蚕蛹蛋白和蚕蛹短肽的模拟胃肠道消化特性研究

研究了蚕蛹蛋白和蚕蛹短肽的氨基酸组成,并分析了其在模拟胃肠道消化过程中的消化特性和氮释放量,探究蚕蛹蛋白和短肽在人类营养支持方面的应用。使用自动氨基酸分析仪测定蚕蛹蛋白和蚕蛹短肽的氨基酸含量,并计算氨基酸评分(AAS)、化学评分(CS)和必需氨基酸指数(EAAI)。蚕蛹蛋白和蚕蛹短肽的消化特性和氮释放量通过体外模拟胃肠道消化实验和凯氏定氮法进行评价的计算。结果表明,蚕蛹蛋白和蚕蛹短肽含有人体所需的18种氨基酸,而且必需氨基酸的组成合理。蚕蛹蛋白和蚕蛹短肽在体外模拟胃肠道消化实验中有良好高效的消化率和较高的氮释放量(约90%)。因此在今后将蚕蛹蛋白和蚕蛹短肽作为优质且经济的蛋白质原料,在动物饲料和人类肠内营养支持制剂方面有巨大的应用潜力。

泰和乌骨鸡肉模拟胃肠道消化液中ACE抑制肽的分离纯化及结构鉴定

研究泰和乌骨鸡肉在胃肠道消化过程中的降血压活性,并鉴定出其中确定具有降血压活性的肽序列。采用体外模拟胃肠道消化法,测定了不同阶段消化液对血管紧张素I转化酶(ACE)的抑制作用,并选择其中的小肠道消化液,对其进行超滤、制备型反相高效液相色谱、凝胶柱色谱分离纯化,最后通过HPLC/Q-TOF MS鉴定出一种新型ACE抑制肽G lu-Pro-Leu-Tyr-Tyr。

基于反相液相色谱-串联质谱的鹿茸模拟胃肠道消化的肽谱及生物活性研究

利用反相液相色谱-串联质谱(Reversed phase liquid chromatography-tandem mass spectrometry,RPLCMS/MS)对鹿茸蛋白经过模拟消化的肽谱进行分析,同时考察了消化产物的体外活性。从鹿茸水提物(Antler aqueous extract,AAE)、鹿茸水提物消化产物(Aqueous extract digest,AED)和鹿茸的粉末消化产物(Powder digest,PD)中分别鉴定到23、417和389条肽段,其中源于胶原蛋白的肽分别有15、146和75条。以血管紧张素转换酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)、二肽基肽酶IV(Dipeptidyl peptidase IV,DPP-IV)、脯氨酰内切酶(Prolyl endopeptidase,PEP)抑制活性和抗氧化活性为指标考察AAE、AED和PD的体外生物活性,发现其活性强弱关系为AAE<AED<PD。结果表明,经过模拟消化后,AED释放出更丰富的胶原蛋白肽,而PD具有更好的生物活性,说明食用鹿茸粉末和鹿茸水提物互为补充,各具优势。

克氏原螯虾虾头模拟胃肠道消化产物中ACE抑制肽的分离纯化与鉴定

为了从克氏原螯虾虾头模拟胃肠道消化产物中制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽,以克氏原螯虾虾头为原料,采用体外模拟肠胃道消化的方法对其进行酶解,以体外ACE抑制率为指标,通过超滤、凝胶色谱、离子色谱、反向高效液相色谱相结合的方法对克氏原螯虾虾头模拟胃肠道消化产物进行分离纯化与筛选,以期获得纯度较高的ACE抑制肽,并利用电喷雾静电场离子阱串联质谱对其氨基酸序列进行测定,结果表明,克氏原螯虾虾头模拟胃肠道消化产物中ACE抑制肽主要分布在分子质量低于3 000 u的超滤组分中;经过分离纯化鉴定得到1个新型ACE抑制肽,其分子质量为225 u,肽序列为Pro-Val,半数抑制浓度IC50值为0. 11 mg/m L,与模拟消化产物相比,ACE抑制肽的IC50值纯化了16. 72倍。

