樟疫霉(Phytophthora cinnamomi)的研究进展

我国樟科植物众多,国外有关樟疫霉对樟科植物造成严重危害的报道较多,而国内对其研究较少。笔者从樟疫霉的分类地位、危害分布情况以及鉴定方法、遗传关系、生活史等方面进行综述,在此基础上认为应从以下方面深入研究:(1)对极易受到樟疫霉危害地区的樟属重要种植地的樟疫霉病害发生情况进行调查,明确樟疫霉的危害状况;(2)对来自不同地区的樟疫霉进行亚磷酸盐敏感程度研究;(3)对亚磷酸盐不同敏感程度菌株之间的遗传特性进行研究,明确亚磷酸盐的作用机制。

樟疫霉引起山茶花根腐病

近年来,上海地区山茶花(Camellia Japonica L.)普遍发生根腐,春季发病,秋季最重,生长衰退,甚至萎蔫死亡。从上海市11个县(区)的210份病根和病土中分离到71个疫霉菌株。经鉴定,其中62株为樟疫霉(Phytophthora cinnamomi Rands),而且有61株属于A^1交配型,1株属于A^2交配型。它们的形态、生物学性状无明显差别,都具有典型的珊瑚状菌丝和球形、葡萄串状膨大体。最高生长温度均为34℃,致病性接种实验证明,樟疫霉是引起山茶花根腐病的病原菌。室内药效测定,以杀毒矾M_8(Sandofan M_8)或瑞毒霉(Metalaxyl)(稀释800～1000倍)的抑菌效果最好。

樟疫霉在自然发病土壤中的季节变化

应用诱饵分离技术对上海地区两个自然发病土壤中樟疫霉（Phytophthoracinnamomi）的密度进行了为期25个月的测定．结果表明．樟疫霉在两个不同寄主土壤中呈季节性规律变化，夏、秋季最高，其带菌土样率和回收菌株数分别高达44％和83株；冬季最低，在土壤中检测不到．春季开始回升．该菌密度与某些生态因子的回归分析结果表明．它主要与土壤温度呈显著相关（P＜0.05）．最适土温25℃左右．小于10℃时检测不到。该菌密度在土壤中的季节变化与寄生植物病害的发生存在着内在联系．该菌密度越高，寄主病害越重。此外．本文还就以诱饵法作为检测分析土壤中土传病原菌生态变化的一种有效途径作了探讨。

土壤中樟疫霉的山茶花诱饵分离法

本文首次报道了应用山茶花嫩叶圆片作为诱饵分离土壤中樟疫霉的技术。山茶花嫩叶圆片(直径9mm)3～5片漂浮于20g 土:80ml 蒸馏水的水面上,在光暗交替和自然变温条件下,诱集3d～4d,再于选择性培养基上培养3d～4d,可得到最佳的分离效果。它比雪松、杜鹃、柑桔和梨等材料作为诱饵的分离诱集率高,速生杂菌污染率低,取材也较方便。此种方法为土传病害疫病菌,尤其是樟疫霉的分离、生态等研究提供了有效的途径。

樟疫霉生物学特性及防治技术研究进展

樟疫霉是世界上广泛分布的危害花卉、林木的土传病原菌之一。综述了樟疫霉的分布与危害、分离与鉴定、流行规律与生物习性、预防与防治等方面的研究进展,为樟疫霉的进一步研究与防治提供参考。

一种诱导樟疫霉形成大量孢子囊的方法

樟疫霉（ＰｈｙｔｏＰｈｔｈｏｒａｃｉｎｎａｍｏｍｉ）是疫霉属中很难在培养条件下形成孢子囊的菌种之一。本文在比较了以前两个诱导方法的基础上报道一种能诱导产生大量孢子囊的方法。其方法是：该菌在低浓度的胡萝卜汁液培养基（Ｃａｒｒｏｔｊｕｉｃｅｂｒｏｔｈ）中培养１８ｈ，经连续三次无机盐溶液冲洗后（每次间隔１ｈ），光照条件下于去离子水（无菌）中培养。在３～４ｄ内能产生大量孢子囊。本结果进一步证实了樟疫霉孢子囊的形成需要有一个营养条件急剧下降的过程。

