内皮细胞条件培养液诱导单核细胞分化为内皮细胞的实验研究

目的研究ECV-304条件培养液诱导单核细胞分化为内皮细胞的可能性。方法贴壁法分离培养外周血单核细胞并进行鉴定。用购买的ECV-304细胞株制备条件培养液和M-CSF诱导单核细胞分化,观察细胞形态变化,收集细胞,用免疫组化与异植物血凝素结合试验鉴定。结果获得的单核细胞具有CD14阳性细胞占84.3%;刺激一周后的单核细胞形态发生改变并且Ⅷ因子、异植物血凝素结合试验阳性。结论ECV-304条件培养液能诱导单核细胞分化为内皮细胞,提示内皮细胞来源的一条途径。

临床级树突状细胞的分离和培养

目的 探讨从患者外周血树突状细胞前体培养足够数量的树突状细胞及调控其成熟的方法。方法 完全培养基用 5 %人AB型血浆代替 10 %胎牛血清 ,培养过程分两阶段 ,第一阶段 :从患者外周血分离出能黏附塑料的单核细胞 ,在GM CSF +IL 4存在条件下培养 5～ 7d ;第二阶段 ,加入模拟单核细胞条件性培养液或TNF α促进树突状细胞分化成熟。结果 5 %人AB型血浆代替 10 %胎牛血清后 ,在树突状细胞的获得率和纯度方面无统计学差异 ,模拟单核细胞条件性培养液使树突状细胞表达更高比例的成熟标志CD83+,具有更强的刺激T细胞的能力。