基于模拟胃肠道消化的云南民族乳制品蛋白肽研究

乳扇、乳饼和奶渣是云南民族传统乳制品,具有历史悠久、特色鲜明、蛋白质含量高等特点。本研究基于模拟胃肠道消化,采用液相色谱-串联质谱、氨基酸分析仪研究乳扇、乳饼和奶渣的肽谱及游离氨基酸含量,并借助蛋白肽数据库分析潜在的生物活性肽。结果表明,乳扇蛋白肽221条,分子质量集中在500~750 Da,潜在的功能活性肽包括血管紧张素转化酶抑制肽5条、免疫调节肽4条、抗氧化肽3条,抗血栓肽2条和抗菌肽1条。乳饼蛋白肽225条,分子质量集中在750~1000 Da,功能活性肽包括抗氧化肽2条。奶渣蛋白肽222条,分子质量集中在750~1000 Da,功能活性肽包括免疫调节肽2条、抗氧化肽2条和抗血栓肽1条。3种乳制品中的蛋白肽主要源于β-和α-酪蛋白。乳扇、乳饼和奶渣经模拟消化液消化后其游离氨基酸含量分别为9.45、10.7 g/100 g和9 g/100 g,其中,中性氨基酸含量最高,其次依次为碱性氨基酸和酸性氨基酸。本研究揭示了乳扇、乳饼和奶渣的生物学价值,可为功能活性产品的研发提供科学依据。

卵白蛋白体外模拟胃肠道消化产物的抗氧化活性及其结构表征

为探究蛋白经体外模拟胃肠道消化后消化产物的抗氧化活性变化规律,以卵白蛋白为研究对象,测定消化产物的体外抗氧化活性,然后利用H2O2构建Caco-2细胞氧化损伤模型,测定细胞存活率、活性氧(ROS)水平,探究消化产物的细胞抗氧化活性。利用电喷雾轨道阱串联质谱鉴定抗氧化活性最强组分(分子质量<1 ku的产物)的抗氧化肽。结果表明:卵白蛋白经体外模拟胃肠道消化后,产物的体外抗氧化活性增强并具有浓度依赖性。其组分分子质量越小,抗氧化活性越强。分子质量<1 ku的产物具有最强的抑制细胞氧化损伤和清除活性氧能力。质谱鉴定出的3条肽序列均具有较强的抗氧化活性,序列分别为CFDV、CVSP和MPFR。以上结果显示,体外模拟胃肠道消化对卵白蛋白消化产物的抗氧化活性提高以及抗氧化活性肽段的释放具有积极作用。

模拟胃肠道消化过程中迷迭香提取物总酚及抗氧化活性变化

本文研究了迷迭香提取物在模拟胃肠道消化过程中总酚含量及抗氧化活性的变化规律,并对其总酚含量变化与抗氧化活性进行相关性分析。结果表明,迷迭香提取物消化产物中总酚含量随模拟胃消化时间的延长而升高,而在模拟肠消化过程中显著降低(P<0.05)。经模拟胃消化180 min后,总酚含量显著升高了17.88%(P<0.05),而经模拟肠消化120 min后,总酚含量显著降低了19.64%(P<0.05)。经模拟胃消化180 min,消化产物对DPPH·和超氧阴离子自由基的清除能力分别显著提高了20.36%和22.07%(P<0.05),铁还原能力(Ferric ion reducing antioxidant power,FRAP)显著提高了11.76%(P<0.05)。而经模拟肠消化120 min后,消化产物对DPPH·和超氧阴离子自由基的清除能力分别显著降低了74.08%和50.00%(P<0.05),FRAP显著降低了52.13%(P<0.05)。此外,迷迭香提取物消化产物的抗氧化活性与其总酚含量之间存在良好的正相关性。以上结果表明,模拟胃肠道消化过程显著影响迷迭香多酚的含量和抗氧化活性。

