升黄益智方对痴呆模型小鼠脑组织SOD活性的影响

目的探讨升黄益智方对痴呆模型小鼠脑组织氧化物歧化酶(SOD)活性影响及作用。方法通过分光光度计检测正常组及痴呆模型小鼠脑组织SOD活性。结果痴呆模型组小鼠脑组织SOD含量较正常对照组明显下降(P<0.001),中药治疗组较模型组显著升高(P<0.05),中药治疗组较西药治疗组明显提高(P<0.05)。痴呆模型组及西药治疗组所测SOD含量低于中药治疗组。结论升黄益智方可提高模型痴呆小鼠脑组织的SOD活性,该复方能够通过抗氧自由基、抗脂质过氧化等多种途径而保护脑组织免受损伤。

升黄益智方对痴呆模型小鼠脑组织胆碱乙酰化转移酶活性的影响

目的探讨升黄益智方对模型痴呆小鼠脑组织胆碱乙酰化转移酶(CAT)活性的影响及作用。方法应用放射免疫法检测升黄益智方等不同干预药物对痴呆模型小鼠脑组织内CAT活性的影响,检测正常组及各实验组小鼠脑组织中乙酰胆碱(Ach)含量。结果痴呆模型组小鼠脑组织Ach含量较正常对照组下降非常明显(P<0.05)。结论升黄益智方提高模型痴呆小鼠脑组织Ach生成量,提示该复方能够增强大脑组织内CAT的活性,对尚存的胆碱能细胞的功能有保护和代偿性增强作用。

三七总皂苷对老年性痴呆动物模型快速老化小鼠大脑Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)表达的影响

目的:探讨三七总皂苷(PNS)对快速老化小鼠SAMP8大脑Aβ1-40、Aβ1-42表达的影响。方法:采用免疫组织化学方法,随机选取快速老化小鼠大脑顶叶皮层、海马周围白质连续五个视野在高倍显微镜下观察,并计数五个视野下Aβ1-40、Aβ1-42免疫阳性细胞的平均个数。结果:PNS能明显减少快速老化小鼠大脑Aβ1-40、Aβ1-42免疫阳性神经元的数量。结论:PNS对SAMP8小鼠大脑Aβ1-40及Aβ1-42的表达有明显的抑制作用。

三种针法对快速老化痴呆模型小鼠老化度评分及行为学影响研究

目的探讨三种针刺方法对快速老化痴呆模型小白鼠(senescence-accelerated mice prone 8,SAMP8)认知功能的影响并进行针法优选。方法选取SAMP8小鼠60只随机分为SAMP8对照组、针刺腹穴组、针刺背俞穴组、针刺腹背穴组和针刺非穴组,每组12只,并设抗快速老化亚系小鼠(senescence accelerated mouse resistance1,SAMR1)对照组12只。针刺腹穴组采用"益气调血,扶本培元"针法,针刺膻中、中脘、气海及双侧血海、足三里;针刺背俞穴组采用双侧肺俞、脾俞和肾俞;针刺腹背穴组采用针刺腹穴加背穴组穴;针刺非穴组取双侧胁下两个固定非经非穴点;SAMP8对照组与SAMR1对照组均不做任何治疗。应用Morris水迷宫观测各组小鼠空间参考记忆能力的变化,分析针刺对SAMP8小鼠认知功能的影响。结果 (1)三种针刺方法均能显著性降低老化度评分,而腹穴组和腹背穴针刺有肯定、显著的疗效优势。(2)SAMP8小鼠存在学习记忆的获得、巩固、保留和再学习方面的认知损害,而三个针刺方法都能显著地改善这种认知功能损害且具有穴位特异性;其中,在隐蔽平台中,针刺背俞穴组起效早但疗效不稳定,针刺腹背穴组起效稳定且从第三天保持最短的平均潜伏期时间;反向试验中,SAMP8针刺腹穴组显示更快和更稳定的作用。结论三种不同针法均能抵抗SAMP8快速老化进程,改善SAMP8认知功能障碍,而改善特点不同。动物实验支持原有"益气调血、扶本培元"针法处方。

