莱阳梨膏对咳嗽模型鼠的改善作用研究

为探究莱阳梨膏对小鼠引咳后咳嗽的改善作用机制,采用浓氨水引咳法构建咳嗽小鼠模型,将50只小鼠随机分为5组,即空白对照组、阳性对照组(枸橼酸喷托维林)、高剂量组(12 g/kg莱阳梨膏)、中剂量组(6 g/kg莱阳梨膏)、低剂量组(3 g/kg莱阳梨膏),每组10只,共50只。每日按0.2 mL/10 g灌胃给药,为期10 d,测定咳嗽次数、潜伏期、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、肺脏组织过氧化物酶(POD)活性、丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽(GSH)含量和脾脏指数等指标。结果表明:与空白对照组相比,高剂量组降低了2 min内小鼠咳嗽次数,延长了咳嗽潜伏期,同时提升了小鼠SOD、POD活性和GSH含量,降低了MDA含量,提高了小鼠脾脏指数,差异显著(P<0.05)。中、低剂量组也表现一定改善效果,但差异不显著(P>0.05)。与阳性对照组相比,高剂量组咳嗽次数、POD活性、GSH及MDA含量、脾脏指数多个指标相近,而SOD活性超过阳性对照组,差异不显著(P>0.05)。综上,莱阳梨膏高剂量组(12 g/kg)镇咳效果优,可增强机体抗氧化能力及免疫水平。

芦荟提取物对衰老模型鼠抗自由基氧化损伤DNA作用的实验研究

目的 :探讨芦荟延缓衰老的疗效及其可能机理。方法 :利用小鼠吸入臭氧 (O3)制造衰老模型 ,并在其造模过程中以不同浓度的芦荟提取液实施治疗 ,9周后检测小鼠全血超氧化物歧化酶 (SOD)的活性 ,肝组织过氧化脂质代谢产物丙二醛 (MDA)的含量 ,并用彗星实验 (CometAssay)检测肝、脾组织细胞DNA氧化损伤的程度。结果 :与模型组相比 ,经芦荟治疗后 ,模型小鼠不仅全血SOD活性及肝组织MDA含量两项指标明显改善并趋向正常 ,而且肝、脾细胞DNA拖尾尾长减短 ,有效地减轻了肝、脾细胞DNA的损伤程度 ,作用较复方丹参片对照组全面。结论 :芦荟能提高机体抗自由基氧化损伤的能力 ,减轻肝、脾细胞DNA损伤程度 。

针刺单穴对快速老化模型鼠衰老相关基因表达的影响

目的:探讨针刺单穴水沟、内关、太冲、肾俞、后三里对快速老化模型鼠(SAM)P10品系脑中衰老相关性基因片段表达水平的影响。方法:应用由磁珠分离法纯化信使核糖核酸(mR-NA),5’末端模板转换机制进行逆转录—多聚酶链式反应(SMART-PCR)合成互补脱氧核糖核酸(cDNA)和扩增片段长度多态性分析(AFLP)—银染法结合形成的mRNA—AFLP分析技术。展示各组mRNA之间的差异。结果:随机应用20对引物作选择性AFLP扩增,共发现42条带型清晰的SAM P、R两系组间差异表达带。其中,各有34、26、26、8和17条差示带的表达分别受针刺水沟、内关、太冲、肾俞、后三里穴的显著调节而趋同于R系。结论:针刺不同单穴能不同程度地影响衰老相关性基因片段的表达,从而发挥不同程度的抗衰老作用。

强骨宝方糖尿病模型鼠不同时效与量效的含药血清对成骨细胞增殖的影响

目的:探讨强骨宝方糖尿病模型鼠含药血清促进体外培养成骨细胞增殖的最佳时相与量效。方法:采用胰蛋白酶-Ⅱ型胶原酶消化法从1-2日龄SD大鼠颅盖骨中分离出成骨细胞,鉴定细胞后,用不灭活的不同时效(灌胃3d、5d,末次灌胃后1h、3h)、不同浓度(5%、10%、20%)的强骨宝方糖尿病模型鼠含药血清加入成骨细胞培养体系,培养48、72h,应用MTT比色法来检测其对成骨细胞增殖功能的影响。结果:各时相的强骨宝方糖尿病模型鼠含药血清对成骨细胞的增殖作用呈浓度依赖性,即20%>10%>5%;其中以3d末次灌胃后1h、20%的含药血清作用最明显,在成骨细胞培养48h、72h后均具有显著促进其增殖作用。结论:灌胃3d、末次灌胃后1h、20%不灭活的强骨宝方糖尿病模型鼠含药血清对成骨细胞增殖作用最明显。

