槲皮素对过氧化氢损伤小鼠成纤维细胞的保护作用

目的 探讨槲皮素对过氧化氢（H2O2）损伤小鼠成纤维细胞（NIH-3T3）的保护作用。方法 体外培养NIH-313细胞，取对数生长期的NIH-3T3细胞分成四个实验组。对照组（C）仅加含有10％胎牛血清的DMEM培养基。实验1（Q1）组先用O．5mmoL／LH2O2作用细胞30min，然后再用含有50μmol／L的槲皮素培养基作用24h。实验2（Q2）组先用含有50μmol／L的槲皮素培养基作用24h，再换含有0．5mmol／LH2O2作用细胞30min。H2O2实验（H2）组先用含有0.5mmol/LH2O2作用细胞30min，再换仅含有10％胎牛血清的DMEM培养基作用24h。取培养细胞提取DNA和制备1×10^7／ml细胞悬液的滴片，应用TUNEL和Ladder电泳检测细胞凋亡率：应用Weaster blod和细胞免疫组化技术检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、HSP-70、NF—kB蛋白质的表达。结果 由TUNEL和Ladder实验得出，Q1组的细胞凋亡率明显低于H2组和Q2组。由Weaster blod和细胞免疫组化技术检测分析得出，Q1组与Q2、H2组相比，Bcl-2的表达明显增高，Bax、Caspase-3、NF—kB、HSP-70的表达减低。结论 槲皮素可能主要是通过抑制NF—kB的表达，提高HSP-70的表达，对H2O2诱导的NIH-3T3细胞损伤产生保护作用。