三七总皂苷对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8脑组织中NF-κB/p50表达的影响

目的观察三七总皂苷(PNS)对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8脑组织中大脑转录因子NF-κB/p50表达的影响。方法将60只SAMP8随机分为对照组、PNS高剂量组、PNS低剂量组、石杉碱甲(Huperzine A)组,每组15只。PNS高、低剂量组分别给予PNS 200 mg/kg、100 mg/kg灌胃,Haperzine A组给予Huperzine A 0.03 mg/kg灌胃,对照组给予相同容积生理盐水灌胃,均每天1次,连续给药2个月。灌胃结束后,取小鼠脑组织。分别采用real-time PCR技术、Western blotting、免疫组化法检测小鼠脑组织中的NF-κB/p50 mRNA、NF-κB/p50蛋白、NF-κB/p50阳性细胞。结果 PNS高剂量组、PNS低剂量组、Huperzine A组、对照组NF-κB/p50 mRNA的相对表达量分别为1.61±0.05、1.72±0.19、1.36±0.24、1.85±0.08;PNS高剂量组与对照组相比,P<0.05;Huperzine A组与对照组相比,P<0.01。PNS高剂量组、PNS低剂量组、Huperzine A组、对照组NF-κB/p50蛋白的相对灰度强度分别为0.696±0.029、0.910±0.038、1.315±0.014、1.436±0.025;PNS高剂量组、PNS低剂量组对照组相比,P均<0.01;Huperzine A组与对照组相比,P<0.05。PNS高剂量组、PNS低剂量组、Huperzine A组、对照组NF-κB/p50阳性细胞数分别为(35±6)、(5±7)、(63±4)、(71±11)个/HP;PNS高剂量组、PNS低剂量组与对照组相比,P均<0.01;Huperzine A组与对照组相比,P<0.05。结论 PNS能降低SAMP8脑组织中NF-κB/p50 mRNA和蛋白的表达,可能是其下调淀粉样前体蛋白基因表达的作用机制。

淀粉样前体蛋白转基因痴呆模型小鼠视网膜和视神经纤维层病理改变

目的观察淀粉样前体蛋白(amyloid precusor protein,APP)转基因痴呆(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠视网膜组织病理和视神经纤维记数的改变。方法本实验采用6只10月龄的C57BL/6JAPP转基因雄性小鼠模型作为模型组,6只同月龄的C57BL/6J正常雄性小鼠作为正常对照组。处死小鼠,完整取出眼球分离视网膜,进行视网膜常规HE染色,同时取球后视神经制作半薄切片,甲苯胺蓝染色,光镜观察视神经形态,行图像分析和轴突纤维计数。结果视神经横断面模型组小鼠与正常对照组相比:神经纤维组织疏松,排列较紊乱,染色深浅不均,间质增多,部分轴突水肿。与正常对照组(1.77±0.04)×106相比,模型组小鼠视神经纤维数量(2.28±0.06)×106明显减少,视神经纤维密度正常对照组和模型组分别为(0.3836±0.0697)μm-2和(0.2701±0.0517)μm-2,差异有统计学意义(P<0.01)。模型组神经细胞平均光密度值无明显变化,与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与正常对照组比较,模型组小鼠视网膜神经节细胞层细胞数量明显减少,差异有统计学意义(P<0.01),两组内颗粒层和外颗粒层细胞数量无明显变化,差异无统计学意义(均为P>0.05)。结论 APP转基因AD模型小鼠视网膜神经节细胞数减少,视神经纤维数明显减少而且受损,提示APP转基因AD模型小鼠视网膜和视神经存在退行性病变。

金属硫蛋白3对快速老化痴呆模型小鼠行为学变化的影响

目的研究金属硫蛋白(MT)3对快速老化痴呆模型小鼠(SAMP8)水迷宫行为学变化的影响。方法给小鼠不同浓度MT3及盐水腹腔注射28 d,进行Morris水迷宫检测。结果与快速老化小鼠对照系(SAMR1)小鼠相比,SAMP8逃避潜伏期明显延长(P<0.01),跨越原平台次数明显减少(P<0.05);3种浓度MT3组当中高浓度MT3组逃避潜伏期最短,跨越原平台次数最多(P<0.05);高浓度MT3组与SAMR1相比,逃避潜伏期仍延长,跨越原平台次数减少(P<0.05)。结论高浓度MT3可以提高SAMP8小鼠的学习能力和记忆能力,其作用效果与浓度有关。