一种含姜黄食品对去卵巢模型鼠骨组织的影响

目的:探讨一种含姜黄食品对去卵巢模型鼠骨组织变化的影响。方法:采用双侧去卵巢法制备去卵巢诱发骨质疏松大鼠模型,将动物分为假手术组、模型对照组、含姜黄受试物组和不含姜黄受试物组,连续喂养90 d,测定各组大鼠体重变化、血清中骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)及核因子Κ-β受体活化因子配体(Receptor Activator for Nuclear FactorΚ-βLigand,RANKL)水平、大鼠股骨长度以及骨组织形态学检测。结果:喂养90 d后,姜黄组大鼠体重增长趋势与假手术组较为接近(p>0.05)。姜黄组大鼠血清OPG水平、股骨长度、骨小梁厚度以及成骨细胞数显著高于模型对照组(p<0.01),RANKL水平、骨小梁间隙以及破骨细胞数显著低于模型对照组(p<0.01)。姜黄组与不含姜黄组比较,大鼠血清中OPG、骨小梁厚度高于不含姜黄组(p<0.05),RANKL、骨小梁间隙低于不含姜黄组(p<0.05);姜黄组大鼠股骨长度及成骨细胞数显著高于不含姜黄组(p<0.01),破骨细胞数显著少于不含姜黄组(p<0.01)。结论:实验结果表明,此含姜黄食品对去卵巢模型鼠骨组织退变有一定的抑制作用。

维生素E对D-半乳糖亚急性中毒拟衰老模型鼠氧自由基及相关生化指标的影响

目的研究维生素E(VE)对D-半乳糖(D-gal)亚急性中毒拟衰老模型鼠自由基产生及相关生化指标的影响。方法昆明小鼠颈背部皮下注射D-gal40mg·kg-1.d-1制备D-gal亚急性中毒导致的衰老鼠模型。将模型鼠分为模型组和高、中、低剂量VE组(分别灌胃60、30、15mg·kg-1.d-1VE),10w后杀鼠。采用硫代巴比妥酸(TBA)法检测血清中丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法检测血清中总超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用ISP半自动生化分析仪检测血清中血糖(Glu)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量。结果模型鼠血清中MDA含量、Glu、TC、TG含量显著高于正常对照组,SOD含量显著低于正常对照组(均P<0.05),高、中、低剂量VE组血清MDA含量显著低于模型对照组,总SOD含量显著高于模型对照组(均P<0.05)。高、中、低剂量VE组小鼠血清Glu、TC、TG含量与模型对照组无显著差异。结论VE可以对衰老鼠的氧自由基损伤发挥保护作用,为临床将VE作为一种抗衰老药物应用提供了进一步的试验依据。

复方黄芪合剂对早期DN模型鼠Col-Ⅳ及MMP-2/TIMP-2的影响

为研究复方黄芪合剂 (主药 :黄芪、牛蒡子 )治疗DN的疗效与机理 ,4 5只大鼠以STZ诱导造成糖尿病模型 ,3d后分为 3组 ,B组给予复方黄芪合剂 ( 5g·kg- 1·d- 1)、C组给予洛汀新 ( 4mg·kg- 1·d- 1)药液灌胃 ,D组予等量生理盐水灌胃 (模型组 ) ,另一组大鼠为对照组 (A组 ) ,不作任何处理。 6周后比较各组大鼠的有关指标。结果 :B、C组大鼠的Ccr、Ualb、肾脏基质阳性面积比、Col Ⅳ、MMP 2、TIMP 2诸项指标均高于D组 ,其中GLU、HbAlc、Ccr三项指标B组优于C组。提示 :降低肾脏Col Ⅳ、MMP 2 /TIMP 2的表达 。

模型鼠低氧预适应适宜氧气浓度研究

目的:研究低氧预适应训练的适宜氧气浓度。方法:设计了短期和长期两种间歇性低氧暴露模式,研究了一系列不同浓度的低氧环境对模型鼠体重、血氧饱和度、游泳能力等方面的影响,进而探讨低氧预适应效应与氧气浓度之间的内在联系。结果:模型鼠长期暴露于低氧环境中,其体重增长率逐步下降;在15%～8%的低氧浓度区间,模型鼠血氧饱和度随氧气浓度降低呈现平台似缓慢下降趋势;低氧预适应训练后的模型鼠游泳能力显著提高,经在10%低氧环境中进行低氧预适应训练后的昆明小鼠游泳能力提高最为明显。结论:适当浓度的低氧预适应训练可以改善模型鼠低氧耐受能力,显著提高模型鼠运动能力。15%～10%氧气浓度区间可视为低氧预适应有益作用区间。10%氧气浓度为模型鼠低氧预适应训练的较适宜浓度。

