HCBP6模拟磷酸化重组质粒的构建与亚细胞定位

目的构建HCBP6及HCBP6不同位点模拟磷酸化的绿色荧光蛋白重组质粒,明确其亚细胞定位。方法以构建含有570 bp的HCBP6外显子基因的绿色荧光蛋白重组质粒为基础,应用快速定点突变技术构建HCBP6不同位点模拟磷酸化的重组质粒。将重组质粒测序并进行序列比对。利用jetPRIME转染体系将HCBP6及HCBP6不同位点模拟磷酸化的重组质粒转染至细胞中,应用Real-Time PCR技术检测目的基因mRNA的表达,应用Western blot技术检测目的基因蛋白表达,应用荧光显微镜观察HCBP6不同位点磷酸化质粒的亚细胞定位。结果将测序的重组序列与目的基因进行比对,发现重组序列与目的基因完全一致,说明HCBP6不同位点模拟磷酸化的重组质粒构建成功。Real-Time PCR和Western blot表明,与对照组相比,实验组高表达HCBP6及HCBP6不同位点模拟磷酸化的基因。免疫荧光显微镜可见10Ala主要在细胞质表达,WT、10Asp、151Ala、151Asp主要在细胞核表达。结论构建的HCBP6及HCBP6不同位点模拟磷酸化的重组质粒可成功转染细胞并在细胞中高表达,HCBP6不同位点磷酸化质粒亚细胞定位不同。

磷酸盐在大连湾时空分布的数值模拟研究

大连湾由于接受附近大量的工业和生活废水造成海域严重污染.影响大连湾水质的主要污染物之一为总磷.为此应用数值模型对磷酸盐的时空分布进行了模拟研究.验证的模型结果较好地再现了磷酸盐的时空变化.模拟结果显示,在空间分布上,磷酸盐集中在排污口附近区域,最大值出现在15#监测点上;随季节变化,在夏季磷酸盐浓度最低为0.011m g/L,4月份达到高峰值0.22 m g/L.陆源废水排放位置是影响磷酸盐浓度空间分布的主要因素.由模型计算结果得出的磷酸盐时空变化规律有助于大连湾海岸区域水质污染防治.

浓缩湿法磷酸中的杂质对其流变性能的影响

浓缩湿法磷酸中存在大量的杂质离子,它们对浓缩磷酸的黏度和密度有着交互影响。通过模拟浓缩磷酸的组成,采用三因素二次回归正交设计的方法来考察Fe,Mg,Al等杂质离子对磷酸黏度的影响。结果表明:当杂质相对质量分数小于3.1%时Al对浓缩磷酸黏度影响最大,当杂质相对质量分数大于3.1%时,Mg对浓缩磷酸黏度影响最大;并得出杂质质量分数与磷酸黏度关系的数学模型,模型检验所得误差为7.37%,对实现浓缩湿法磷酸的管道输送提供一定参考价值。

苯氧乙酸类PTP1B抑制剂的设计、合成及活性研究

蛋白酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phosphatase, PTP) 1B是治疗2型糖尿病的潜在靶点。已知的PTP1B抑制剂多数为磷酸酪氨酸(pTyr)模拟物。本文以苯氧乙酸片段模拟pTyr,设计合成了苯氧乙酸类化合物2a~2g和3a~3c。其中,化合物2a~2g对PTP1B具有显著的抑制活性,化合物2g对PTP1B的IC_(50)值达到0.42μmol·L^(-1)。化合物2f可提高胰岛素抵抗(IR)小鼠的胰岛素敏感性,并降低其血总胆固醇水平,与胰岛素增敏剂罗格列酮的作用类似。上述研究结果提示PTP1B抑制剂可能对2型糖尿病及其并发症具有综合治疗作用。

丙二酸类PTP1B抑制剂的设计、合成及活性研究

蛋白酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phosphatase,PTP)1B是治疗2型糖尿病(T2DM)及肥胖症的潜在靶点。磷酸酪氨酸(pTyr)是PTP1B去磷酸化作用的底物,本文以丙二酸基团模拟pTyr分子中的磷酸酯,设计合成了丙二酸类PTP1B抑制剂1～7。抑酶活性评价显示,化合物3和4对人重组PTP1B的半数抑制浓度IC50分别为7.66和1.88μmol.L-1。