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日本血吸虫模拟短肽诱导小鼠的免疫保护性研究 被引量:3
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作者 王敏 易新元 +2 位作者 曾宪芳 李先平 周东明 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期338-341,共4页
目的 研究日本血吸虫模拟短肽对小鼠的免疫保护效果 ,预测其在抗血吸虫感染中的作用。 方法 用粗提纯大鼠血清IgG为配基对噬菌体肽库进行 3轮免疫学筛选。随机挑取噬菌体克隆 ,检测其特异性并进行序列分析 ;用阳性克隆免疫小鼠 ,以 ... 目的 研究日本血吸虫模拟短肽对小鼠的免疫保护效果 ,预测其在抗血吸虫感染中的作用。 方法 用粗提纯大鼠血清IgG为配基对噬菌体肽库进行 3轮免疫学筛选。随机挑取噬菌体克隆 ,检测其特异性并进行序列分析 ;用阳性克隆免疫小鼠 ,以 4 0条日本血吸虫尾蚴攻击感染 ,感染后 4 2d剖杀取虫 ,计算减虫率和减卵率 ;用ELISA测定免疫鼠抗体反应。 结果 经过 3轮筛选 ,特异性噬菌体得到有效富集 ;自动测序仪测序获得 2个模拟肽分子 ;将其用于免疫小鼠后 ,各免疫组与对照组相比 ,2个模拟肽混合免疫组的减虫率为 34.9% (P <0 .0 5) ,肝内减卵率为 6 7.6 %(P <0 .0 0 1 )。 2个模拟肽分子分别免疫小鼠 ,各组的减虫率为 31 .0 % (P <0 .0 5)和 1 4 .5% (P >0 .0 5)及肝内减卵率为 6 1 .2 % (P <0 .0 0 1 )和 35.7% (P <0 .0 5)。ELISA检测其免疫组鼠血清特异性IgG抗体滴度均大于 1∶6 40 0以上。 结论 利用噬菌体表面呈现技术获得的 展开更多
关键词 日本血吸虫 模拟短肽 小鼠 免疫保护 噬菌体库技术
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噬菌体表达短肽模拟脂多糖类脂A表位的研究 被引量:9
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作者 鲍永利 富宁 +2 位作者 杨贵贞 于春雷 王莉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期49-51,共3页
目的:得到拟类脂A的六肽。方法:用抗类脂A的单克隆抗体筛选噬菌体随机六肽库,经四轮筛选后进行ELISA检测,用得到的15个阳性克隆分别免疫小鼠,并将使小鼠产生抗LPS抗体的10个克隆进行测序,将保守序列进行肽合成。结... 目的:得到拟类脂A的六肽。方法:用抗类脂A的单克隆抗体筛选噬菌体随机六肽库,经四轮筛选后进行ELISA检测,用得到的15个阳性克隆分别免疫小鼠,并将使小鼠产生抗LPS抗体的10个克隆进行测序,将保守序列进行肽合成。结果:得到保守序列为LysPheSerSerArg,即KFSSRX。固相合成此小肽可与其1B6抗体结合,且此结合可被LPS抑制。 展开更多
关键词 脂多糖 模拟短肽 噬菌体
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用噬菌体展示技术筛选日本血吸虫免疫原的模拟短肽 被引量:7
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作者 王敏 易新元 +6 位作者 曾宪芳 周东明 张顺科 章洁 李忠杰 王庆林 袁仕善 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期295-298,共4页
目的 从噬菌体随机 12肽库免疫筛选出大鼠对血吸虫天然抗性的模拟靶表位 ,探讨其抗日本血吸虫的免疫保护效果。方法 用粗提大鼠血清IgG作固相配体筛选噬菌体 12肽库 ,按吸附 洗脱 扩增的淘洗过程进行 3轮筛选 ;随机挑取噬菌体克隆用E... 目的 从噬菌体随机 12肽库免疫筛选出大鼠对血吸虫天然抗性的模拟靶表位 ,探讨其抗日本血吸虫的免疫保护效果。方法 用粗提大鼠血清IgG作固相配体筛选噬菌体 12肽库 ,按吸附 洗脱 扩增的淘洗过程进行 3轮筛选 ;随机挑取噬菌体克隆用ELISA检测其特异性 ,并对其中的 2个克隆进行测序 ;用混合噬菌体克隆免疫小鼠 3次 ,分别在 0、1、3周进行 ,第 5周每鼠经腹部感染 4 0± 1条日本血吸虫尾蚴 ,4 5d后剖杀冲虫 ,计虫数及肝卵数。结果 经 3轮筛选 ,特异性结合噬菌体富集增加了 2 0 0多倍 ,随机挑取 2 0个噬菌体克隆经ELISA鉴定 ,有 19个克隆能与大鼠血清呈特异性反应。自动测序仪测序的 2个克隆的序列与GenBank的已知序列无同源性。与对照组相比 ,混合噬菌体克隆免疫小鼠的减虫率为 33.6 % ,减卵率为 5 9.8%。结论 利用噬菌体展示技术可获得天然抗血吸虫抗性的短肽 。 展开更多
关键词 日本血吸虫 模拟短肽 免疫筛选 噬菌体随机
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日本血吸虫雌虫抗原模拟表位的筛选及免疫保护性 被引量:4
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作者 王林纤 蔡春 +3 位作者 易新元 曾宪芳 唐连飞 罗永慧 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2004年第2期110-113,共4页