维生素E对D-半乳糖亚急性中毒拟衰老模型鼠自由基及相关生化指标的影响

目的研究维生素E(VE)对D-半乳糖(D-gal)亚急性中毒拟衰老模型鼠自由基产生及相关生化指标的影响。方法昆明小鼠颈背部皮下注射D-gal40mg.kg-1.d-1制备D-gal亚急性中毒导致的衰老鼠模型。将模型鼠分为4组,除对照组外,其他3组模型鼠分别灌胃以60、30、15mg.kg-1.d-1VE,10w后杀鼠。摘眼球取血,室温离心,分离血清,采用硫代巴比妥酸(TBA)法检测血清中丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法检测血清中总超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用ISP半自动生化分析仪检测血清中血糖(Glu)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量。结果模型鼠血清中MDA含量显著高于正常对照组(P<0.05),VE喂饲的3个实验组小鼠血清MDA含量显著低于对照组(P<0.05)。模型鼠血清总SOD含量显著低于正常对照组(P<0.05),VE喂饲的3个实验组小鼠血清总SOD含量显著高于对照组(P<0.05)。模型鼠血清中的Glu、TC、TG含量显著高于正常对照组(P<0.05)。VE喂饲的3个实验组小鼠血清中Glu、TC、TG与对照组无显著差异。结论VE可以对衰老鼠的氧自由基损伤发挥保护作用,为临床将VE作为一种抗衰老药物应用提供了进一步的试验依据。

骨髓间充质干细胞治疗再生障碍性贫血模型鼠的机制

背景:骨髓间充质干细胞在体外抑制再生障碍性贫血T淋巴细胞的活化与增殖,并有支持骨髓造血作用。目的:观察骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血模型鼠存活率的影响,探讨其治疗再生障碍性贫血的机制。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2009-01/04在安徽医科大学第一附属医院中心实验室完成。材料:清洁级雌性BALB/C小鼠40只,8～10周龄,体质量16～18g,作为受体。清洁级DBA/2小鼠5只,6～10周龄,体质量15～19g为淋巴细胞供体。方法:取BALB/c小鼠骨髓进行间充质干细胞体外增殖培养,传至3～5代的细胞用于实验。建立免疫介导再生障碍性贫血小鼠模型。40只BALB/C小鼠随机分为3组,治疗组(n=15):造模后将1×106个骨髓间充质干细胞输注到治疗组小鼠体内进行治疗;模型组(n=15):仅造模不进行任何治疗;对照组(n=10):不进行任何干预。主要观察指标:分别于第1,2,3,4周观察各组小鼠的存活率;流式细胞仪及酶联免疫吸附法测定骨髓间充质干细胞治疗后第28天各组小鼠T淋巴细胞亚群及血浆肿瘤坏死因子α的表达。结果:①模型组小鼠3只于第2周内死亡,7只于第3周内死亡,2只于第4周内死亡,28天存活率20%;治疗组小鼠4只于第3周内死亡,28天存活率73%。②与模型组相比,治疗组和对照组CD4的表达增高[(27.12±4.23)%,(32.18±6.73)%,(38.44±7.88)%,P<0.01];CD8和肿瘤坏死因子α表达均降低[CD8:(34.42±5.13)%,(27.33±5.09)%,(23.31±5.24)%,P<0.01;肿瘤坏死因子α:(47.27±10.11),(12.34±5.87),(9.31±3.77)ng/L,P<0.01]。结论:骨髓间充质干细胞可以提高再生障碍性贫血小鼠存活率,其治疗机制可能与调节T淋巴细胞亚群及抑制T淋巴细胞分泌的肿瘤坏死因子α有关。

常压吸氧对MCAO再灌注模型鼠神经再生的影响及机制

目的探讨常压吸氧治疗缺血性中风的效果及机制。方法取80只雄性SD大鼠,随机分成假手术组、模型组、低氧组及高氧组各20只。参照Longa改良线栓法制作中动脉闭塞(MCAO)再灌注模型,假手术组仅暴露相关动脉,不予结扎;造模后低氧组及高氧组均吸氧1 h,氧浓度分别为30%、70%,清醒后四组均行神经功能缺损评分,计为第1天,之后低氧组及高氧组每天吸氧1 h,共7 d。观察四组行为学改变,免疫组织化学法观察细胞形态学变化并测定巢蛋白(Nestin)、低氧诱导因子(HIF-1)表达。结果低氧组、高氧组中风偏瘫症状明显减轻,Nes-tin蛋白表达明显升高,HIF-1表达明显降低。结论吸氧可促进MCAO再灌注模型鼠缺血半影区神经再生,其机制可能与Nestin蛋白表达升高、HIF-1降低有关。