模拟胃肠道消化对大豆低聚肽结构及抗氧化作用的影响

大豆低聚肽是一种有益健康的功能性配料,所呈现的健康益处高度依赖于肽结构。采用紫外全波长扫描法及圆二色光谱法分析其结构是如何受胃蛋白酶、胰蛋白酶以及先胃蛋白酶后胰蛋白酶处理的影响。为探讨消化处理前、后大豆低聚肽抗氧化能力的变化规律,分别计算消化前、后大豆低聚肽的ABTS自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、氧自由基吸收能力(ORAC)和铁离子还原能力(FRAP)。结果显示:大豆低聚肽主要为分子质量<1000 u的组分,经胃蛋白酶、胰蛋白酶及先胃蛋白酶后胰蛋白酶处理后<1000 u的组分比例最大可达88.46%。在波长275 nm处均有最大吸收峰。二级结构中,4组大豆低聚肽中无规则卷曲所占比例均为30%左右,约占总二级结构组成的1/3,表明了大豆低聚肽无序性较高且结构疏松开放。大豆低聚肽的ABTS自由基清除能力和铁还原能力稳定性均较好。经胰蛋白酶消化后,DPPH自由基清除率有所降低,氧自由基吸收能力极显著提高(P<0.01)。

体外模拟胃肠消化过程中云南金花茶抗氧化能力变化

为探究云南金花茶在消化过程中总黄酮、总多酚释放及功能活性的变化情况,该研究采用体外模拟胃肠消化模型测定了云南金花茶消化液中总黄酮、总多酚浓度及自由基清除能力、铁离子还原能力和脂质过氧化抑制能力,并对其进行了相关性分析。结果表明,模拟胃消化过程中,云南金花茶总黄酮、总多酚含量均比口腔消化高,最高分别达229.99、327.65µg/mL,经肠消化后,总黄酮含量在38.56~78.88µg/mL之间,总多酚含量在30.04~65.52µg/mL之间,含量较低。在功能活性测定中,较口腔消化,胃消化阶段的DPPH·、ABTS+·清除能力和铁离子还原能力显著升高,脂质过氧化抑制能力随消化的进行呈上下波动;经肠消化后,DPPH·、ABTS+·清除能力和铁离子还原能力急剧下降,且均比胃消化阶段低,而脂质过氧化抑制能力则趋于平稳或逐渐上升。通过相关性及主成分分析,各指标之间存在一定的关联性。综上所述,云南金花茶是较好的活性物质来源,该研究可为探索云南金花茶在人体消化过程中活性物质的变化及作用机制提供一定的实验基础和新思路。

豆渣及其胃肠道模拟消化产物的物化特性和抗氧化力分析

为比较分析豆渣原料和胃肠道模拟消化产物的物化特性和抗氧化力,为制备新型食品添加剂提供一定的理论数据支持。本实验以热风干燥豆渣为原料,模拟人体胃肠道消化环境得到不可消化部分(Indigestible Fraction,IF),并对其基本营养成分、物化特性、多酚含量及抗氧化力进行分析。结果表明,豆渣含IF 90.64%,而其中IF中膳食纤维含量为56.54%。此外,与热风干燥豆渣相比,IF的持水力、持油力和结合水力等在25℃和37℃下均有所提高,抗氧化力也显著增强。在多酚含量方面,豆渣中缩合单宁的含量较高,而IF中则是水解多酚含量占比较高。这表明IF可作为一种富含大量优质膳食纤维、能开发具有抗氧化功能性食品的潜在来源。

浒苔模拟肠胃液消化水解液中血管紧张素转化酶抑制肽的分离纯化与鉴定

为从浒苔模拟胃肠道消化产物中制备血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制肽,并鉴定其结构,该研究以浒苔为原料,模拟肠胃液消化条件对其进行水解,以体外ACE抑制率为指标,并采用超滤、凝胶色谱、离子色谱和反向色谱对浒苔模拟肠胃消化水解液进行分离纯化和筛选,以期获得纯度较高的ACE抑制肽,同时采用高效液相-四级杆飞行时间串联质谱对ACE抑制肽的氨基酸序列进行分析鉴定。结果表明,浒苔模拟肠胃液消化水解液中的ACE抑制活性肽主要分布在<3000 u的超滤组分中,经分离纯化筛选得到一种新型ACE抑制肽,其分子质量为348.1 Da,肽序列为Leu-Tyr,半数抑制浓度IC_(50)值为(0.12±0.01)mg/mL,与模拟消化产物相比,ACE抑制肽的IC_(50)值纯化了11.17倍。该研究利用浒苔模拟肠胃液消化水解液制备ACE抑制肽,可以为浒苔的高值化利用提供理论参考。