两种中药提取物对拟痴呆模型小鼠学习记忆功能的改善作用

目的：研究何首乌提取物（TSG）和山茱萸提取物（SSY—B2）对记忆获得性障碍模型小鼠学习记忆功能的改善作用。方法：小鼠分为：对照组、模型组、TSG治疗组分为小（0．03g／kg／d）、中（0.1g／kg／d）、大（0．3g／kg／d）3个剂量组，SSY—B2治疗组分为小（1．78g／kg／d）、中（5g／kg／d）、大（15g／kg／d）3个剂量组，阳性对照药组：吡拉西坦（Piracitan 0．7g／kg／d），分别灌胃给药，于第5天，给药30分钟后，除对照组腹腔注射生理盐水外，其它各组注射东莨菪碱1mg·kg^-1，20分钟后进行Morris水迷宫测试，连续测试5d后，将小鼠断头，各组冰浴下取其脑组织迅速冻于液氮中，-80℃冰箱保存，一周后将小鼠半侧脑组织按1：10（W／V）加入0．05MPBS（pH7．4）缓冲液，冰浴下匀浆，4℃离心弃上清，取其粗膜，并调整蛋白浓度1—2g／L，用同位素放射配基法进行M-胆碱能受体结合力测定。结果：在Morris水迷宫测试中，何首乌提取物（TSG）和山茱萸提取物（SSY—B2）均能显著缩短记忆障碍模型小鼠Morris水迷宫搜索平台时间和搜索距离，TSG和SSY—B2各剂量组的学习成绩均优于模型组，TSG中剂量和SSY—B2中、大剂量组与模型组比较（P〈0．05）。M-胆碱能受体结合力测定结果显示；TSG和SSY—B2给药组均能提高模型小鼠脑组织中M-胆碱能受体结合力，与模型组比较；TSG大剂量和SSY—B2中、高剂量组均有显著差异（P（0.05）。结论：两种中药提取物TSG和SSY—B2对东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍有一定的改善作用，并能增加该模型小鼠的脑组织M-受体结合力，今后可尝试用于老年性痴呆的预防和治疗。

金属硫蛋白3对快速老化痴呆模型小鼠海马组织学变化的影响

目的研究金属硫蛋白(MT)3对快速老化痴呆模型小鼠(SAMP8)海马结构CA1区神经元组织学变化的影响。方法给小鼠不同浓度MT3及盐水腹腔注射28 d,处死小鼠后应用光镜和电镜观察制备标本海马结构神经元的变化。结果快速老化小鼠对照小鼠(SAMR1)海马CA1区锥体细胞排列较整齐、均匀,胞膜完整,染色质分布均匀,细胞核呈圆形或椭圆形,核仁清楚,细胞器清晰可见。SAMP8组海马CA1区可见锥体细胞稀疏、排列紊乱,大部分神经元肿胀、空化,出现凋亡细胞,很多胞核固缩深染,胶质细胞增多,有较多脂褐素沉积。低、中、高浓度MT3组海马CA1区锥体细胞较空白对照组结构较清晰,排列较整齐均匀。神经元核基质呈轻度空化改变,胞质内都可见线粒体、粗面内质网及脂褐素,胶质细胞减少。高浓度MT3组的超微结构最接近于SAMR1组,但仍处于老化状态。结论 SAMP8海马有组织结构和超微结构的改变。MT3对SAMP8海马锥体细胞有保护的作用。

加味开心散对多因素神经损伤痴呆小鼠学习记忆能力的影响

目的研究加味开心散对多因素神经损伤痴呆小鼠学习记忆能力的影响及作用机制。方法利用多因素神经损伤构建痴呆小鼠模型,给以加味开心散水提物与水醇共提物,以石杉碱甲(0.05mg/kg)作为阳性对照药物,连续灌胃10d;采用Morris水迷宫与主动避暗实验等行为学实验,评价加味开心散对多因素神经损伤痴呆小鼠学习记忆能力的影响。同时测定受试小鼠大脑皮层中胆碱酯酶(ChE)、超氧化物歧化酶(SOD)活力,神经生长因子(NGF)及其前体蛋白表达水平,探索其作用机制。结果行为学测试结果显示加味开心散可明显缩短小鼠Morris水迷宫定位导航潜伏期,增加空间探索中穿越平台次数,减少上台前游泳距离;降低主动回避实验中明暗箱穿梭错误次数。降低ChE活性,提高NGF的表达水平。水醇共提物效果优于水提物。结论加味开心散可明显增强多因素神经损伤痴呆小鼠的学习记忆能力,其作用的机制可能与抑制乙酰胆碱降解,提升神经因子表达有关。