樟疫霉拮抗链霉菌S-03菌株发酵条件优化及其稳定性探究

樟疫霉(Phytophthora cinnamomi)可以侵染植物,导致根腐病。前期研究发现,阿劳琼链霉菌(Streptomyces araujoniae) S-03对根腐病病原菌樟疫霉有较好的抑制作用,但该菌的发酵条件、发酵液的稳定性和化学性质还不清楚。本研究采用单因素和正交试验设计对S-03菌株的发酵条件进行优化,并对发酵产物的稳定性及化学性质进行研究。结果显示:优化后的培养基抑制率提高了89.72%;配方为可溶性淀粉45g/L、黄豆饼粉20g/L、(NH;);SO;1 g/L、KCl 1 g/L;发酵条件为起始pH 8、接种量2%、装液量75 mL/250 mL、发酵时间7 d、发酵温度28℃、转速160 r/min。抑菌活性物质能耐受酸性条件但对碱性环境敏感,不能耐受60℃以上高温,对紫外光照有很好的稳定性。经正丁醇萃取可获得较大量的抑菌活性物质,表明活性产物的化学极性较低。菌株S-03发酵液能有效抑制疫霉菌丝生长,使其皱缩干瘪,对离体植物叶片也有较强的防治效果,防效达到80.00%。研究结果表明,菌株S-03发酵液能有效抑制樟疫霉生长,活性物质有较好的稳定性及离体叶片防治效果,具有良好的应用前景。

十二种油梨砧木抗樟疫霉菌的大田比较

用油梨栽培品种哈斯(Hass)作为接穗与12种油梨砧木冠接,评价它们在大田对樟疫霉菌的抗性。嫁接79周后,利用接种与不接种砧木茎干截面积的差异百分比、茎干截面积的总增长量和商业接穗的目测病害等级等参数对砧木进行评价。结果证明,用托马斯(Thomas),马丁格兰德(Martin Grand G755a,b和c),巴尔杜克(Barr Duke)和D9作砧木对樟疫霉菌的抗性最好,而用托帕托帕(Topa,Topa)波查德(Borchard)和G6作砧木抗性最差,用杜克7(Duke7),G1033和托萝坎尼恩(Toro Canyon)作砧木抗性中等。在不接种的砧木中,用托马斯和G6作砧木的植株茎干截面积生长最快,而D9为砧木的最慢。

全基因组预测樟疫霉的候选效应分子

为了更好地研究樟疫霉的致病机制及防治方法,笔者基于病原菌效应分子具有的典型特征,利用Signal P、Prot Comp、TMHMM、big-PI Fungal Predictor和Target P等生物信息学预测程序对樟疫霉中328 457条蛋白质序列进行候选效应分子找寻,发现该菌含有3 439个小分子分泌蛋白,同时,对上述蛋白进行冗余性、半胱氨酸数量以及信号肽长度等性质进行分析。结果表明：上述分泌蛋白中存在较多的冗余性蛋白,所占比例为50%以上,并以含有1-10个半胱氨酸、17-26个氨基酸信号肽的分泌蛋白居多。另外,利用卵菌中效应分子所具有的保守基序RXLR,对拥有唯一氨基酸序列的1 549个分泌蛋白进行基序找寻,明确樟疫霉中存在160个候选效应分子。通过上述生物信息学分析方法可实现樟疫霉候选效应分子的预测。

土壤浸出液刺激疫霉菌产生孢子囊的初步研究

采集肥沃菜园表土(深3～10cm)400g 加自来水500ml,充分搅匀,沉淀数小时,上清液用普通滤纸过滤,去除土壤粗颗粒,用孔径0.22μm 微孔滤膜重复过滤2次,滤过液即为土壤浸出液。

