,但它对于分子本身的极性有很大的影响,可以改变分子在机体反应时的溶解度和吸收度。这对进一步深入研究槲皮素类黄酮化合物的抗氧化活性以及抗氧化剂的结构改良等提供了重要的科学依据。