不同氧体积分数气体对体外模拟体内生理环境寄养断肢系统血氧分压的影响

背景:断肢再植成功率与断肢的保存方法有直接关系,开展体外模拟体内生理环境寄养断肢的研究,可以延长肢体保存时间。目的:探讨不同氧体积分数对体外模拟体内生理环境寄养断肢系统血氧分压的影响。方法:健康的新西兰绵羊9头,共计36只肢体,行体外断肢同型血液循环灌注实验。36只肢体按照进入膜肺的气体氧体积分数的不同随机数字表均分成氧体积分数100%,60%,50%,40%,20%,10%组进行观察。结果与结论:各组血氧分压数据相比较,氧体积分数10%的动脉血氧分压数值在正常值范围(10.64～13.33kPa),而且动脉血氧分压的数值随氧体积分数的减小而减小。提示在体外模拟体内生理环境寄养断肢系统中,不同氧体积分数的气体进入膜肺可以对动脉血氧分压产生影响,减小氧体积分数可以使动脉血氧分压接近于正常范围。

脉络宁对体外模拟体内生理环境寄养断肢系统缺血/再灌注损伤模型的作用

背景:减少体外模拟体内生理环境寄养断肢系统的缺血再灌注损伤,可以延长断肢的保存时间,提高断肢的再植成功率。目的:观察脉络宁对体外模拟体内生理环境寄养断肢系统缺血再灌注损伤的影响。方法:健康成年雄性巴马小型猪18只,随机分成冷藏组、血液灌注组和脉络宁联合血液灌注组,每组6只。将每只猪的左后肢离断室温保存3 h后,冷藏组置于4℃冷藏,血液灌注组用血液灌注、脉络宁联合血液灌注组用脉络宁联合血液灌注。灌注6 h后,采用透射电镜分别观察各组离断肢体骨骼肌形态学变化;实时定量RT-PCR检测离断肢体骨骼肌Caspase3和白细胞介素1βmRNA表达。结果与结论:透射电镜结果显示,血液灌注组、脉络宁联合血液灌注组均较冷藏组肌纤维整齐、肌节完整、线粒体肿胀程度轻,且脉络宁联合血液灌注组情况优于血液灌注组;实时定量RT-PCR检测结果显示,3组的caspase3和白细胞介素1β的表达均高于正常,同时血液灌注组和脉络宁联合血液灌注组的caspase3和白细胞介素1β的表达水平明显低于冷藏组,且脉络宁联合血液灌注组表达水平低于血液灌注组。结果提示在体外模拟体内生理环境寄养断肢系统中,脉络宁可显著减轻断肢骨骼肌细胞的缺血再灌注损伤,延长断肢的保存时间。

体外模拟体内生理环境寄养断肢系统采用远端缺血处理灌注方法对保存断肢的作用研究

目的研究体外模拟体内生理环境寄养断肢系统采用远端缺血处理（remote ischemic conditioning,RIC）灌注方法对保存断肢的作用。方法选取健康成年雄性巴马小型猪18只,体质量24~30 kg,随机分为3组（n=6）。A组为正常对照组,未经任何缺血处理;B、C组采用右后肢完全离断并置于室温保存3 h建立骨骼肌缺血模型,之后将断肢接入体外模拟体内生理环境寄养断肢系统,B组进行持续血液灌注,C组行RIC灌注后再持续血液灌注。灌注8 h后取各组骨骼肌标本,行透射电镜形态学观察;采用Western blot检测组织中B淋巴细胞瘤2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）及半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）蛋白水平,ELISA检测线粒体及细胞基质内细胞色素C含量。结果透射电镜观察示,与B组相比,C组骨骼肌纤维排列整齐紧凑,线粒体肿胀程度轻;Western blot检测示,B、C组Bcl-2及Caspase-3蛋白水平均较A组明显升高;与B组比较,C组Bcl-2蛋白水平显著升高,而Caspase-3蛋白水平显著降低;组间比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。ELISA检测示,与A、C组比较,B组线粒体内细胞色素C含量显著降低,但细胞基质内含量明显升高,比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;A、C组间比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论 RIC灌注方法可以显著抑制缺血再灌注引起的骨骼肌损伤,体外模拟体内生理环境寄养断肢系统采用RIC灌注可能起到延长断肢体外寄养时间的作用。