生物解离大豆蛋白酶解物体外模拟消化抗氧化活性变化

挤压膨化大豆在生物解离过程中,通过酶解(碱性蛋白酶、风味蛋白酶)产生的大豆蛋白酶解物(soybean protein hydrolysate,SPH)有良好的抗氧化活性,因此,需要探索模拟胃肠道(gastrointestinal,GI)消化对蛋白酶解物抗氧化活性的影响。分别以蛋白酶(碱性蛋白酶、风味蛋白酶)酶解得到的SPH和经过模拟GI消化后的产物作为研究对象,采用水解度、氨基酸组成、分子质量分布、氧化自由基吸收能力(oxidative radical absorption capacity,ORAC)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力及2,2’-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2’-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt,ABTS)阳离子自由基清除能力对样品抗氧化活性进行分析。结果显示:相对于风味蛋白酶酶解,采用碱性蛋白酶进行酶解时抗氧化活性更高;但是经过模拟GI消化后,风味蛋白酶酶解得到的SPH抗氧化活性更高,ORAC为69.15μmol/mg、DPPH自由基清除能力为27.29%、ABTS阳离子自由基清除能力为56.21%,肽的相对含量更高,为75.86%,并且肽中具有抗氧化活性的氨基酸含量更高,分子质量小于1 kDa的肽相对含量最高,为17.35%。

猴头菇多糖对胃肠道益生菌生长的影响

胃肠道益生菌群具有促进食物消化和营养吸收、改善肠道微生态平衡,增强机体免疫力等作用。为明确猴头菇多糖对胃肠道益生菌生长的影响,本研究通过在培养基中添加0.3%、0.5%、0.7%的猴头菇多糖,用平板菌落计数法检测保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)、青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)3种胃肠道益生菌的生长情况。接着通过体外模拟人胃和肠道环境试验,分析猴头菇多糖对这3种菌在胃肠道模拟环境中的生长影响。结果显示:与未添加猴头菇多糖的培养基相比,随着猴头菇多糖含量的增加,均能够显著促进保加利亚乳杆菌和青春双歧杆菌的生长(P<0.05),0.7%的猴头菇多糖添加量增殖效果最为明显;而随着猴头菇多糖含量逐渐增加,嗜热链球菌的生长量增速放缓,0.5%的猴头菇添加量即达到促进的最大值。7%的猴头菇多糖添加量能够显著增强保加利亚乳杆菌对胃液和肠液的耐受性(P<0.05),增强青春双歧杆菌对肠液的耐受性,显著增强嗜热链球菌对肠液的耐受性(P<0.05)。因此0.3%~0.5%的猴头菇多糖添加量可促进胃肠道益生菌的生长;7%的猴头菇多糖添加量可提高益生菌对胃肠道消化液的耐受力。

干热处理对黑麦麸理化性质及消化特性的影响

以黑麦麸为研究对象,探讨不同条件的干热处理对黑麦麸理化性质和营养消化特性的影响。以脂肪酶活力、植酸含量和游离多酚含量为考察指标,干热处理条件分别为110℃-12 min、130℃-9 min、150℃-6 min。黑麦麸的理化性质研究结果表明:干热处理后,黑麦麸的持水力和持油力显著提高(P<0.05);红外光谱特征吸收峰的整体峰形、位置并未发生明显改变,而强度有变化;游离酚类物质的含量提高,同时总酚和花色苷发生热降解,使总酚类物质和花色苷的含量降低。干热处理后黑麦麸多酚和黄酮的含量在胃肠道消化过程中出现不同程度的提高,抗氧化能力逐渐增强,110℃-12 min、130℃-9 min、150℃-6 min处理组的多酚生物可及性分别为73.26%、70.74%和74.44%,均显著高于未处理组(P<0.05)。110℃-12 min组的黄酮生物可及性为43.17%,显著高于未处理组(P<0.05)。研究旨在利用干热处理改善工业化生产中黑麦麸的营养品质,促进功能性黑麦麸产品的开发和利用。