开心散对SAMP8小鼠神经递质的影响

目的观察开心散对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8神经递质的影响。方法将40只SAMP8小鼠按随机数字表法分为模型组、开心散高剂量组、开心散低剂量组、艾地苯醌组,每组10只,选10只SAMR1小鼠为正常组。灌胃给药干预8 w后,取血浆及组织上清,采用酶联免疫吸附法检测小鼠脑组织及血浆5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)含量。结果与正常组比较,各组脑组织5-HT、5-HIAA、NE、DA含量显著降低(P<0.01),血浆5-HT、5-HIAA、NE、DA含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,开心散高剂量组和低剂量组脑组织5-HT、5-HIAA、NE、DA含量显著升高(P<0.01),血浆5-HT、5-HIAA、NE、DA含量显著降低(P<0.01)。结论开心散可以通过改善快速老化痴呆模型小鼠单胺类神经递质的含量,调整神经递质的不平衡状态,进而改善阿尔茨海默病(AD)的行为和精神症状。

生慧汤对APP/PS1雄性AD小鼠海马内APP代谢产物的昼夜变化影响

目的研究生慧汤对APP/PS1(β-amyloid precursor protein/presenilin 1246E)小鼠海马内β淀粉样前体蛋白(Amyloid precursor protein,APP)代谢产物昼夜表达的影响。方法将56只雄性APP/PS1双转基因痴呆模型小鼠随机分为4组,分别为:痴呆模型组、褪黑素治疗组(0.78 mg·kg^(-1)·d^(-1))、生慧汤高剂量组(27.0 g·kg^(-1)·d^(-1))、生慧汤低剂量组(13.5 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组14只;对照组为14只雄性C57BL/6J小鼠,连续给药30天。采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,采用酶联免疫吸附检测(ELISA)检测不同时间段取出的海马组织sAPPα含量。对海马β淀粉样蛋白_(1-40)、β淀粉样蛋白_(1-42)表达进行免疫印迹分析。免疫组化(IHC)检测海马CA1区Aβ_(1-40)蛋白的表达。结果Morris水迷宫结果表明,与对照组相比,模型组上平台潜伏期明显延长、穿越平台次数明显减少(P<0.01);与模型组相比,生慧汤不同剂量组上平台潜伏期明显缩短(P<0.01、P<0.05),穿越平台次数明显增加(P<0.05)。ELISA结果表明,与对照组相比,模型组的sAPPα总量、各时间段(12:00、24:00)sAPPα含量明显减少(P<0.01);与模型组相比,生慧汤不同剂量组sAPPα总量明显增多(P<0.01、P<0.05),生慧汤高剂量组仅能增加12:00 sAPPα含量(P<0.01),生慧汤低剂量组仅能增加24:00 sAPPα含量(P<0.05)。对照组sAPPα含量具有明显昼夜差异(P<0.01)。模型组sAPPα含量的昼夜差异性消失(P>0.05)。生慧汤高剂量组sAPPα含量具有昼夜差异(P<0.01),生慧汤低剂量组sAPPα含量不具有昼夜差异(P>0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,模型组Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)蛋白表达明显增加(P<0.01);与模型组相比,生慧汤高剂量组Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)蛋白表达减少(P<0.05、P<0.01);生慧汤低剂量组仅能减少Aβ_(1-40)蛋白的表达(P<0.05),对Aβ_(1-42)蛋白表达无影响(P>0.05)。免疫组化结果表明,与对照组相比,模型组Aβ_(1-40)表达明显增加(P<0.01);与模型组相比,生慧汤不同剂量组Aβ_(1-40)表达不同程度减少(P<0.01、P<0.05)。结论生慧汤能够改善5月龄APP/PS1阿尔茨海默病模型小鼠的学习记忆障碍,其机制可能与恢复海马内APP代谢产物sAPPα的昼夜节律性表达、从而减少Aβ的沉积有关。