过量运动对肌营养不良模型鼠骨骼肌的损害作用

目的 :观察过量运动对Duchenne型肌营养不良症模型鼠 (mdx鼠 )骨骼肌组织的影响。方法 :让成年和老年mdx小鼠、成年和老年C5 7小鼠连续进行游泳和提尾倒立运动试验 (对照mdx不作运动 ) ,每天 1次 ,每次 13min ,连续 3d后 ,鼠尾静脉注谢Evans蓝 ,次日杀小鼠 ,剥去皮肤 ,观察mdx鼠、C5 7鼠全身骨骼肌颜色改变 ,对比照相后 ,取腓肠肌、膈肌作冰冻切片 ,荧光显微镜下 ,观察Evans蓝的染色范围 ,再作常规HE染色 ,光学显微镜下 ,观察骨骼肌细胞的组织学改变。结果 :肉眼可见运动后的mdx鼠骨骼肌许多部位呈纵形条状蓝色 ,而对照mdx鼠和C5 7鼠几乎无Evans蓝染色 ;荧光显微镜下 ,运动后的mdx鼠骨骼肌可见Evans蓝荧光 ,对照mdx鼠偶见此荧光 ,而C5 7鼠无此荧光。光学显微镜下 ,可见mdx鼠骨骼肌细胞变大、变圆 ,伊红浓染 ,胞核致密粗大 ,坏死的肌细胞胞内结构降解 ,呈无定型结构。膈肌中可见变性坏死的肌纤维居多 ,而C5 7鼠无此改变。结论 :过量运动造成了mdx鼠骨骼肌的损害 ;

针刺对急性脑出血模型鼠微血管形态学的影响

[目的]从微血管角度揭示针刺治疗急性脑出血的作用机制。[方法]从心脏以恒压灌入碳素墨水与甲醛混合液 ,显示血肿区周围微血管的形态 ,使用光镜观测与图形分析。[结果]脑出血后 ,可见血肿区周围充盈显影的血管数目减少 ,以一级血管显影为主 ,血管面积总和急剧下降 ,对照组各时相充盈显影血管总数目和显影血管面积总和均有提高 ,与模型组各时相相比 ,均具有显著性差异(P<0.05)。经针刺治疗处理后 ,血肿周围区满布一级血管及分支血管 ,有些已逆行伸入到血肿区 ,效果明显优于对照组。[结论]血肿区内血管及其周围区血管的增多 ,可为血肿区提供纤溶活性物质 ,促使血肿的进一步溶解 ,这可能是针刺治疗脑出血促进血肿吸收的途径之一。

梅花鹿免疫细胞活性因子对乙醇型胃粘膜损伤模型鼠的保护作用

目的 观察梅花鹿免疫细胞活性因子 (SIAF)对小鼠乙醇型胃粘膜损伤的保护作用。方法 制备小鼠乙醇型胃粘膜损伤模型 ,测定溃疡指数 ,观察胃的出血情况 ,免疫组化染色检测胃粘膜EGFR的表达 ,用酶法测定血清中NO的含量。结果 SIAF组的溃疡指数、胃出血情况与模型组相比 ,差异均有显著意义。SIAF组小鼠损伤周围胃粘膜EGFR表达与模型组相比明显增强。该组小鼠血清NO含量与模型组相比也明显增高。

D-半乳糖所致衰老模型鼠的免疫功能变化

自我国的科学家首次提出D-半乳糖致衰老模型后，由于此方法造模时间短，成模容易，重复性好等特点，目前此法已得到了广泛的应用和大量的文献报道。该模型引起的机体多组织、多器官、多水平损伤符合自然衰老规律，表现出与自然衰老相类似的生理改变。