雪松上疫霉种的研究

经形态、生理、生化和致病性的研究,引起江苏雪松疫病的15个菌株鉴定为3种疫霉,即樟疫霉(Phytophthora cinnamomi Rands)、掘氏疫霉(P.drechsleri Tucker)和寄生疫霉(P.nicotianae var.parasitica(Dast.)Waterh.)。其中,樟疫霉有13个菌株,是雪松疫病的主要致病种。与异宗配合疫霉种两个交配型配对培养的结果表明,樟疫霉 A_2交配型占绝对优势。但值得指出的是在我国雪松上发现樟疫霉 A_1交配型(P_(191)的存在。另外,寄生疫霉(P_(194))为 A_2交配型,而掘氏疫霉(P192)无论单独培养或者配对培养均不形成有性器官。

雪松疫霉腐烂病的诊断与治理

雪松疫霉腐烂病症状是针叶枯黄，极易脱落，同时伴有大量绿针脱落，根末端呈鸡爪状，根部树皮易剥离。树干形成层变褐色。经专家多年研究，发现发病树木多是樟疫霉Phytophthora cinnamomi形成根部病害。这种病害，据国外报道可危害100多种针阔叶树种。

广东省猕猴桃根腐病病因研究

从广东省和平县猕猴桃根腐病病根分离到２个菌株，根据培养性状及形态特征，分别鉴定为ＰｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｃｉｎｎａｍｏｍｉＲａｎｄｓ（交配型为Ａ１）和Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｏｌａｎｉ（Ｍａｒｔ．）Ｓａｃｃ．室内人工接种表明：Ｐ．ｃｉｎｎａｍｏｍｉ有较强的致病力，Ｆ．ｓｏｌａｎｉ是第２次侵入者，单独不能为害，但在Ｐ．ｃｉｎｎａｍｏｍｉ为害的基础上。

福建、浙江、江苏、上海疫霉种的研究

1985—1986年,从福建漳州,浙江杭州,上海,江苏南京,苏州,扬州,常州等地采集100多种植物进行分离,在雪松(Cedrus deodara),倒挂仙人鞭(Cereus flagelliformis),冬青卫茅(Euonymus japonieus),构树(Broussonetia papyrifera),蓖麻(Ricinus communis),柑桔(Citrus reticulata),带叶兜兰(Paphiopedilum hirsutissimum),芋(Colocasia esculenta),鳄梨(Persea americana),山茶(Camellia sp.),珊瑚樱(Solanum pseudo-capsicum),百合(Lilium brownii var.viridulum),蔓常春花(Vinca major),西瓜(Citrullus lanatus)等14种寄主植物上分离到51个疫霉菌株,鉴定为9个种:烟草疫霉(=寄生疫霉)Phytophthora nicotianae B.de Haan(=P.parasitica Dast.),掘氏疫霉P.drechsleri Tucker,樟疫霉 P.ciunamomi Rands,棕榈疫霉P.palmivora(Butl.)Butl.,柑桔褐腐疫霉P.citrophthora(R.et E.Smith) Leon.,苎麻疫霉P.bochmeriae Saw.,蜜色疫霉P.meadii McRae,簇囊疫霉P.botryosa Chee,隐地疫霉P.cryptogea Pethyb.et Laff.。其中,烟草疫霉,掘氏疫霉,樟疫霉出现频率较高,分布较广,初步认为是上述地区植物疫病的主要病原菌。簇囊疫霉、蜜色疫霉是国内新记录。

雪松枝枯的病因及防治

雪松枝枯现象目前在河北地区发生严重。为有效地防治雪松枯枝病 ,进行了观察防治试验。研究表明 ,该症状为雪松疫病。病原菌经分离培养 ,发现是樟疫霉菌 (Photophoracin namoinRanas )危害所致。病菌通过风雨传播、伤口侵入 ,引起枝枯或整株枯死。实验表明采用单一的化学防治效果不太明显 。

