pH,抗菌剂浓度以及水分活度对奶油蛋糕(磅蛋糕)模拟培养基中微生物生长的影响

研究了水分活度(0.88,0.93),pH(6,7,8),抗菌剂浓度(0,0.02%,0.2%)对奶油蛋糕中微生物生长的影响。将微生物接种在不同条件的蛋糕模拟培养基上,观察微生物的生长状况。结果表明,微生物生长速度随水分活度升高而加快,当培养基pH到8时微生物生长不受抗菌剂浓度的影响;当pH在6～7时,随着抗菌剂浓度的升高,微生物生长受到明显抑制。另外,以上的结果在不同的微生物间没有显著差别。

模拟肠液培养基中壳寡糖对益生菌生长的影响

文章探究了模拟肠液培养基中壳寡糖对益生菌生长的影响,为益生菌、壳寡糖合生元的开发提供理论依据。将益生菌接种至含不同浓度壳寡糖的模拟肠液培养基中培养,通过测定菌体密度(△OD_(600))、活菌数的变化,测定△OD_(260)的变化以及用扫描电子显微镜表征细胞膜的完整性,明确模拟肠液培养基中壳寡糖对益生菌生长、细胞膜完整性的影响。结果显示8株专利益生菌都可以在模拟肠液培养基中正常生长,都不能以壳寡糖为唯一碳源生长。自然培养过程模拟肠液培养基中壳寡糖抑制8株专利益生菌的生长;壳寡糖处理导致益生菌细胞膜表面塌陷及褶皱,破坏了益生菌细胞膜的完整性。偏碱性模拟肠液培养基中壳寡糖对8株专利益生菌的生长没有统一的抑制作用。偏碱性模拟肠液环境下,壳寡糖对益生菌生长的抑制作用较弱,或没有抑制作用,可以将益生乳酸菌与壳寡糖复配开发合生元,用于调节肠道微生态。

酒酒球菌在不同模拟酒培养基中的降酸效果研究

【目的】选择一种成分简单、降酸效果好的模拟酒培养基,为后续的苹果酸-乳酸发酵研究奠定基础。【方法】利用高效液相色谱等方法,分别测定不同时段酒酒球菌31 MBR和SD-2a在A、B、C、D4种模拟酒培养基中的L-苹果酸、L-乳酸质量浓度及pH值和OD值,研究不同培养基中L-苹果酸的降解效果。【结果】酒酒球菌31 MBR在A、B、D 3种培养基中的降酸效果基本一致,在第4天时L-苹果酸的降解率分别为90.75%,89.47%和91.92%,在C培养基中降解率稍低,为79.99%;SD-2a在B、D 2种模拟酒培养基中的降酸效果基本一致,第4天时L-苹果酸降解率分别为94.32%和91.49%,而在A、C 2种模拟酒培养基中降酸较慢,第4天时的L-苹果酸降解率分别为51.24%和69.21%。液相色谱分析表明,酒酒球菌31 MBR和SD-2a在A、B培养基中培养,均能够获得分离效果较好的色谱图。【结论】A培养基适于酒酒球菌31 MBR的苹果酸-乳酸发酵,B培养基适于酒酒球菌SD-2a的苹果酸-乳酸发酵。

非最终灭菌小容量注射剂培养基模拟灌装试验研究

采用经除菌过滤的大豆胰蛋白胨液体培养基,在与实际生产相同的条件下,进行连续三批的培养基模拟灌装试验,微生物培养,结果均无菌生长,以此评价非最终灭菌小容量注射剂(F0<8)无菌生产工艺对产品无菌保证的有效性和稳定性。本文就非最终灭菌小容量注射剂(F0<8)无菌工艺的模拟灌装试验进行了探讨。

培养基模拟灌装试验相关缺陷分析与改进建议

目的帮助生产企业和药品生产质量管理规范(GMP)检查员了解培养基模拟灌装试验中的关键点,改进缺陷以符合法规要求。方法分析无菌药品生产企业GMP认证现场检查发现的缺陷中涉及培养基模拟灌装试验的问题,及其产生原因。结果与结论共发现与培养基模拟灌装相关的缺陷项378条,出现频次较高的缺陷分为人员与培训、方案设计、培养基及培养条件、记录缺失、最差条件、干扰设计、偏差调查7个方面。分析其表现及对策,有助于形成培养基模拟灌装试验的关注要点与重点。

培养基模拟灌装试验方法探讨

对非最终灭菌产品培养基模拟灌装试验过程和使用的方法进行了全面阐述和探讨。培养基模拟灌装试验主要包括建立可接受标准、培养基性能测试、无菌环境控制与监测、模拟灌装过程、微生物培养和结果评价等几方面,通过试验以证明无菌工艺的可靠性。