慢性高眼压模型鼠视网膜神经节细胞及视神经中9位丝氨酸磷酸化糖原合酶激酶3β的表达变化

目的观察慢性高眼压模型鼠视网膜神经节细胞(retina ganglion cells,RGCs)和视神经中9位丝氨酸磷酸化糖原合酶激酶3β[p-GSK3β(ser9)]的表达变化,探讨GSK3β是否在慢性高眼压RGCs及视神经退行性病变中发挥作用。方法取健康SD大鼠30只,随机分为3组:模型对照组、慢性高眼压模型2周组、慢性高眼压模型4周组,每组10只。取大鼠右眼,采用巩膜上静脉结扎并烧灼法建立大鼠慢性高眼压模型。分别于造模后2周和4周取5只大鼠眼球行冰冻切片,尼氏染色观察RGCs数目,免疫荧光染色观察RGCs和视神经中p-GSK3β(ser9)的变化;各组取另外5只大鼠眼视网膜,Western blot检测p-GSK3β(ser9)及总-GSK3β的表达。结果造模前3组大鼠右眼眼压差异无统计学意义(P=0.89);造模后3组间眼压差异有统计学意义(P<0.01),慢性高眼压模型2周组和4周组眼压与模型对照组比较明显升高,分别升高了59.13%和26.93%,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。视网膜尼氏染色RGCs计数发现模型对照组RGCs数为(149±12)个,慢性高眼压模型2周组和4周组RGCs数较模型对照组明显减少,分别为(120±10)个和(86±7)个,差异均有统计学意义(均为P<0.05);且4周组比2周组进一步减少(P<0.01)。慢性高眼压模型2周组和4周组视网膜中p-GSK3β(ser9)阳性着色,同模型对照组相比,其RGCs层及视神经中p-GSK3β(ser9)染色荧光减弱;4周组较模型对照组减弱更明显。与模型对照组相比,慢性高眼压模型2周组和4周组视网膜中总-GSK3β的表达差异无统计学意义(F=0.24,P=0.79);而3组间p-GSK3β(ser9)表达差异有统计学意义(P<0.01),与模型对照组相比,慢性高眼压模型2周组和4周组视网膜中p-GSK3β(ser9)分别减少了19.89%和36.46%(均为P<0.05)。慢性高眼压模型4周组比2周组视网膜中p-GSK3β(ser9)表达持续减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论慢性高眼压模型鼠RGCs数目减少,RGCs和视神经中p-GSK3β(ser9)表达减少,推测p-GSK3β(ser9)表达变化可能参与了慢性高眼压模型鼠RGCs及视神经退行性病变。

狼疮方3号颗粒对狼疮模型鼠血清白介素6及脾脏T淋巴细胞亚群的影响

目的研究中药复方狼疮方3号(LCF-3)对BXSB狼疮小鼠血清白介素6(IL-6)以及脾脏T淋巴细胞亚群的作用,探讨其对系统性红斑狼疮(SLE)的作用机制。方法将BXSB狼疮模型鼠随机分成4组:空白对照组、中药组、西药组、中西药合用组。双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清中IL-6的含量;流式细胞术测定小鼠脾脏T淋巴细胞亚群的阳性率。结果3个给药组均可显著降低IL-6的含量;各给药组对CD3+、CD4+、CD8+T细胞均有提升作用,但中药组对CD4+T细胞的提升作用与对照组相比没有统计学差异(P>0.05),对CD8+T细胞有非常明显的提升作用(P<0.01)。结论中药复方LCF-3与西药泼尼松均对BXSB狼疮小鼠有明显的治疗作用,中西药合用组疗效优于中药、西药组。

Neurturin和NGF联合应用对AD模型鼠基底前脑NGFR阳性神经元的保护作用

本研究目的是探讨neurturin和神经生长因子(NGF)联合应用对穹窿-海马伞(FF)切断后基底前脑胆碱能神经元的保护作用。将这两种因子联合注射到FF切断的大鼠侧脑室,注射一个月后,取脑进行免疫组化结合图像分析方法对内侧隔核(MS)和斜角带核垂直支(VDB)的神经生长因子受体(NGFR)阳性神经元存活情况进行比较分析。结果表明:FF切断一个月后,损伤组损伤侧MS和VDB的NGFR阳性神经元大量减少(分别减少64.8％和51.4％),MS和VDB的NGFR阳性细胞的面积和周长显著降低(P<0.01),OD值显著增高(P<0.01);NGF组损伤侧NGFR阳性神经元受到保护,NGFR阳性经元数显著高于损伤组损伤侧(P<0.01);联合组损伤侧NGFR阳性神经元也受到保护(MS和VDB细胞数分别只下降7.3％和15.4％),与损伤组损伤侧比较NGFR阳性细胞数增加了57.4％和36.0％(P<0.01),也明显高于NGF组(P<0.05);细胞形态学参数明显改善(P<0.05),细胞膜受体含量显著提高(P<0.05)。结果提示,neurturin和NGF联合应用和NGF单独应用均能不同程度地保护基底前脑胆碱能神经元,联合应用效果更佳。