目的 筛选日本血吸虫雌虫抗原的模拟表位 ,并探讨其抗日本血吸虫的免疫保护效果。 方法 用日本血吸虫雌虫免疫兔血清IgG作配体对噬菌体随机 12肽库进行 3轮亲和筛选 ,随机挑取 18个噬菌体克隆用Dot ELISA检测其特异性 ,并对其中的 4... 目的 筛选日本血吸虫雌虫抗原的模拟表位 ,并探讨其抗日本血吸虫的免疫保护效果。 方法 用日本血吸虫雌虫免疫兔血清IgG作配体对噬菌体随机 12肽库进行 3轮亲和筛选 ,随机挑取 18个噬菌体克隆用Dot ELISA检测其特异性 ,并对其中的 4个阳性克隆进行测序。分别在 0、2、4周用混合噬菌体克隆免疫小鼠 3次 ,第 6周每鼠经腹部感染 40条日本血吸虫尾蚴 ,42d后剖杀冲虫 ,计数虫数和每克肝卵数。 结果 经 3轮筛选 ,特异性噬菌体富集了 2 0 0多倍 ,随机挑取的 18个克隆经Dot ELISA鉴定有 17个能与雌虫抗原免疫兔血清呈阳性反应。DNA自动测序的 4个序列与GenBank的已知序列均无同源性。与对照组相比 ,混合噬菌体克隆免疫小鼠的减虫率为 2 6.5 7% ,减卵率为 65 .3 4%。 结论 采用噬菌体随机肽库技术可获得模拟日本血吸虫雌虫特异性抗原表位的短肽分子 ,这些短肽分子能诱导一定程度的保护性免疫。 展开更多
关键词 血吸虫 日本 模拟短肽 噬菌体随机 免疫筛选
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噬菌体表达短肽模拟日本血吸虫肝门型童虫表膜抗原表位的研究 被引量:2
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作者 王敏 易新元 +4 位作者 曾宪芳 周东明 袁仕善 张顺科 章洁 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期862-865,共4页
目的 从噬菌体随机 12肽库免疫筛选日本血吸虫肝门型童虫表膜抗原 (SjHmAg)的模拟短肽分子 ,探讨其抗日本血吸虫的免疫保护效果。方法 以纯化的SjHmAg免疫血清IgG为配基免疫筛选噬菌体 12肽库 ,按吸附 洗脱 扩增的淘洗过程进行 3轮筛... 目的 从噬菌体随机 12肽库免疫筛选日本血吸虫肝门型童虫表膜抗原 (SjHmAg)的模拟短肽分子 ,探讨其抗日本血吸虫的免疫保护效果。方法 以纯化的SjHmAg免疫血清IgG为配基免疫筛选噬菌体 12肽库 ,按吸附 洗脱 扩增的淘洗过程进行 3轮筛选 ;随机挑取噬菌体克隆用ELISA检测其特异性 ,并测序 ;用混和噬菌体克隆皮下免疫小鼠 3次 ,分别在 0、2、4周进行 ,第 6周每鼠经腹部感染 4 0± 1条日本血吸虫尾蚴 ,4 2d后剖杀冲虫 ,观察减虫及减卵效果。结果 经 3轮筛选 ,特异性噬菌体得到有效的富集 ,产出率为第一轮的 2 10倍 ;随机挑取 2 4个噬菌体克隆经ELISA鉴定 ,有 2 1个克隆能与SjHmAg免疫血清特异性反应 ;自动测序仪测序 ,结果发现它们的外源肽具核心序列 (STRKD) ;与对照组相比 ,混和噬菌体克隆免疫小鼠的减虫率为 16 .2 % ,减卵率为 5 9.0 %。结论 利用噬菌体展示技术可获得模拟SjHmAg短肽 ,这些短肽分子能诱导部分抗日本血吸虫保护力。 展开更多
关键词 日本血吸虫肝门型童虫 表膜抗原 表位 模拟短肽 免疫筛选 噬菌体随机
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利用噬菌体肽库筛选TNF-α表位的相关短肽 被引量:8
6
作者 叶飞 姜小丹 +4 位作者 李卓娅 龚非力 徐勇 冯玮 熊平 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期366-370,共5页
目的 从噬菌体肽库筛选TNF α相关短肽 ,为临床上治疗肿瘤奠定基础。方法 用可溶性TNF受体Ⅰ (sTNFRⅠ )筛选噬菌体随机 12肽库 ,利用细胞毒效应进行生物学效应筛选 ,再进行单链DNA测序。结果 分别得到若干模拟跨膜型TNF α(TM TNF ... 目的 从噬菌体肽库筛选TNF α相关短肽 ,为临床上治疗肿瘤奠定基础。方法 用可溶性TNF受体Ⅰ (sTNFRⅠ )筛选噬菌体随机 12肽库 ,利用细胞毒效应进行生物学效应筛选 ,再进行单链DNA测序。结果 分别得到若干模拟跨膜型TNF α(TM TNF α)和模拟分泌型TNF α(S TNF α)细胞毒效应的短肽 ,选择细胞毒效应最好的模拟TM TNF α短肽进行人工合成 ,体外实验显示此肽段对S TNF α耐受肿瘤细胞系HL 6 0具有明显细胞毒效应 ,且主要引起靶细胞凋亡。另外 ,利用激光共聚焦显微镜证实该合成肽段不能诱导NF κB发生核转位。结论 获得模拟TM TNF α的短肽 ,为TM TNF α用于临床抗瘤治疗提供新线索。 展开更多
关键词 噬菌体 跨膜型TNF-Α 模拟短肽 细胞毒效应 细胞凋亡 肿瘤治疗 免疫疗法 肿瘤坏死因子-α
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Selection of the Mimic Epitopes of Antigens from Schistosoma japonicum by Using Phage Display Techniques 被引量:1
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作者 王敏 易新元 +4 位作者 曾宪芳 李先平 周东明 张顺科 章洁 《Journal of Microbiology and Immunology》 2003年第1期91-94,共4页
To obtain short peptides simulating antigenic epitopes related to natural resistance against Schistosoma japonicum (S.j) in rats, and to explore their immune protection against S.j in mice, phage random peptide librar... To obtain short peptides simulating antigenic epitopes related to natural resistance against Schistosoma japonicum (S.j) in rats, and to explore their immune protection against S.j in mice, phage random peptide library of 12 amino acids were screened with purified IgG from normal rat