油梨根腐病病原菌的鉴定、生物学特性及室内药剂筛选

根腐病是油梨的毁灭性病害之一,该病害为害根部,引起根部变黑腐烂,严重时导致植株死亡。从发病典型的植株根部分离、纯化菌株,并开展致病性测定、形态学特征和多基因位点(ITS、LSU和COXⅡ)系统发育树分析相结合的病原菌鉴定。结果表明,引起海南油梨根腐病的病原菌为樟疫霉(Phytophthora cinnamomi)。还研究了不同培养条件和10种药剂对病原菌菌丝生长的影响。结果表明,病原菌在PDA培养基上生长较好,最适生长温度为28℃,最适pH为8,黑暗条件更适合病原菌的生长;烯酰吗啉对病原菌的抑制作用最强,EC50为0.0929μg/mL。本研究结果为油梨根腐病的田间防控提供了一定的理论依据。

澳洲坚果病害

疫霉溃疡病和疫病 1960年在加利福尼亚发现茎干溃疡病,目前在夏威夷和昆士兰也有发现,但在所有地区都不常见。1971年夏威夷报道了花序及未熟果的疫病。通常靠近地面或稍高的受害树干和枝条组织的树皮变硬,随后凹陷。早期的溃疡病病斑界限明显,最后扩展成为纵深的、沟状的病痕,且感病区可继续扩大,有时延伸到下部的枝条。溃疡病斑可环绕树干或侧枝,

油梨嫁接树的枝和根生长的周期性

油梨嫁接树的枝和根生长的周期性将西印度栽培种Ｓｉｍｍｏｎｄｓ和杂交种Ｌｄａ（ＧｕａｔｅｍｄａｎＸ西印度栽培种）接种到西印一度栽培种Ｗａｌｄｉｎ上，观测油梨嫁接树枝和根的生长周期性，以线性伸长率（毫米／天）计算生长量。虽然树体内个体枝条和根的生长率差异...

三种猕猴桃根腐病致病菌多重实时定量PCR检测技术的建立及应用

[背景]近年来,随着猕猴桃种植面积的不断扩大,病害的频繁发生已逐渐影响猕猴桃的产量和品质。恶疫霉(Phytophthora cactorum)、樟疫霉(P.cinnamomi)和雪松疫霉(P.lateralis)是一类可以引起猕猴桃根腐病的致病疫霉菌。[目的]建立并优化可以同时检测3种致病疫霉的多重实时定量检测技术,并调查猕猴桃主要产区的致病菌分布情况。[方法]基于Ypt1 (ras-related protein gene)基因设计恶疫霉、樟疫霉和雪松疫霉的特异性TaqMan探针和引物,建立并优化多重实时荧光定量PCR检测体系。利用近缘种检验检测体系特异性并进行灵敏度测试,应用该检测体系分析猕猴桃主要产区根际土壤中3种致病疫霉的Yt1基因含量。[结果]供测试的11个恶疫霉近缘种、11个樟疫霉近缘种、13个雪松疫霉近缘种及非目标菌种DNA样品中均无荧光信号,反应结果为阴性,而在恶疫霉、樟疫霉和雪松疫霉DNA样品中分别检测出HEX、FAM和ROX荧光信号,反应结果为阳性。三种疫霉的检测灵敏度均达到100fg。此外,通过对猕猴桃主产区陕西省周至县和眉县果园共166份土壤样品的检测发现,恶疫霉的分布最广泛且Ypt1基因含量最高,樟疫霉和雪松疫霉则相对较少。[结论]建立的猕猴桃根腐病致病疫霉多重实时定量检测体系特异性强、灵敏度高,适合于恶疫霉、樟疫霉和雪松疫霉的检测及定量分析。该技术可为猕猴桃疫霉病害的早期诊断、监测及预防提供指导。

雪松两种病害的症状辨别与防治

雪松主干挺拔,气势雄伟,是一种树形优美的绿化树木,在园林绿化中应用广泛。但雪松栽培中易受几种病害的危害,影响观赏效果。如果不及时防治,甚至可带来雪松枯死。现将常见的两种病害辨别与防治方法介绍如下。1.疫霉腐烂病(1)病原及病害鉴别该病是由樟疫霉病菌引起的根部病害。这种病害可危害100多种针叶、阔叶树种。可利用刺槐对樟疫霉病敏感的特点进行鉴别:将刺槐的嫩茎小段和嫩叶投入病株根或土壤浸出液中,在20℃~25℃暗光下培养24小时后.