黄原胶对体外模拟消化过程中4种竹叶黄酮生物可及性的影响

目的:竹叶碳苷黄酮在胃肠道消化过程中易于降解,导致其生物可及性低,因此,本研究拟探究黄原胶存在时,4种碳苷黄酮(异荭草苷、荭草苷、异牡荆素、牡荆素)在各模拟消化阶段生物可及性的变化情况。方法:利用体外模拟消化模型结合超高效液相色谱技术,分析在有/无黄原胶存在的条件下,竹叶提取物中4种碳苷黄酮质量浓度的变化情况。结果:相较于直接消化样品,添加黄原胶的样品可以明显减弱模拟消化过程中碳苷黄酮的降解;口腔、胃、肠道模拟消化对竹叶碳苷黄酮的生物可及性影响存在差异,黄原胶的加入可以明显提高4种碳苷黄酮,尤其是牡荆素和异牡荆素的生物可及性,模拟肠道消化后,黄原胶保护组的异牡荆素和牡荆素质量浓度分别降低了62%和59%,远低于直接消化组(分别降低84%和80%)。结论:黄原胶可以明显提升体外模拟消化过程中竹叶碳苷黄酮的生物可及性,对于相关功能产品的开发具有良好的应用价值。

迷迭香提取物对自由基诱导鱼肝油氧化及模拟消化过程中脂质氧化的抑制作用研究

该试验分别采用FeSO4/VC和偶氮二异庚腈[2,2'-azobis(2,4-di-methylvaleronitrile),AMVN]诱导鱼肝油氧化,研究迷迭香提取物对鱼肝油脂质氧化的抑制作用,同时测定迷迭香提取物在胃肠道消化过程中对鱼肝油氧化的抑制作用。结果表明:迷迭香提取物(终浓度为10μg/mL^500μg/mL)能够显著抑制FeSO4/VC和AMVN诱导的鱼肝油氧化(p<0.05);与FeSO4/VC和AMVN诱导鱼肝油氧化模型组相比,添加终浓度为500μg/mL的迷迭香提取物(rosemary extract,RE)可使丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量分别下降93.47%和60.16%。此外,经过模拟胃肠道消化后,迷迭香提取物同样能够抑制鱼肝油氧化,且抑制效果随其浓度的升高而增强。

乳酸菌发酵对四种杂豆蛋白凝胶及消化特性的影响

本研究对乳酸菌发酵的四种杂豆蛋白凝胶及消化特性进行研究,分别从鹰嘴豆、红芸豆、小扁豆、豌豆四种杂豆中进行蛋白提取,命名为CP、RKP、LP、PP。采用植物乳杆菌B1-6对制备的四种杂豆蛋白进行发酵,对发酵形成的杂豆蛋白凝胶最小凝胶浓度、质构特性、微观结构和色泽等进行了比较研究。将四种杂豆蛋白凝胶进行动态模拟胃肠道消化,对不同杂豆蛋白凝胶消化特性及对乳酸菌的保护作用进行了研究。结果表明:CP、RKP、LP、PP在乳酸菌作用下的最小临界凝胶浓度(LGC)分别为1.6%(w/v)、1.6%(w/v)、1.4%(w/v)和1.2%(w/v);CP与LP凝胶硬度显著高于RKP与PP凝胶(P<0.05),且形成的凝胶具有致密而均匀的三维蛋白凝胶网络,而RKP与PP形成的凝胶微观结构较为疏松。采用动态模拟胃肠道消化模型对具有不同结构特征的四种杂豆蛋白凝胶进行消化特性评估,CP和LP在消化早、中期的可溶性蛋白和肽含量显著高于另两组蛋白凝胶(RKP和PP),且CP和LP凝胶对植物乳杆菌B1-6的保护作用显著优于另两组蛋白凝胶。研究结果表明四种杂豆蛋白在乳酸菌发酵作用下表现出差异性胶凝能力及消化特性,为明确不同杂豆蛋白在乳酸菌作用下的发酵性能、凝胶特性及营养特性提供参考依据。

