橘皮黄酮提取工艺优化及其对羟基自由基诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的抑制作用研究

以酶解超声提取法提取橘皮黄酮,通过单因素和正交试验研究纤维素酶质量浓度、超声时间、乙醇体积浓度、料液比对黄酮得率的影响,确定橘皮黄酮的最佳提取条件:纤维素酶质量浓度0.5 g/mL、超声时间60 min、乙醇体积浓度90%、料液比1:60(g/mL)。以香豆素-3-羧酸(Coumarin-3-carboxylic acid,CCA)荧光法和噻唑蓝(Methyl thiazoly1 tetrazolium,MTT)试验发现橘皮黄酮在浓度为20~100μg/mL范围内能有效清除Cu^2+催化H2O2及抗坏血酸产生的羟基自由基并有效抑制SH-SY5Y细胞的凋亡,且其作用效果呈浓度依赖性。

响应面优化超声波辅助酶法提取橘皮黄酮的研究

采用超声波辅助酶法提取橘皮黄酮,探讨了酶解温度、酶液用量、酶解时间和缓冲液p H对黄酮提取率的影响,并通过响应面法建立二次回归模型对提取工艺进行优化。红外光谱分析显示,提取物为典型的黄酮类化合物。响应面法优化结果表明,使用300 W功率超声波预处理20 min后,在酶解温度52℃、酶液用量0.96%、酶解时间90 min和缓冲液p H为4的条件下,黄酮的提取量可达到5.82%。