复方薰衣草糖浆对半乳糖致老年痴呆模型小鼠的保护作用

目的:研究维药复方薰衣草糖浆对D-半乳糖(D-gal)致老年痴呆模型小鼠的保护作用。方法:NIH小鼠120只,随机分为六组:正常对照组(NC),模型组(D-gal),维生素E片组,复方薰衣草糖浆低、中、高三个剂量组:分别为4.5ml/kg、9.0ml/kg和18.0ml/kg(分别相当于含生药量0.67g/kg、1.35g/kg和2.70g/kg)。每组小鼠20只。除NC组外,各组小鼠均颈背部iH D-gal50mg/kg。维生素E片组和复方薰衣草糖浆3个剂量组均ig给药,D-gal组和NC组小鼠分别ig等容量生理盐水,每日一次,造模和给药均连续60天。分别以跳台实验、迷宫实验法测定其潜伏期和5min内错误次数,并测定各组小鼠脑组织SOD活性及MDA含量。结果:跳台实验和迷宫实验中,D-gal组潜伏期和5min错误次数均明显高于NC组和各给药组,给药各组均可使潜伏期和5min错误次数明显降低。模型组小鼠脑SOD活性低于、MDA含量则高于NC组,用复方薰衣草糖浆均可使SOD活性明显提高,MDA含量明显降低。结论:复方薰衣草糖浆能显著提高老年痴呆模型小鼠的学习、记忆能力,提高脑组织SOD活性,降低脂质过氧化产物MDA的含量。

叶黄素对老年痴呆小鼠学习记忆能力的改善作用

目的探讨叶黄素对老年痴呆(AD)模型小鼠学习记忆能力的影响及相关作用机制。方法采用5月龄雄性快速老化痴呆模型小鼠(SAMP8)作为自然发病的AD模型,随机分为AD模型组和3个叶黄素剂量组(15、30、60 mg/kg BW),采用正常老化小鼠(SAMR1)作为正常对照组,连续灌胃8周。灌胃结束后采用Morris水迷宫对小鼠进行学习记忆能力测验,取小鼠脑组织检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和乙酰胆碱酯酶(Ach E)水平,取小鼠海马组织进行病理学观察。结果与AD模型组比较,叶黄素中、高剂量组的潜伏期明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05);3个叶黄素剂量组的CAT、Ach E活性均明显升高,GSH含量明显增加,MDA含量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);叶黄素高剂量组海马组织细胞异常明显减少。结论叶黄素可改善快速老化痴呆模型小鼠的学习记忆能力,其作用机制之一可能是提升小鼠的抗氧化能力,减少氧化应激损伤。

补益脾胃元气方药对SAMP8小鼠海马区形态功能和皮层胆碱能系统的影响

目的研究补益脾胃元气方药人参、大补元煎、洗心汤对快速老化痴呆模型(SAMP8)小鼠空间学习记忆能力、海马区形态功能和皮层胆碱能系统的影响,探讨其治疗阿尔茨海默病的可能作用机制。方法3月龄雄性SAMP8小鼠随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组、人参组、洗心汤组、大补元煎组,以雄性抗快速老化型(SAMR1)小鼠为对照组。除对照组和模型组ig蒸馏水外,其余各组ig药物(10 mL/kg),1次/d,连续3个月。实验结束后采用Morris水迷宫实验检测小鼠空间学习记忆能力,透射电镜观察小鼠海马CA3区突触超微结构,免疫组化法检测CA1区神经元密度、脑组织β淀粉样蛋白(Aβ)水平,生物化学法检测海马胆碱乙酰基转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性。结果补益脾胃元气方药各组小鼠逃避潜伏期平均值明显下降,在目的象限游泳时间、穿过平台次数显著增加(P<0.05、0.01);各组小鼠Aβ阳性细胞数目显著降低(P<0.05、0.01),神经元特异核蛋白(NueN)阳性细胞密度有上升趋势,但无显著差异;各组小鼠ChAT活性升高(P<0.05、0.01),人参、洗心汤组小鼠AChE活性降低(P<0.05)。结论补益脾胃元气方药对SAMP8小鼠空间识别和学习记忆能力有明显改善作用,其机制可能与影响小鼠海马突触结构、促进海马神经元修复、降低小鼠脑内Aβ表达、调节海马胆碱能系统有关。