sera. Positive clones that were obtained after three rounds of biopanning were detected by ELISA, and two of them were sequenced. Kunming mice were immunized with mixed phage clones. Each mouse was challenged with 40±1 S.j cercariae, and all mice were perfused 45 days post-challenge. The worms and the liver eggs were counted. The results were that the specific phages binding to IgG were enriched 300 folds after three rounds of biopanning. Twenty clones were detected by ELISA and 19 of them bound to the specific IgG of rat sera. The sequence of two clones revealed no homology with other sequences in the GenBank. Compared with the control groups, the reduction rates of the worm burden and liver egg were 33.6% and 59.8%, respectively. It was concluded that the specific peptides, which simulate antigenic molecules correlated with natural resistance to S.j in rats could be obtained by immunosceening phage random peptide library and a protective immunity against S.j can be detected by these epitopes in mice. 展开更多
关键词 噬菌体 日本血吸虫 免疫原 模拟短肽 模拟抗原 抗原 免疫抑制剂 免疫性
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Selection of Immunogenic Peptide Mimics of Male Worm Origin of Schistosoma Japonicum using Phage Display Peptide Library
8
作者 陈欲晓 易新元 +4 位作者 曾宪芳 王林纤 唐连飞 章洁 Mcreynolds Larry 《Journal of Microbiology and Immunology》 2004年第1期66-69,共4页
To select the immunogenic short peptide mimics of male worm origin of Schistosoma japonicum (Sj) and to explore their protection effect against schistosomiasis in mice, the random phage display peptide library of 12-m... To select the immunogenic short peptide mimics of male worm origin of Schistosoma japonicum (Sj) and to explore their protection effect against schistosomiasis in mice, the random phage display peptide library of 12-mer was screened with IgG to soluble male worm antigen of Sj, and the specific positive clones selected through three rounds of screenings were detected by Dot-ELISA, and then injected subcutaneously into mice for vaccination and protection assessment against Sj. It was found that 18 randomly picked phage displayed clones all showed definite antigenicity with various intensities. The pooled phages displayed clones could induce production of specific antibodies and cause 31.72% of worm reduction rate and 51.54% of egg reduction rate in mice, revealing a significant difference (P<0.001) in comparison with those of the controls. It concludes that the short peptide mimics of male worm origin of Sj obtained by affinity screening phage display peptide library can elicit partial protection against this pathogen. 展开更多
关键词 噬菌体 展示技术 筛选方法 日本血吸虫 雄虫源性 免疫学 模拟短肽 免疫原
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