3种富含多糖面包的体外消化酵解特性

采用体外模拟胃肠消化模型,通过测定估计血糖生成指数(estimate glycemic index,eGI)、估计血糖负荷(estimate glycemic load,eGL)、淀粉水解率和淀粉组成,研究分别含有不同多糖面包的体外消化情况,并将它们与不含多糖面包和白面包进行比较。此外,对3种多糖面包的消化后产物分别用正常受试者和糖尿病患者粪便进行体外模拟大肠酵解,并以菊粉作为阳性对照,观察其在酵解过程中pH值的变化和糖消耗情况。结果表明,不含多糖面包、含魔芋面包、含瓜尔胶面包以及含燕麦β-葡聚糖面包的eGI分别为53.24、52.41、52.84、52.71,eGL分别为9.79、9.16、9.00、8.76,不含多糖面包的eGL显著高于3种多糖面包(P<0.05),并且相较于白面包,3种多糖面包均具有低淀粉水解率和高抗性淀粉相对含量;酵解过程中正常组和糖尿病组的pH值逐渐下降,消化产物中大量的不可消化糖类被微生物利用,糖消耗率均在72%以上,明显高于菊粉的糖消耗率。综上可以认为,3种多糖面包均属于低GI、低GL食物,有助于维持餐后血糖的稳定,在一定食用量范围内适合糖尿病患者食用。

罗非鱼鱼皮肽的体外ACE抑制活性、消化性及分子对接对比

【目的】分析罗非鱼鱼皮多肽LSGYGP的ACE抑制活性、胃肠道消化稳定性以及与降压药卡托普利在分子对接的对比。【方法】用HHL法测定多肽的IC50值和抑制模式,测定多肽在模拟胃肠道消化中的稳定性,MTT法检测细胞活力,Western blot法检测诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、环氧合酶-2(COX-2)、内皮素-1(ET-1)等蛋白表达情况,将多肽、卡托普利分别与ACE进行分子对接对比分析。【结果】LSGYGP的半抑制率(IC50)值为2.57μmol/L,表现为混合非竞争性抑制,4 h内模拟胃肠道消化较为稳定;MTT法验证多肽LSGYGP对HUVEC细胞无毒性作用(P> 0.05),且能明显提高Ang Ⅱ诱导组的HUVEC细胞活力(P<0.01);与对照组相比,随实验组多肽浓度增加,i NOS、COX-2和ET-1的表达明显逐渐减少(P<0.001)。对接结果表明,氢键是LSGYGP与ACE结合结构中的支撑力,而卡托普利通常与ACE的Zn2+离子形成紧密结合的相互作用。【结论】消化稳定的罗非鱼鱼皮多肽可明显抑制血管收缩因子和炎症因子的表达,展现了较好ACE抑制活性,LSGYGP与卡托普利的活性差异可能是由于ACE分子对接的作用力不同,这些可作为研发少副作用ACE抑制剂的药理基础。

破壁对西藏高原油菜蜂花粉胃肠道消化吸收特性的影响

实验以西藏高原油菜蜂花粉为原料,以破壁率为筛选指标,得出油菜蜂花粉在株磨仪中的最适添加量为4~8 g,此条件下的油菜蜂花粉的破壁率接近100%。以内容物浸出率、可溶性蛋白和多糖为检测指标,以4 g油菜蜂花粉添加量为基准,研究株磨仪研磨破碎前后油菜蜂花粉在模拟胃液、肠液和胃肠液中消化吸收特性。实验结果表明:油菜蜂花粉无需破壁就可以通过萌发孔释放内容物和其中的营养物质,即油菜蜂花粉无需破壁,就可以直接食用。