浅析培养基模拟试验的方案设计与无菌生产工艺管理

绝对的无菌状态是不存在的。只能增加产品的无菌保证水平来保证产品的无菌性能合格。培养基模拟灌装试验是有效的无菌生产的评估工具,是GMP要求的无菌药品生产的工艺验证项目之一。长期以来,制药界更多的关注是培养基模拟试验的灌装过程,仅对灌装、轧盖等产品成型阶段的考察。忽略了对产品生产的前期阶段的考察。本文从培养基模拟实验的原料及其准备、培养基试验所用器具与包装材料培养基试验人员及灌装工序等三个方面对产品及试验结果的影响分析,提出了培养基模拟灌装试验的方案设计的要点,及无菌生产工艺管理的有关要求。

基于风险评估的培养基模拟灌装试验设计的探讨

培养基模拟灌装试验对于评估无菌工艺、人员操作、设备环境等可靠性有着重要的参考意义。以某西林瓶生产线无菌培养基模拟灌装为例,从风险评估、最差条件选择、模拟动作设计和模拟灌装时间等方面进行了试验设计的探讨,并对培养基模拟灌装试验设计时存在的问题给出建议,为进一步提高无菌制剂企业培养基模拟灌装试验能力和无菌保障水平提供参考。

培养基模拟灌装试验的结果观察与样品管理

分析了培养基模拟灌装试验的培养结果,对模拟灌装试验异常结果的调查内容与样品管理进行了初步探讨,以评估模拟灌装试验结果对无菌产品生产结果评估的可靠性。

缩短培养基模拟灌装验证生产时间

培养基模拟灌装验证作为检验无菌生产线能否达到无菌保障水平的重要验证,公司所有无菌冻干粉针剂车间每半年必须进行一次验证,在验证结果合格的基础上,通过不断总结,改进,积累培养基模拟灌装验证的经验,优化验证方案,提高培养基模拟灌装验证的效率,不仅缩短了培养基模拟灌装验证的时间,也使验证过程更加合理与顺畅。故总结了培养基模拟灌装验证中常见问题的解决经验,以供参考。

浅谈培养基模拟灌装试验异常的分析及样品管理对策

在当前无菌药品生产当中,对于培养基模拟灌装试验提出了更高的要求,必须注重试验各环节的严格把控,以降低外界因素对试验结果造成的干扰,促进生产质量及水平的提升。针对试验内容及基本性质,我国制定了严格的操作标准和规范,有助于对试验过程加以科学指导,获得可靠的微生物培养结果。然而,在实践工作中往往会存在较多的异常问题,无法达到相关试验要求,导致其参考价值受到削弱。本文将对培养基模拟灌装试验的异常问题进行分析,提出培养基模拟灌装试验异常的处理措施,探索培养基模拟灌装试验样品管理的对策。

3株非酿酒酵母在模拟葡萄汁中的生长特性与发酵香气

在模拟葡萄汁培养基中以三种非酿酒酵母(葡萄汁有孢汉逊酵母、美极梅奇酵母、浅白隐球酵母)为实验对象,以酿酒酵母DV10为对照,研究三种非酿酒酵母的生长特性和发酵香气。结果表明:葡萄汁有孢汉逊酵母的生长特性最好,其次是美极梅奇酵母;不同酵母发酵模拟培养基共检测出74种与酵母代谢相关的挥发性化合物,其中醇类13种,酯类29种、酸类9种、醛酮类5种、萜烯类8种、苯环类6种和其他类4种;不同酵母菌发酵的培养基中的香气成分及含量差异明显,美极梅奇酵母产生的发酵香气浓度最高(206.27 mg/L),其中有玫瑰花香的苯乙醇(102.49 mg/L)对香气的贡献最大,另一重要香气物质为3-甲基丁醇(86.65 mg/L);浅白隐球酵母典型的发酵香气为金合欢醇(0.13 mg/L),给葡萄酒带来柔和的甜香气;葡萄汁有孢汉逊酵母能够产生较为丰富的香气物质,典型的发酵香气为乙酸乙酯(5.86 mg/L)、乙酸-3-甲基丁酯(1.17 mg/L)、辛酸乙酯(25.01 mg/L)、辛酸-3-甲基丁酯(0.3 mg/L)、乙酸-2-苯乙酯(14.36 mg/L)、辛酸(1.96 mg/L)和香茅醇(0.21 mg/L),赋予葡萄酒复杂的果香和花香。在葡萄酒酿造中应用特定的非酿酒酵母进行发酵,可以用来生产有特定风味的葡萄酒。

戊唑醇对不同酿酒酵母模拟发酵过程中葡萄酒风味品质的影响

为探究葡萄酒中不同酿酒酵母作用下戊唑醇降解状况以及戊唑醇残留对不同酿酒酵母发酵过程风味品质的影响,在模拟葡萄汁培养基中添加戊唑醇标准溶液至2 mg/L,采用生产上常用的12种葡萄酒酿制酵母进行模拟酒精发酵处理,运用QuEChERS分析方法测定葡萄酒中的戊唑醇残留量,并利用电子鼻、电子舌及固相微萃取气相色谱-质谱技术(SPME-GC-MS)分析戊唑醇残留对葡萄酒风味品质的影响。结果表明:葡萄酒酿造中的酵母菌酒精发酵过程可促进戊唑醇的降解,但不同酿酒酵母对戊唑醇的降解效果不同,其中D254、RC212、BO213和AC菌株的降解作用较好,降解率在21%~23%之间;戊唑醇可显著改变酒精发酵过程产生的香气成分,严重抑制苯甲醇(苦杏仁味)的生成,从而破坏葡萄酒风味结构。在所测定12种酵母菌中,AC菌株在酒精发酵过程中风味物质的形成受戊唑醇影响最小。综上,建议葡萄酒酿造中可考虑选择酵母菌AC进行发酵。

无菌工艺模拟试验中存在的问题与对策

目的:了解企业在无菌工艺模拟试验中存在的问题,把握《无菌工艺模拟试验指南》技术要求,促进企业规范开展无菌工艺模拟试验,提高无菌药品的无菌保障水平。方法:统计分析2016-2018年山东省药品GMP认证中无菌工艺模拟试验开展情况,对缺陷项目进行分类归纳,并结合《无菌工艺模拟试验指南》的要求提出解决对策。结果:无菌工艺模拟试验中的问题集中在培养与观察、最差条件选择、干预设计、记录、模拟介质评价、人员培训与操作6个方面。结论:建议企业关注灌装产品的培养与观察、合理设计最差条件和干预、充分评价模拟介质、重视人员培训与操作,确保规范开展无菌工艺模拟试验。

某制药车间无菌工艺模拟试验研究

目的 分析在工艺、物料、设施、设备和人员确定的条件下,某制药车间生产无菌产品的能力,并识别生产过程中的薄弱环节。方法 根据国家药品监督管理局发布指南中提出的无菌工艺模拟(APS)试验“最差条件”,在正常工作条件边缘下对工艺条件进行APS试验设计,并完成培养基模拟灌装试验。结果 APS试验包括无菌培养基配制、无菌培养基灌装、冻干压塞、轧盖、培养与检查、促生长试验、环境监测、模拟灌装后清洗等步骤。在此条件下,灌装完成的产品均无微生物生长;对培养14 d后的样品进行微生物促生长试验,科氏葡萄球菌、滕黄微球菌、坚强芽孢杆菌、胶红酵母菌、奥斯陆莫拉氏菌和耐盐枝孢菌均生长良好。结论 制药车间的日常无菌灌装工艺、环境、洁净室操作人员的无菌操作技术等的规范,有助于保障生产药品的质量和无菌性。

无菌工艺模拟试验方案设计探讨

各国GMP及PDA技术报告早已推行无菌工艺模拟试验。结合法规要求,从培养基模拟灌装方案的设计,风险评估工具,前提条件确认,模拟介质选择,灌装批次与数量,容器装量,最差条件选择,环境监测频率,目检,培养与观察,促生长试验、操作记录、总结报告等方面进行分析,并结合实例探讨西林瓶生产线无菌工艺模拟试验的策略,以提高生物制药行业非最终灭菌产品的无菌保障水平。

腐败发酵蔬菜中产膜醭细菌的分离鉴定及其生长特性分析

以发酵蔬菜为研究对象,分离和鉴定其中形成腐败膜醭的主要微生物,并分析其生长特性。利用胰蛋白胨大豆琼脂培养基分离培养发酵蔬菜腐败膜醭中的微生物,挑取50株单克隆回接到发酵盐卤胰蛋白胨培养基中培养,将能够在培养液表面显著形成膜醭的菌株进行16S rDNA或18S rDNA分子生物学鉴定。结果表明这6株菌均为细菌,分别为枯草芽孢杆菌、弗氏柠檬酸杆菌、科氏葡萄球菌科氏亚种、普罗威登斯菌、克雷伯氏杆菌属和阴沟肠杆菌。利用5种发酵蔬菜模拟培养基培养上述6株细菌,发现不同菌株在不同培养基中产膜醭情况不同。枯草芽孢杆菌和科氏葡萄球菌科氏亚种除了能形成膜醭外,还能引起培养基pH值升高,并对氮源需求不高。克雷伯氏杆菌属和普罗威登斯菌仅在发酵盐卤胰蛋白胨培养基和发酵蔬菜汁胰蛋白胨培养基中形成膜醭。上述细菌可能是发酵蔬菜腐败膜醭形成的关键细菌和潜在威胁。

新版GMP中对无菌工艺验证要求的探讨

简述了新版GMP对无菌工艺验证提出的具体要求、无菌工艺验证的目的和方法,介绍了培养基模拟灌装试验方案的设计、实施,并对试验结果进行了分析。

基于风险评估的吹灌封无菌工艺的验证

结合多年吹灌封设备设计制造的经验,从吹灌封无菌生产工艺出发,结合GMP对验证的相关要求,基于风险评估的方法,从吹灌封设备应用的角度对吹灌封无菌工艺的验证做系统的分析和总结。

重组戊型肝炎疫苗的无菌生产工艺验证

采用胰酪胨大豆肉汤培养基进行模拟灌装,对灌装后的注射器进行培养,根据注射器内培养基的污染情况,评估现行重组戊型肝炎疫苗无菌生产工艺的有效性。结果表明:灌装后的注射器经培养均未出现培养基污染,现行重组戊型肝炎疫苗的无菌生产工艺可确保产品的无菌性。